马齿笕多糖对糖尿病肾病大鼠肾纤维化因子的影响

王苑蓉叶大杰

王苑蓉叶大杰

（玉林市中西医结合骨科医院广西玉林537000）

【摘要】目的：研究马齿笕多糖对糖尿病肾病大鼠肾纤维化因子的影响。方法：采用尾静脉注射链脲佐菌素诱导，高脂饲料喂养90d的方法建立糖尿病肾病大鼠模型。将糖尿病肾病大鼠随机分为模型组、缬沙坦组、马齿笕多糖100、200、400mg•kg-1组，每组10只。每日灌胃给药1次，连续30d。另设正常组大鼠10只。正常组和模型组每日灌胃给予等体积的生理盐水。D90采集尿液，终点法测其24h尿白蛋白（UP）含量。全自动生化分析仪测定大鼠血清中肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）的含量。ELISA试剂盒测定大鼠肾脏中纤维化因子FN、TGF-β1。结果：与模型组比较，马齿笕多糖治疗组血清中Scr、BUN、UP含量明显降低，纤维化因子FN、TGF-β1的含量降低（P＜0.05）。结论：马齿笕多糖能改善糖尿病肾病大鼠的肾功能，其作用机制可能与降低纤维化因子的含量有关。

【关键词】马齿笕多糖；糖尿病肾病；纤维化因子；大鼠

【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2018）21-0098-02

糖尿病肾病（DN）是因肾脏长期受高血糖损伤影响，导致微血管病变的一种糖尿病并发症，是全球慢性肾衰竭的第一位原发病。近年随着糖尿病（DM）人群不断增加，DN的发病率也随之上升[1]。DN的出现一般出现在糖尿病病程的后期，由于目前尚无对DN有特异性疗效的药物，故DM患者一旦进入临床期DN，大多数均会进展为终末期肾功能衰竭，进而导致死亡。DN临床治疗较为复杂，目前多采用控制血糖、抗氧化、血管紧张素转化酶抑制剂等综合治疗，但仍难以阻止肾功能的持续减退[2]。因此，寻找开发对DN有特异性的治疗药物对DN的治疗有着重要的意义。马齿笕（PortulacaoleraceaL.）为马齿苋科一年生草本植物，是我国各地常见的野生植物，主要用于热痢脓血、肠炎、菌痢、糖尿病等多种疾病的治疗[3]。本研究通过建立DN大鼠模型，旨在考察马齿笕多糖对DN大鼠肾纤维化因子的影响，为马齿笕的开发和利用提供科学的基础实验数据。

1.材料

1.1动物

SD大鼠，SPF级，雌雄各半，体重200±20g，由广西医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK（桂）2013-0023。

1.2药物及试剂

链脲佐菌素（STZ），sigma公司分装，批号：SQ171；缬沙坦，杭州中美华东制药有限公司，批号：160818；转化生长因子-β1（TGF-β1）ELISA试剂盒（上海酶联生物科技有限公司，批号：B1710）；纤维连接蛋白（FN）ELISA试剂盒（上海酶联生物科技有限公司，批号：B1708）。

1.3实验仪器

罗氏卓越型血糖仪（ACCU-CHEKPerforma）；全自动血生化分析仪（日立7100）；128C型酶标仪（奥地利CliniBio公司）。

2.方法

2.1DN模型的建立[4]

大鼠造模前12h禁食不禁水，尾静脉注射STZ（130mg•kg-1），注射72h后检测其空腹血糖（FBG），FBG≥11.1mol•L-1的大鼠可作为糖尿病模型。将成糖尿病模型的大鼠给予高脂饲料进行喂养90d建立DN模型。

2.2分组及给药

将DN大鼠随机分为模型组、缬沙坦组（20mg•kg-1）、马齿笕多糖（100mg•kg-1、200mg•kg-1、400mg•kg-1），每组10只，普通饮食喂养，连续灌胃给药30d。另设空白组大鼠10只，普通饲料喂养，连续灌胃给与等体积生理盐水30d。

2.3检测指标

于灌胃给药d31腹主动脉取血，使用全自动生化分析仪测定大鼠血清中肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）的含量。剥离肾脏，匀浆。ELISA试剂盒检测肾脏中FN、TGF-β1的含量。

2.5统计学方法

应用SPSS18.0软件进行统计分析。数据均以x-±s表示，经方差齐性检验，方差齐者采用t检验，方差不齐者采用矫正t检验进行统计处理，P＜0.05有统计学意义。

3.结果

3.1马齿笕多糖对DN大鼠血清肌酐、尿素氮的影响

与模型组相比，缬沙坦组和马齿笕多糖给药组大鼠血清中肌酐、尿素氮、尿蛋白的含量均有所降低（P＜0.05）。结果见表1。

4.讨论

肾纤维化是一种以细胞外基质（ECM）的异常沉积为特征的病理性病变，由炎症反应期、纤维化形成期、瘢痕形成期所构成肾纤维化过程[5]。DN的临床表现主要是蛋白尿的出现，免疫复合物沉积在肾脏，导致肾脏局部微循环障碍，进而导致肾纤维化的形成。肾纤维化程度能反应肾功能减退的程度，也决定患者的预后[6]。TGF-β1是致纤维化因子中最强的，其可通过自分泌和旁分泌两种途径诱导肾脏细胞肥大，参与成纤维细胞的活化、增生、转化，降低基质金属蛋白酶的活性，减少其对ECM的降解，促进ECM的积聚[7]。实验结果表明，马齿笕多糖能改善DN大鼠的肾功能，减少尿蛋白，并减少纤维化因子FN、TGF-β1的含量，对DN大鼠肾脏有一定的保护作用。

【参考文献】

[1]郭福团，许雄伟，潘建峰，等.桑枝多糖对糖尿病肾病小鼠肾皮质氧化应激作用的影响[J].中国药理学通报，2016，32(8):1148-1152.

[2]陈关芬，辛丽芹.糖尿病肾病与合并糖尿病的非糖尿病肾病患者临床特征及预后比较[J].山东医药，2016，56(46):59-61.

[3]丁怀伟，姚佳琪，宋少江.马齿苋的化学成分和药理活性研究进展[J].沈阳药科大学学报，2008，25(10):831-838.

[4]XiaohuiXu,NiZheng,ZhaoniChen,etal.Puerarin,isolatedfromPuerarialobata,(Willd.),protectsagainstdiabeticnephropathybyattenuatingoxidativestress[J].Gene,2016,591(2):411-416.

[5]吕春燕，丁维俊.尿外泌体作为肾纤维化标志物的进展[J].实用医学杂志，2017，33(16):2799-2801.

[6]邱丹丹，蒋松，潘瑜，等.血磷水平与糖尿病肾病患者肾脏损伤及远期预后的关系[J].肾脏病与透析肾移植杂志，2016，25(3):208-213.

[7]曾奇虎，杨萍，翁静飞，等.外源性硫化氢对糖尿病肾病大鼠肾纤维化的影响及机制[J].山东医药，2017，57(46):34-37.