双检测器在药物分析定性定量方面的应用

吕志祥

吕志祥（江苏省丹阳市人民医院药剂科212300）

【中图分类号】R197.39【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）49-0065-02

【摘要】目前可以用于药物（尤其是成分复杂的中药）定量检测的色谱方法主要有薄层色普法、高效液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法以及凝胶电泳法等，但是在检测中多使用单一的检测器：紫外检测器或者二极管检测器，从而使可以同时测定的化合物种类和灵敏度受到限制，本文主要介绍了色谱分析中常见的一些检测器，以及双检测器在高效液相色谱、凝胶色谱、气相色谱中的应用，用于实现对各种药物（尤其是复杂中药）中成分中的定量分析，为广大药物工作者在今后更好地从事色谱分析工作，提供一些相关的知识。

【关键词】双检测器色谱定性定量

1、前言

色谱法是一种物理化学分离方法，它是由俄国化学家茨维特首先提出的。它是根据混合物中不同组分在两相(固定相和流动相)中具有不同的分配系数(或溶解度)，当两相做相对运动的时候，不同组分通过在两相间进行反复多次的分配，使得那些分配系数只有微小差别的组分，在移动速度上产生了很大的差别，从而达到使混合物中不同组分相互分离。这些经过分离后的各组分依次通过检测器，把检测器所检测到的信息放大后经过A／D转换，传送到上位机，上位机根据所检测到的信息，对各个组分进行定量分析，并对当前变压器的运行状况作出判断[1]。

半个世纪以来，随着科学技术的不断发展，色谱技术也得到了长足的发展，在高效液相色谱中，高精度的输液泵，应用广泛的色谱分离柱，低噪音、高灵敏度的各种检测器和功能强大的数据处理软件系统的出现，使其成为实验室中应用广泛的现代分析仪器之一。高效液相色谱仪主要是由高压输液泵、进样器、色谱分离柱、检测器和色谱软件数据处理系统组成，其中，高压输液泵、色谱柱和检测器是三大主要部件[2]。但是随着中药复方制剂等药物剂型的出现，在色谱分析工作中，关于多组分同时定性、定量等方面又面临着一些新的问题，双检测器联用、甚至多检测器联用技术，克服了已有方法的不足，为中药复方复杂体系的多组分同时定量测定及其质量控制提供了一种简便、可靠、合理的新模式。

2、双检测器联用技术在药物定量分析中的应用

2.1双检测器在液相色谱中的应用

高效液相色谱作为一种高效的分离分析手段，已经在全球的几乎所有化学实验室中得到普及和应用。随着社会的发展和科技的进步，人们在期望在得到尽可能多的信息的同时，也希望尽可能缩短分析时间，因此，高效、快速的分离方法方法发展已经成为分析化学领域的重要研究方向。

今天，在科技的许多领域里，色谱分离分析所涉及的样品越来越复杂，样品的数量持续增长，对建立快速、高效的分离方法的呼声越来越高。其中检测器的串联使用，包括双检测器或者多检测器联用技术可以部分集成快速、高效的统一，显示出强大的生命力。刘琳[3]等高效液相色谱-二极管阵列检测-电化学检测联用技术同时测定三精双黄连口服液中的4种化合物中利用二极管检测器以及电化学检测器联用技术，简便、快速地测定了三精双黄连口服液中的绿原酸、咖啡酸、黄芩苷和木犀草素四中不同物质；魏玉辉[4]等在高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器联用同时检测复方丹参片中三类有效成分中根据各类成分紫外吸收光谱的差异，分别在287，246，263，292和268nm波长下检测丹酚酸B、二氢丹参酮、阴丹参酮、丹参酮I，次甲基丹参酮和丹参酮II并采用主成分分析、聚类分析法进行质量评价，得出生产工艺和药材产地为影响药品质量的主要因素．成洪达[5]等在六味地黄丸的串联双检测器高效液相色谱分析中采用紫外检测器与蒸发光散射检测器串联的方式构建了高效液相色谱分析系统，并用于对六味地黄丸的分析研究。紫外检测器共检测到26个色谱峰；蒸发光散射检测器检测到31个色谱峰，其中15个色谱峰为可以认证的共有峰，所构建的系统适宜于中草药的指纹图谱研究，可以用于药物的定性分析。

2.2双检测器在气相色谱中的应用

气相色谱法具有分离效率高、应用范围广、分析速度快、样品用量少、灵敏度高、一次进样可以分析多种组分等突出优点，在各行各业中得到了广泛的应用，为了提高气相色谱仪分析复杂样品的分辨能力，近年来国外进行了多维气相色谱以及双通道气相色谱的应用研究[6]，即利用多柱(炉)多检测器或同柱(炉)双检测器等方法测定性质不同的多组分化合物。

孙亚娟[7]等在GC双检测器技术筛选常见毒(药)物的可行性研中用气相色谱仪，在样品进样经单柱分离詹通过Y形管连接至两个不同选择性检测器(NPD／FID)的方法，考察气相色谱操作条件对双检测器响应比值的影响及其该法用于复杂样品测定的可行性，结果表明样品中待测组份的浓度改变不影响NPD／FID响应比值；Jimenez[8]等利用GC-NPD和GC-ECD分析了蜂蜜中的农药残留;臧利国[9]等在洋葱中多种农药残留的双柱双检测器气相色谱分析法中，用气相色谱-火焰光度检测器和气相色谱-电子捕获检测器分别直接测定各种农药残留含量，结果表明，采用程序升温，所测定的有机磷和菊酯类农药得到了很好的分离；谢慧[10]等在气相色谱仪双毛细管柱双检测器技术在毒物检测中的应用中，利用VSOS（capiiiaryOutietspiitter）装置将单柱单检测器改造成双毛细管柱双检测器。样品进样后经VSOS进入两根不同极性的毛细管柱，然后分别至两个不同选择性的检测器，利用该方法研究气相色谱不同检测器对同一毒物的响应情况。

