简介:目的:探讨正常胃上皮细胞和不同分化程度胃癌细胞的细胞内固有荧光特征性生物物质来源。方法:通过激光共聚焦显微镜比较2种不同分化程度的胃癌细胞株和正常胃上皮细胞株在波长500~530nm的固有荧光表现:以罗丹明123(Rodamine123)对细胞内线粒体进行染色,观察细胞固有荧光的位置分布;采用氧化呼吸链阻断剂羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)阻断细胞氧化呼吸反应,测定细胞内固有荧光强度变化。结果:波长500~530nm的细胞固有荧光主要来自于细胞线粒体内,不同分化程度的胃癌细胞株荧光强度都明显弱于正常上皮细胞株。CCCP作用于细胞可提高该波长范围细胞内的荧光强度。结论:细胞在500~530nm波段固有荧光减弱的特征可能有助于诊断胃癌,该固有荧光的生物物质来源可能是参与线粒体内氧化呼吸作用的重要辅酶还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)。
简介:摘要目的应用多模态深度学习模型对糖尿病视网膜病变(DR)超广角荧光素眼底血管造影(UWFA)图像进行病变程度的自动分级。方法回顾性研究。2015年至2020年于武汉大学人民医院眼科中心就诊并接受UWFA检查的DR患者297例399只眼的798张图像作为模型的训练集和测试集。其中,无视网膜病变、非增生型DR (NPDR)、增生型DR (PDR)分别为119、171、109只眼。通过联合优化CycleGAN和卷积神经网络(CNN)分类器一种图像级监督深度学习模型,定位和评估DR患眼UWFA早期和晚期正位图像中的荧光素渗漏区和无灌注区。使用改进后的CycleGAN将带有病变的异常图像转换为去除病变的正常图像,得到含有病变区域的差分图像;使用CNN分类器对差分图像进行分类以获得预测结果。采用五折交叉检验评估模型的分类准确率。对差分图像显示的标志物面积进行量化分析,观察缺血指数和渗漏指数与DR严重程度的相关性。结果生成图像基本去除了所有病变区域,同时保留了正常血管结构;差分图像直观揭示了生物标志物的分布;热力图标示出渗漏区域,定位基本与原图中病变区域一致。五折交叉检验结果显示,模型的平均分类正确率为0.983。进一步对标志物面积量化分析结果显示,缺血指数和渗漏指数与DR严重程度均呈显著正相关(β=6.088、10.850,P<0.001)。结论构建的多模态联合优化模型可以准确对NPDR和PDR进行分类并精确定位潜在的生物标志物。
简介:摘要目的研究功能神经导航下联合荧光素钠在颅内恶性肿瘤手术中的作用。方法回顾性分析内蒙古自治区人民医院神经外科自2016-2019年经手术治疗的颅内恶性肿瘤患者50例,术前影像学检查包括头颅电子计算机X射线断层扫描技术(computed tomographty,CT)、计算机体层摄影血管造影(computer tomographic angiography,CTA) 、核磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)平扫及增强序列及核磁共振血管造影(magnetic resonance angiography,MRA)、磁共振静脉造影(magnetic resonance venogram,MRV)、核磁共振弥散加权成像 (diffusion weighted imaging,DWI)、核磁共振灌注成像(perfusion imaging,PWI)、核磁共振弥散张量成像(diffusion tensor imaging,DTI)、核磁共振波谱分析(magnetic resonance spectroscopy,MRS)序列扫描,并在术前将其与博医来功能神经系统导航工作站进行多模态图像融合制定导航计划,术中功能导航联合小剂量荧光素钠(2 mg/kg)进行手术。术中神经导航确定肿瘤的位置及与主要纤维传导束锥体束及大血管的空间关系,以及术中Pentero900蔡司显微镜黄荧光模式下显示肿瘤与正常脑组织的边界进行肿瘤的切除。结果胶质瘤38例,肺癌脑转移瘤10例,肾透明细胞癌脑转移1例,梭形细胞肿瘤1例。术前神经导航定位肿瘤与锥体束的准确率达95%。术后3 d复查头部MRI,与术前病变比较,判断肿瘤的切除程度,本组病灶全切除38例 (76%),次全切除12例(24%)。患者6个月生存率为85.9%、12个月生存率为53.1%、18个月生存率为24.5%,生存时间为(15.0±3.2)个月。结论多模态功能神经导航联合荧光素钠染色可以实时定位和标记肿瘤,提高肿瘤切除率,改善脑恶性肿瘤患者的预后。
