HPLC测定消痛宁注射液中苯甲醇的含量

杨志伟侯磊郭延勋

吉林省松原市食品药品检验所，吉林松原138000

摘要：目的建立同时测定消痛宁注射液中苯甲醇含量的方法。方法采用HPLC法。.Kromasil100-5C18柱（4.6mm×250mm，5μm），以甲醇-乙腈-水（10：25：65）为流动相，流速1.0ml/min，检测波长218nm。结果苯甲醇的线性范围为0.0051～0.1025μg（r=0．9998)。平均回收率分别为97.73%，RSD=0.1%（n=6）。结论所建方法简单可行，分离效果好，灵敏度高，重复性好，准确可靠。

关键词：消痛宁注射液；苯甲醇；高效液相色谱法

HPLCDeterminationofAntipyrineandCaffeineofXiaotongningInjection

YANGZhi-weiHOULeiGUOYan-xun

JilinprovinceSongyuanInstituteoffoodanddrugcontrol，Songyuan138000

Abstract：ObjectiveToestablishthemethodofdeterminationthebenzylalcoholofxiaotongninginjection.MethodsHPLCwasusedtodeterminethebenzylalcoholofxiaotongninginjection.TheSolidphasewasKromasil100-5C18（4.6mm×250mm，5μm)andthemobilephasewasMethanol：Acetonitrile：Water（10：25：65)atflowrateof1.0ml/min，thedetectionwavelengthwas218nm.ResultsThecalibrationcurvesofthebenzylalcoholwaslinearwithintheconcerntrationof0.0051～0.1025μg（r=0.9998)andtheaveragerecoveryrate97.73%withRSD0.1%（n=6).ConclusionThemethodsweresimple，feasibleandshowedagoodresolution，highsensitivity，goodreproducibility，accuracyandreliable.

Keywords：xiaotongninginjection；benzylalcohol；HPLC

消痛宁注射液为较常用的化学药品制剂品种，处方由安替比林、咖啡因和辅料苯甲醇、枸橼酸、乙二胺四醋酸二钠及注射用水组成，为解热镇痛药，用于偏头痛。原质量标准中采用容量分析法含量测定为两个主要成分，没有苯甲醇定量分析或检查的检验项目。处方中苯甲醇主要为防腐剂和保护剂，但苯甲醇易被氧化而影响疗效[1-2]，同时过量的苯甲醇会带来溶血、低血压、局部刺激及臀部痉挛等不良反应[3-4]。所以控制该制剂中苯甲醇的含量可以更好地保证消痛宁注射液的质量。本文采用高效液相色谱法测定苯甲醇的含量，结果分离效果好、灵敏度高、具有较好的重现性、测定结果准确。

1实验部分

1.1仪器与试药

北京普析通用L6－AS6型高效液相色谱仪，UV-1901紫外分光光度计，对照品由中国食品药品检定研究院提供，批号：190019-201301。规格：供含量测定用。甲醇、乙腈为色谱纯；水为超纯水。样品由吉林百年汉克药业有限公司提供。

1.2方法与结果

1.2.1色谱条件色谱柱：.Kromasil100-5C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇-乙腈-水（10：25：65）；流速1.0ml/min；柱温为室温；检测波长为218nm，理论板数按苯甲醇峰计算不低于3000。

1.2.2溶液的制备

1.2.2.1对照品溶液的制备

精密称取苯甲醇对照品15mg，置l00ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

1.2.2.2供试品溶液的制备

精密量取本品2ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

1.2.3测定波长的选择

取苯甲醇对照品（30μg/ml）溶液，在200nm-400nm范围内扫描，最大吸收的波长为257nm，218nm，213nm。结合二部药典有关品种项下的方法，选择218nm为本实验的测定波长。

1.2.4线性关系及范围

精密称取苯甲醇对照品0.1515g，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，分别精密量取1.0ml、1.0ml，2.0ml、4.0ml、8.0ml，分别置1000ml，100ml，100ml，100ml，100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，采用1.2.1的色谱条件，分别精密量取10μl，进样，测定峰面积，以对照品进样量为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程为Y=11489.1450X+10157.1508（r=0.9999），结果表明苯甲醇在0.0051～0.1025μg范围内，呈线性关系，符合外标法定量测定的要求。

1.2.5专属性试验

分别取对照品溶液、供试品溶液、及按【处方】比例配制的不含苯甲醇的阴性样品、溶剂分别进样，测定，从色谱图中可以看出，供试品图谱中，在与对照品溶液色谱图主峰保留时间相同的保留时间，有与对照品主峰一致的色谱峰，阴性样品及溶剂色谱图中，没有与对照品主峰一致的色谱峰，证明正文所述方法具有良好的专属性。色谱图见图1。

1.2.6检测限测定

精密称取苯甲醇对照品15mg，置l00ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml置200ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，进样10μl，测定，观察色谱图，峰高约为噪声的3倍，测得检测限为0.015μg。

1.2.7重复性试验

取供试品溶液品6份，按1.2.2.2供试品溶液制备方法制备供试液；再取苯甲醇对照品，按1.2.2.1对照品溶液制备方法制备对照品溶液，采用1.2.1色谱条件测定峰面积值，分别计算出苯甲醇的含量，结果苯甲醇测定RSD均为0.2%。表明该方法具有良好的重复性。

1.2.8稳定性试验

取供试品溶液1份，在0、4、8、12、16、20、24小时时分别测定苯甲醇的含量，计算RSD为0.1%。证明24小时内供试品溶液中苯甲醇的含量基本稳定。

1.2.9精密度试验

取供试品溶液1份，按1.2.1色谱条件测定，重复进样6次，测定苯甲醇的峰面积值，计算RSD为0.1%。说明仪器精密度良好。

1.2.10回收率

精密吸取已知含量的供试品（吉林百年汉克药业有限公司，批号为15052611，苯甲醇含量为1.33mg/ml）6份各1ml，分别精密加入苯甲醇对照品溶液（149μg/ml）10ml；依法测定，计算回收率，结果见表1。

表1回收率试验结果

2讨论

在该制剂中，苯甲醇作为辅料，一般起到防腐和止疼作用，但质量标准中大多数没有建立控制方法，本实验对注射剂样品中苯甲醇的含量测定方法进行探索，对药品标准的进一步提高起到积极作用。

参考文献：

[1]李海鹰.高效液相色谱法测定多烯磷脂酰胆碱注射液中苯甲醇含量[J].中国药业，2007，16（21）：21-22.

[2]陈莉.高效液相色谱法同时测定盐酸苯海拉明注射液中苯甲醇的含量[J].海峡药学，2013，12（25）：121-123.

[3]李静.反相高效液相色谱法测定曲安奈德注射液中苯甲醇的含量[J].中国合理用药探索，2005，4（14）：22-26.

[4]徐岳鑫，王玉.高效液相色谱法测定穿心莲注射液中苯甲醇含量[J].中国药业，2013，11（22）：37-38