2.3双检测器在凝胶电泳色谱中的应用

GPC又称为体积排阻色谱，它是按溶质分子的大小进行分离的一种色谱技术，通过多孔性凝胶固定相，使得样品中的大分子先被洗脱出来，小分子后被洗脱出来，GPC可以分离相对分子质量从400到107的分子。GPC作为一种快速的相对分子质量及其分布测定方法，几十年来一直都是非常活跃的研究课题。其应用范围逐步从生物化学、高分子化学、无机化学向其他领域渗透，在药物残留分析中已成为一种重要的分离、净化手段[11]。

张志远，谷晓昱[12]在利用凝胶渗透色谱示差-紫外检测器联用测定丁苯共聚物的组成分布中根据紫外-示差检测器联用可以看到SBR无规共聚物和三嵌段SBS共聚物样品中每一个级分中随着相对分子质量的变化、苯乙烯含量的变化；徐涛，赵颖彬，陈曙东[13]GPC法测定塑料粘结炸药中高分子材料的相对分子质量及其分布中用凝胶渗透色谱法使用示差折光检测器与二极管阵列检测器联用技术，并根据高分子材料在溶剂中的不同溶解能力对塑料粘结炸药中偏氟乙烯一三氟氯乙烯共聚物和苯乙烯一丙烯腈共聚物混合体系进行了分离及相对分子质量测试，获得混合体系中单一组分的相对分子质量及其分布，建立了适合于该混合体系的GPC测定方法。

3、多检测器在药物分析中的应用

多检测器联用技术是指三个或者三个以上的检测器联用技术，在这一领域现如今也已经有所研究，但是在药物分析中的应用还是比较少，主要是在高分子化合物的分析中应用较多，Grubisic-Gallot等[14]曾采用SEC／UV／LALLS／RI／CV四检测串联技术研究了甲基丙烯酸乙酯／氘化甲基丙烯酸甲酯嵌段共聚物、苯乙烯／甲基丙烯酸甲酯嵌段共聚物和苯乙烯／二甲基硅氧烷二嵌段共聚物；黄怿[15]等在多检测GPC／SEC技术在高分子表征中的应用Ⅴ.PS-PI二嵌段共聚物采用体积排斥色谱法／示差折光指数／直角激光光散射／示差粘度三检测联用技术表征PS-PI二嵌段共聚物。

4、检测器联用技术在色谱分析工作中存在的局限性

多检测器组合检测法是近20年来，特别是近10年来，为解决复杂样品的分析而发展的新颖方法，它是色谱检测方法的发展倾向之一。利用该方法对未知毒物进行检测，能够较好的避免漏检问题的发生，而且提高了仪器的利用率，降低了成本，适合基层公安机关对常见毒物进行检测，但是同时，在如何进行检测器链接、样品的预处理等方面也存在着很多的科技难关需要去攻克，如何才能够使用更加廉价的成本去进行更有效、快捷的药物分析工作，一直是困扰着我们的问题。

参考文献

[1]康建爽，蒋书波，程明霄，储琴.MEMS技术在变压器故障监测中应用研究.传感器与微系统.2009，28（12）21-23.

[2]李笃信.高效、快速液相色谱系统的构建及评价.硕士论文，2007，06.

[3]刘琳，索志荣，郑建斌.高效液相色谱-二极管阵列检测-电化学检测联用技术同时测定三精双黄连口服液中的4种化合物色谱.2006，24（3）：247-250.

[4]魏玉辉，姚小军，武新安，杜玮，赵刚，高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器联用同时检测复方丹参片中三类有效成分.

[5]成洪达，唐涛，李彤，张维兵.六味地黄丸的串联双检测器高效液相色谱分析.分析科学学报，2008.24（6）：677-679.

[6]LillsundeP，seppalaT，simultaneousscreeningandquantitativeanalysisofbenzodiazepinesbydualchannelgaschromatographyusingelectron-cap-tureandnitrogen-phosphorusdetection[J]，journalofchromatographB.

[7]孙亚娟，吴伴天，卓先叉，沈保华，沈敏.GC双检测器技术筛选常见毒(药)物的可行性研.

[8]JinemezJJ，BernelJL．MaJdelNozaLeta1．JournalofChromatographyA．1998，(823)：381.

[9]臧利国，唐波，张金娥，李向阳，周力，张耀中.洋葱中多种农药残留的双柱双检测器气相色谱分析法.分析试验室，2003，22（11）.

[10]李文海，谢慧.气相色谱仪双毛细管柱双检测器技术在毒物检测中的应用.分析试验室.200726（1）：116-118.

[11]刘咏梅，王志华.储晓刚.凝胶渗透色谱技术在农药残留分析中的应用.分析测试学报，2005，24（2）：123-127.

[12]张志远，谷晓昱.利用凝胶渗透色谱示差-紫外检测器联用测定丁苯共聚物的组成分布.分析试验室，2007，26(4)：104-107.

[13]徐涛，赵颖彬，陈曙东，GPC法测定塑料粘结炸药中高分子材料的相对分子质量及其分布.化学分析计量，2004，13（5）：22-24.

[14]Grubisic-GallotZ，LingeiserJP，GallotY.Characterizationofblockcopolymerbysizeexclusionchromatography［J］.PolymerBulletin，1998，23：389-395.

[15]黄怿，卜乐炜，郝磊，张德震，苏诚伟，徐种德，多检测GPC／SEC技术在高分子表征中的应用Ⅴ.PS-PI二嵌段共聚物.功能高分子学报，2005，13（3）：11-13.