目的应用自制的大肠癌相关蛋白SCAP47作为抗原制备兔多抗血清和鼠单克隆抗体，测定效价，鉴定特性，为相关抗体的临床应用提供可行性依据。方法①制备兔多抗血清：实验动物为纯种新西兰白兔，卡介苗基础免疫后，分次多点注射抗原，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和双向凝胶扩散法测血清效价，分离高效价血清。②制备小鼠单克隆抗体：实验动物为BALB／c小鼠，分次腹腔、脾内注射抗原蛋白乳剂和水剂，采用ELISA测血清效价，高效价鼠脾细胞与骨髓瘤SP2／0细胞融合，有限稀释法亚克隆阳性细胞株，克隆细胞种植小鼠腹腔，收获腹水，纯化单克隆抗体，鉴定抗体效价、亚类、纯度。结果①3只实验兔中2只产生了一定效价的多抗血清，多抗血清效价：间接ELISA结果兔1为1：6400，兔2为1：1600；琼脂糖双扩试验结果兔1为l：32，兔2为1：4。②克隆了2株能产生抗SCAP47抗原的单克隆抗体细胞株抗SCAP47-B1和抗SCAP47-B2，将细胞种植于BALB／c小鼠腹腔，成功诱导小鼠腹水生成，以50、22kD为主要蛋白，Westernblot试验证实为小鼠IgG，琼脂糖双扩试验显示为小鼠IgG2a亚型；免疫荧光细胞组织化学试验显示，SCAP47蛋白在大肠癌细胞膜表面可表达，正常对照细胞未见表达，大肠癌细胞膜表面表达的SCAP47蛋白可与抗SCAP47-B1细胞株分泌的抗体产生特异性结合反应；纯化的单克隆抗体效价：SCAP47-B1为1：1600，SCAP47-B2则达到1：6400。结论通过杂交瘤单克隆抗体技术制备和纯化的抗SCAP47单克隆抗体，经效价检测和性质鉴定，证明初步达到了免疫试验的要求，为进一步的临床应用提供了可行性依据。
