聚酰胺法交叉配血的应用

张小林张汉乐张晓燕

（宁夏第五人民医院石炭井医院宁夏石嘴山753000）

摘要：目的：探讨凝聚胺交叉配血在临床输血交叉配血中的临床意义方法：通过凝聚胺交叉配血的操作过程讨论凝聚胺交叉配血的稳定性，方便性，重复性结论：凝聚胺交叉配血技术既可检测出完全抗体，又可检测出具有临床意义的不完全抗体

关键词：交叉配血；改良聚酰胺法

[中图分类号]R4[文献标识码]A文章编号：

1.聚酰胺（polymatching)法原理

首先利用低离子介质降低溶液的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，促进血清（浆）中的抗体与红细胞相应抗原结合，再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液，中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距，形成可逆的非特异性聚集，并使IgG型抗体直接凝集红细胞。加入中和液后，仅由凝聚胺引起的非特异性聚集，会因电荷中和而分散，而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。

2.标本采集

标本种类：抽取受血者静脉血3—4ml待凝固后，离心分离出血浆，将红细胞配成3%—4%生理盐水悬液。供血者血样用上述同法分离血清（浆）和红细胞悬液。

3.试剂

3.1试剂名称：改良聚酰胺试剂

3.2试剂生产厂家：伊诺维盛技术生物有限公司

3.3试剂组成：低离子介质(LIM)，聚酰胺溶液（POLYBRENE),假凝集清除液（F.A.E.S)

4.操作步骤和结果判断

在主测管内加入受血者血清2滴和供血者3%—4%红细胞悬液1滴;次测管加入供血者血清2滴和受血者3%—4%红细胞悬液1滴。各管加入低离子介质3滴，混匀，于室温下静置1分钟，各管加入聚酰胺溶液1滴，混匀,3500转每分钟离心15秒，弃去上清液，留约0.1毫升，振荡摇匀，肉眼可见管底出现凝集，各管加入假凝集消除液1滴，轻轻摇动试管混匀后观察结果。若凝集在一分钟内消除成为均匀的混悬液，为阴性，说明配血结果相合；若凝集在一分钟内门源消失，则为阳性，是红细胞抗原抗体结合的特异性反应，说明配血结果不相合。

5.操作性能：

快速简便，特异性强，灵敏度较高，重复性好。

6.超出范围结果处理：

6.1细胞自凝：在冬天气温较低时，某些病人血清中含有冷凝集素而导致交叉配血假阳性;遇此现象可用37℃-40℃生理盐水洗涤红细胞并置37℃水溶中轻轻摇动，观察结果。

6.2若病人血清(血浆)含有肝素，如洗肾患者能影响配血，须多加4-6滴polybrene溶液以中和肝素。

6.3红细胞悬液为5％为宜，过浓或过淡可使抗原抗体比例不适当，反应不明显易误判。

6.4各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集，部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体。

7.讨论

凝聚胺交叉配血技术既可检测出完全抗体，也可以检测出具有临床意义的不完全抗体，同时可帮助临床诊断出一些自身免疫性疾病，尤其是自身免疫性溶血性贫血。实践证明，凝聚胺试剂稳定性好，操作方便，重复性好，而且不需要特殊设备，大中小医院均可操作，适宜推广普及。

8.方法局限性：

8.1试管，滴管吸头和玻片必须清洁干燥，防止溶血。

8.2操作方法应按规定，先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。

8.3离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。

8.4观察时应注意红细胞呈特异性凝集，继发性凝固及线状排列的区别

收稿日期：2015-10-13