CLIA与CGT检测梅毒特异性抗体的实验室评价

王静

（四川省泸州市西南医科大学附属医院输血科四川泸州646000）

【摘要】目的：探讨化学发光免疫测定（CLIA）与TP胶体金试验（CGT）检测梅毒的敏感度和特异度。方法：739例梅毒患者，进行CLIA试验和CGT试验，用TP血球凝集试验（TPHA）进行确诊。采用SPSS19.0软件绘制抗TP抗体S/CO比值受试者工作特性(ROC)曲线，得到敏感度和特异度最佳时的S/CO比值。结果：CLIA检测梅毒特异性抗体的敏感度为：98.85%，特异度为：93.55%，AUC:0.996；CGT检测梅毒特异性抗体的敏感度为：96.8%，特异度为：92.86%,AUC:0.984。结论：CLIA的灵敏度和特异度较高，特异度和灵敏度都优于CGT，诊断价值亦优于CGT。可作为梅毒特异性抗体筛查实验在临床上广泛应用。

【关键词】梅毒；化学发光免疫测定；胶体金试验；TP血球凝集试验

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2017）02-0397-02

Laboratoryevaluationofdetectiontreponemalantibodybychemiluminescenceimmunoassayandcolloidalgoldtest

WangJing.

BloodbankintheAffiliatedHospitalofSouthwestMedicalUniversity,luzhou646000,China

【Abstract】Objectivewecomparethesensitivityandspecificitybychemiluminescenceimmunoassay(CLIA)testtreponemalantibodywithcolloidalgoldtest(CGT)testtreponemalantibody.MethodsSerumof739patientsweretestedviaCLIA、CGTandtreponemalHemagglutination(TPHA).ThesoftwareSPSS19.0wasusedtodrawthereceiveroperatingcharacteristic(ROC)curve,andtheS/COratiowasobtainedwhenthesensitivityandspecificitywerethebest.ResultsThesensitivityofCLIAIS98.85%andthespecificityis93.55,AUCis0.996;CorrespondingpartofCGTis92.85%、93.55%and0.984.ConclusionThesensitivityandspecificityofCLIAisbetterthanCGT.ThevalueofDiagnosisalsosuperiortoCGT.ItCanbeusedasatreponemalantibodyscreeningtestintheclinicalapplicationwidely.

【KeyWords】Syphilis;Chemiluminescenceimmunoassay;Colloidalgoldtest;TreponemalHemagglutinationtest

随着我国对外开放政策的实施，经济的快速发展，梅毒（Syphilis）的发病率呈现逐年上升的趋势[1]。梅毒是由苍白密螺旋体的苍白亚种所引起的一种接触性、系统性的慢性传染病。人类感染梅毒后机体会产生两种抗体，一种是苍白密螺旋体的苍白亚种也就是梅毒螺旋体的特异性抗体（IgG和IgM），另一种则是非特异性抗体，可以与生物组织体内的类脂发生非特异性反应。本文探讨化学发光免疫测定（CLIA）与TP胶体金试验（CGT）检测梅毒的敏感度和特异度，比较两种方法对于梅毒特异性抗体的诊断价值。

1.材料与方法

1.1研究对象

预实验中检测149例患者，根据样本的估算公式，纳入739例梅毒患者，经临床病历证实。其中梅毒Ⅰ期279例，梅毒Ⅱ期294例,梅毒Ⅲ期72例，潜伏期梅毒42例。同时选取住院患者中的52例非梅毒患者，作为阴性对照，经临床病例和患者症状证实，为SLE，肺结核患者，也有部分为心血管疾病患者。

1.2仪器和试剂

化学发光仪型号：北京科美生物技术有限公司提供的CHEMCLIN1500；CLIA试剂盒由北京科美生物技术有限公司提供。CGT试剂盒由艾博生物医药（杭州）有限公司提供。TP血球凝集试验（TPHA）试剂盒由Omega公司提供。

1.3方法

CGT、TPHA和CLIA均按照试剂盒说明书操作，对患者梅毒螺旋体抗体进行血清血检测。CLIA结果由计算机统计计算S/CO比值；CGT、TPHA判读的结果均有两人以上的实验员进行判读和复核。

