苦参碱对SiHa肿瘤细胞生长的影响

吴旭

蒋红贾艾敏王丽恒杜华英雷佳红杨明辉（通讯作者）

(川北医学院附属医院四川南充637000)

【摘要】目的：观察苦参碱对SiHa肿瘤细胞生长的影响。方法：将不同浓度的苦参碱作用于SiHa细胞，分别于24h、48h后用MTT法检测各组细胞生长情况。并用统计软件SPSS19.0对结果进行分析。结论：苦参碱能明显抑制宫颈癌细胞株SiHa细胞生长。

【关键词】苦参碱；SiHa细胞；细胞生长

【中图分类号】R73-3【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2016）14-0025-02

MatrineaffectSiHatumorcellgrowth

JiangHongJiaAimin,WangLihengDuHuaying,LeiJiahong,YangMinghui(correspondingauthor).NorthSichuanMedicalCollegeAffiliatedHospital,SichuanProvince,Nanchong637000,China

【Abstract】ObjectiveObservethematrineaffectSiHatumorcellgrowth.MethodsThedifferentconcentrationsofbitterandalkaliontheSiHacells,respectivelyin24hand48haftertestingeachcellgrowthbydeterminedbyMTTmethod.ResultswereanalyzedwithstatisticalsoftwareSPSS19.0.ConclusionsMatrinecanobviouslyinhibitthegrowthofcervicalcancercelllinesSiHacells.

【Keywords】Matrine;SiHacells;Cellgrowth

宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁到女性的健康，其病理类型主要有宫颈腺癌、鳞状细胞癌及腺鳞癌三种，其中鳞状细胞癌占比80%左右[1-2]。近年来中药也越来越多地被应用到抗癌药物的研究及临床治疗中，苦参碱是从中药苦参中提取的一种新型药物，具有抗肿瘤、抗肝损伤及抗肝纤化等药理活性。本实验组将苦参碱应用于宫颈癌SiHa细胞，探讨苦参碱对SiHa细胞株生长的影响，为其抗肿瘤治疗奠定实验基础。

1.材料及方法

1.1材料

宫颈癌SiHa细胞（本院风湿免疫研究所保存）；苦参碱（0.15g／瓶，湖北午时药业股份有限公司，分子量：248.37）实验时配用；MTT（购自AIDSCIENCE公司），用磷酸盐缓冲液(PBS，pH7.2)配制成5mg／ml的溶液，-20℃避光保存；胰酶、DMSO（购自Gibco公司）。

1.2方法

1.2.1SiHa细胞培养

用含双抗(100U/ml青霉素、100mg/L链霉素)、10％胎牛血清的1640培养液，在37℃、5%CO2培养箱中进行宫颈癌SiHa细胞培养，倒置显微镜下观察细胞生长情况。待细胞浓度约70%～80%时，进行传代培养。取对数生长期的细胞用于实验。

1.2.2MTT检测细胞生长

取处于对数生长期的SiHa细胞，弃去培养基，用PBS洗3遍，即加0.25％的胰酶溶液（以覆满瓶底为限）将贴壁细胞消化分离，后加入完全培养液使反应终止，轻轻吹打均匀，配制成1×103个/ml的细胞悬液，接种于96孔板中，每孔200μl。培养24h后加入不同浓度的苦参碱（0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0）mg/mL，另设空白对照组（只加培养基）。每个浓度设8个复孔，培养24h、48h后，吸去原培养液，每孔加200μl无血清1640培养液及MTT20μl，继续培养4h。吸出各孔原液，每孔加入150μlDMSO后震荡10min使结晶充分溶解。在酶标仪上测定各孔490nm处的吸光度A值，最后计算细胞生长抑制率。

细胞生长抑制率=（对照组A490-用药组A490）/对照组A490×100%。

1.3统计学分析

所有数据以（x-±s）表示，采用SPSS19.0软件处理，进行方差分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

将不同浓度的苦参碱作用于SiHa细胞，24h、48h后，其对宫颈癌SiHa细胞的抑制率呈剂量依赖性。不同浓度苦参碱组作用不同时间，其对SiHa细胞的生长抑制率间的差异有统计学意义（P＜0.05），具体如下表所示。

3.讨论

宫颈癌为女性常见恶性肿瘤，严重威胁着女性健康及生命安全。尤其近几年来的环境污染加剧及人们性生活观念的改变，都使得宫颈癌的患病率逐年攀升[1-2]，且发病年龄也愈加年轻化，因而临床有效治疗手段是目前医学界的研究热点和重点。其治疗手段主要包括手术、化疗以及放疗，虽然抗肿瘤的效果较为显著，但其对正常细胞的伤害作用严重影响着临床疗效以及患者的生命质量。

研究结果显示，将不同浓度的苦参碱作用于SiHa细胞24h和48h后，MTT结果显示细胞抑制率为2.8%～24.72%，随药物浓度增加，抑制作用增强。不同浓度苦参碱组作用不同时间，其对SiHa细胞的生长抑制率间的差异具有统计学意义（P＜0.05）。

综上所述，苦参碱对于宫颈癌SiHa细胞株生长具有一定的抑制作用，且抑制率与苦参碱浓度呈明显的剂量依赖性。这为今后进一步研究苦参碱的抑瘤机制和探索开发宫颈癌新的药物治疗提供了初步的实验依据。但具体作用机制仍有待进一步研究。

【参考文献】

[1]刘邦,刘钧,蹇顺海等.Eag1钾离子通道、HIF-1α以及VEGF在子宫颈癌中的表达及其临床意义[J].川北医学院学报,2014,29(1):57-62.

[2]鲁永婷,李惠新,拓振合等.氧化苦参碱对人宫颈癌SiHa细胞株增殖及凋亡的影响[J].世界科技研究与发展,2014,36(3):281-285.