离心法和虹吸法制备冷沉淀凝血因子的质量对比

王湘屏

（衡阳市中心血站湖南衡阳421001）

摘要：目的通过离心法和虹吸法制备冷沉淀凝血因子并进行质量检测，比较两种制备方法对Ⅷ因子含量和纤维蛋白原Fbg含量的影响。方法随机抽取200mL新鲜冰冻血浆100袋，采用离心法和虹吸法各50袋制备冷沉淀，对制备的冷沉淀进行凝血因子Ⅷ因子和Fbg（纤维蛋白原）含量的检测，比较两组的实验数据和检测结果。结果离心法和虹吸法制备的冷沉淀Ⅷ因子含量分别为（93.25±6.8）IU和（81.35±5.3）IU，合格率分别为100%和95%，离心法和虹吸法制备冷沉淀FVⅢ含量（IU/袋）的差异有统计学意义（P＜0.05）；纤维蛋白原含量分别为（175.35±5.5）mg和（161．75±6.3）mg，合格率分别为100%和95%，离心法和虹吸法制备冷沉淀纤维蛋白原含量（mg/袋）的差异有统计学意义（P＜0．05）。结论用离心法制备的冷沉淀凝血因子质量指标优于虹吸法。

关键词：冷沉淀凝血因子；离心法；虹吸法；Ⅷ因子；纤维蛋白原（Fbg）

冷沉淀凝血因子是由新鲜冷冻血浆制备而成的成分血，主要含有Ⅷ因子、纤维蛋白原、vW因子、XⅢ因子以及纤维结合蛋白（Fn）等成分，在机体凝血过程中起着重要作用，适用于儿童及成人轻型甲型血友病、血管性血友病、先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症及因子XⅢ缺乏症病人，亦可用于手术后出血、严重外伤及DIC等病人的替代治疗。冷沉淀制剂中的第Ⅷ因子、纤维蛋白原含量是直接影响治疗效果的重要因素，且与制备过程密切相关[1]，因此制备方法的选择非常重要。

1资料与方法

1材料与方法

1.1仪器设备及检验试剂

贺利氏Cryofuge6000i型大容量低温离心机、CT-4T-6C型数字控制水浴血液融化箱、韩国森通SE250封管热合机、HXC-936血液储存冰箱（2～6℃）、贝索平板血浆速冻机、希森美康CA-50血凝检测仪、因子Ⅷ活性测定试剂盒（凝固法）（德国希森美康公司）、纤维蛋白原检测试剂盒（德国希森美康公司）。

1.2方法

1.2.1离心法取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆，置4±2℃冰箱中过夜融化，当血浆基本慢融化时，取出血浆在4±2℃的环境下重离心。将大部分上层血浆移至空袋，制成冰冻血浆，将留下的20～30mL血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子［2］。

1.2.2虹吸法将新鲜冰冻血浆置于CT-4T-6C型数字控制水浴血液融化箱中，空的转移联袋悬于水浴箱外，位置低于血浆袋，两袋之间形成一定的高度落差。血浆融化后，随时被虹吸至空袋中，当融化至剩下40ml～50ml血浆与沉淀物时，闭合导管，阻断虹吸。将血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子［2］。

1.2.3Ⅷ因子和纤维蛋白原的检测

对采用离心法和虹吸法制备的冷沉淀凝血因子各50袋，严格按照血凝仪和试剂操作说明书进行凝血因子VIII和纤维蛋白原含量的检测。

1.2.4统计方法通过SPSS19.0统计学软件对数据进行分析处理，计量资料以均数±标准差的形式表示，采用检验，P<0.05时，差异有统计学意义。

1.3质量标准

国家对于冷沉淀的主要成分凝血因子VIII和纤维蛋白原有着严格的标准，《全血及成分血质量要求》规定来源于400ml全血制备的冷沉淀，凝血因子VIII的含量为≥80IU，纤维蛋白原的含量≥150mg[3]。

2结果

2.1两种方法制备的冷沉淀Ⅷ因子和纤维蛋白原的含量比较

离心法制备的冷沉淀Ⅷ因子含量为（93.25±6.8）IU，纤维蛋白原含量为（175.35±5．5）mg，合格率为100%，高于虹吸法制备冷沉淀的Ⅷ因子含量（81.35±5.3）IU、纤维蛋白原含量（161.75±6.3）mg与合格率90%，差异有统计学意义。见表1。

3讨论

随着成分输血和合理用血理念的推广，冷沉淀凝血因子的应用被越来越多的临床医生掌握，输注血小板和冷沉淀凝血因子是临床止血的主要手段，配合药物、手术等综合治疗，能够起到很好的效果，是一项重要的抢救和治疗措施[4]。因此冷沉淀凝血因子的质量好坏对临床疗效的取得起着至关重要的作用，而选择合适的制备方法是非常关键的。根据离心法和虹吸法制备的冷沉淀凝血因子的质量检测结果对比，离心法制备的冷沉淀Ⅷ因子含量与纤维蛋白原含量均高于虹吸法，前者的制备合格率亦较后者高。与文献报道结果一致[5，6]。分析原因：①虹吸法制备冷沉淀时，因血袋中空气等缘故，通常不能使融化的血浆顺利流入到另一转移空袋，虹吸作用不充分或耗时较长，造成Ⅷ因子活性的降低。②在FFP溶解的过程中，冷沉淀有时不能形成大的凝聚团块，不能聚集吸附在中心未融化的冰块上或袋壁上，由于虹吸作用导致部分流失到另一转移空袋内，从而降低了FVⅢ和纤维蛋白含量。③由于虹吸造成动态流体环境血浆纤维蛋白原随冰块溶解而顺势流失。因此虽然两种方法制备的冷沉淀凝血因子质量均可达标，但是用离心法制备的冷沉淀凝血因子质量指标优于虹吸法。

参考文献

[1]蒋燕，陈宝葵，林敏诗，快速融化离心法与虹吸法制备冷沉淀的质量评价，江苏大学学报（医学版），2012，3（22）：167

[2]中华人民共和国卫生部.血站技术操作规程[J].卫医政发（2015）95号

[3]中华人民共和国国家标准GB18469-2012[J].全血及成分血质量要求

[4]刘辉，王建功，樊荣，等，冷沉淀凝血因子与单采血小板联合输注在严重创伤失血患者的临床观察[J].中国医学工程，2013，21，11，59-60

[5]史艾娟，谭明科．虹吸法与离心法制备冷沉淀的质量对比［J］．中国当代医药，2010，17（13）：149－150．

[6]杨玉峰，黄春萍，赵云，等．两种制备冷沉淀方法的比较［J］．实用医技杂志，2007，14（8）：1007－1008．

[7]徐利强，李建华，周忠英.冷沉淀凝血因子制备工艺改良[J].中国生化药物杂志，2011，32（2）：145-146.