1.4统计学方法

采用χ2检验，数据由SPSS19.0软件处理。

2.结果

2.1739例患者的CLIA和CGT检测结果具体数据见表1。抗梅毒螺旋体抗体抗体筛查呈阳性反应(S/CO比值≥1.0)，抗梅毒螺旋体抗体抗体筛查呈阴性反应(S/CO比值≤1.0)。TPHA的结果按照滴度≥1:20为阳性反应。CGT的判读按照是否出现检测线为阳阴性标准。

3.讨论

Ⅰ期、Ⅱ期梅毒三种方法均能检测阳性，且结果一致。梅毒Ⅲ期和潜伏期梅毒中，CLIA检测8例为假阴性，这与患者抗体的前带反应有关。而在非梅毒患者中，由于CLIA灵敏度高，有极少的患者体容易产生生物学假阳性出现。后查验化学发光值，均为低值，处于检测灰区。

CLIA的原理主要是：标本或包被有重组TP抗原的微粒子与稀释液混合，标本抗TP抗体同包被TP抗原结合，清洗后，加入标记吖啶脂抗人IgM或IgG抗体，再洗涤，加预激发液、激发液，通过测定反应液的相对光强度以检测血清梅毒螺旋体特异性抗体的浓度水平[2]。CLIA检测梅毒抗体是应近年来检测的要求而出现并被应用的一项新技术，有研究显示CLIA检测各期梅毒螺旋体的敏感度均较高，在98.7%～100.0%之间，特异高[3]。这种方法从检测到结果判定均由仪器自动完成，操作方便，人为干扰少，结果客观准确。与本次研究而得出的敏感度98.85%和特异度93.55%无显著性差异。

TPHA的实验原理主要是用羊或火鸡红细胞做为抗原载体，吸附从兔睾丸中提取的TP抗原，检测血清中梅毒螺旋体特异性抗体。由于试剂制备过程排除了各种非特异性反应，敏感性和特异性都极高。该试剂成本较高，操作较麻烦，若使用时间长，保存不当易发生自凝现象和生物学假阳性[4]。由于本院就诊患者多，使用频率高，速度快，故本实验的结果更加可靠准确。本实验同样证实对Ⅰ期、Ⅱ期梅毒及潜伏期梅毒诊断均为100%，敏感性高，特异性强。一般用于梅毒的确诊试验，验证不是螺旋体抗原试验结果，尤其适用于潜伏期梅毒和非梅毒螺旋体感染，临床高度怀疑梅毒的患者[5]。

CGT的实验原理是运用双抗原夹心法，用胶体金作为标志物，特异性的梅毒抗原作为包被和标记抗原，硝酸纤维素膜为载体来进行反应检测待测血清中的梅毒螺旋体特异性抗体。有研究显示[6]用此法检测与TPPA方法相比较，灵敏度为94.45%，特异性为92.6%，也有报道[7]称其敏感性、特异性分别为98.21%和99.04%。这与本研究中的灵敏度和特异度分别为：96.94%和92.86%结果无显著性差异。

CLIA作为一种新开发的梅毒特异性抗体检测试剂，具有极高的敏感度和特异性，两个检测指标都优于CGT，而AUC结果显示CLIA的诊断价值高于CGT。操作简便快捷、结果判断客观和重复性好等优点，很适合用于临床上逐年提高患者检测量的临床初筛实验中。

梅毒血清学检测时，先改进传统的工作步骤，用CLIA法检测，阴性的标本可以不做其他的梅毒检测试验；不过CLIA试验中的钩状效应以及检测中出现的个别生物假阳性，可以结合TPHA或者其他非梅毒螺旋体血清试验，若结果不一致，可以结合PCR或者WB结果综合分析以及与临床沟通，做好随访复测工作。临床医生在诊断梅毒时也要结合临床资料，以排除生物学原因造成的假阳性。以期为临床提供最准确的检验报告，为患者提供最准确的治疗指导。

【参考文献】

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