简介:目的:探讨二型糖尿病患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)和血清叶酸(FA)、维生素B12(VitB12)的改变及之间的关系。方法:测定糖尿病组(T2DM,35例),对照组即正常糖耐量组(NGT,40例)血浆Hcy、血清FA、VitB12的水平。Hcy采用酶联免疫法测定,FA、VitB12采用化学发光法测定。结果:DM组中,血浆同型半胱氨酸(Hcy)明显高于NGT组(P〈0.01),水平,NGT组与DM组相比差异有显著性(P〈0.05),相关分析显示Hcy与二型糖尿病(r=0.315。P〈0.005)呈显著正相关关系,二型糖尿病患者血浆Hcv与FA、VitB12水平呈负相关(r=-0.6851,r=0.6331,P〈0.05)结论:血浆同型半胱氨酸(Hcy)的升高于胰岛素抵抗有关,Hcv可能参与了糖尿病患者血管病变的发生,FA及VitB12浓度是影响血浆Hcy水平的重要因素。
简介:目的:构建含MDR1基因启动子的荧光素酶报告基因质粒,并检测其在朊蛋白高表达胃癌细胞系中的活性表达。方法:PCR克隆人MDR1基因启动子片段,通过亚克隆将启动子分别插入到pMD18-T载体和荧光素酶报告基因pGL3-Enhancer载体中,建立含MDR1启动子的荧光素酶报告基因质粒pGL-MDR1,并经测序及酶切确定扩增序列;脂质体基因转染法将pGL-MDR1转染入朊蛋白高表达胃癌细胞系SGC7901-PrP,并测定其荧光素酶活性。结果:PCR克隆出MDR1启动子经DNA测序证实序列正确,pGL-MDR1转染入朊蛋白高表达胃癌细胞系的荧光素酶活性,较转染入pcDNA3.1空载体细胞系相比升高3-5倍。结论:成功构建含MDR1启动子的荧光素酶报告基因质粒;上调朊蛋白表达可激活MDR1的转录活性。
简介:摘要目的观察超广角FFA (UWFA)在糖尿病黄斑水肿(DME)与视网膜缺血相关性研究中的应用。方法回顾性临床研究。2018年1~8月于西安市人民医院(西安市第四医院)眼科经眼底及FFA检查确诊的糖尿病视网膜病变(DR)患者145例220只眼纳入研究。其中,男性85例132只眼;女性60例88只眼。平均年龄(54.87±10.89)岁;非增生型DR171只眼,其中轻度、中度、重度分别为27、32、112只眼;增生型DR 49只眼。伴视网膜缺血灶141只眼。均未接受过视网膜激光光凝、玻璃体腔注射药物及其他眼部手术治疗。采用英国Optomap200Tx成像系统行UWFA检查。根据黄斑中心2个视盘面积范围内视网膜是否受累将患眼分为DME组、非DME组,分别为183、37只眼。根据不同黄斑水肿类型,将DME组再分为局灶渗漏型(FL)组、弥漫渗漏型(DL)组、弥漫囊样渗漏型(DCL)组,分别为94、73、16只眼。比较DME组、非DME组患眼视网膜缺血、视网膜新生血管(RNV)和(或)视盘新生血管(NVD)发生情况的差异;进一步比较不同黄斑水肿类型组患眼间视网膜缺血指数的差异。DME组与非DME组患眼视网膜缺血、RNV和(或)NVD发生情况差异行χ2检验或Fisher确切概率法比较;不同黄斑水肿类型组患眼间视网膜缺血指数比较行单因素方差分析。结果DME组183只眼中,伴视网膜缺血灶132只眼(72.13%,132/183);非DME组37只眼,伴视网膜缺血灶9只眼(24.32%,9/37 )。两组患眼间视网膜缺血发生率比较,差异有统计学意义(χ2=30.56,P<0.05)。FL组、DL组、DCL组患眼中,伴视网膜缺血灶分别为51 (54.26%,51/94)、70 (95.89%,70/73)、11 (68.75%,11/16)只眼;伴NVD和(或)RNV分别为11 (11.70%,11/94)、30 (41.10%,30/73)、4 (25.00%,4/16)只眼;视网膜缺血指数分别为0.051 6±0.096 1、0.219 2±0.216 6、0.124 4± 0.146 0。三组患眼间视网膜缺血灶(χ2=35.53)、NVD和(或)RNV (χ2=18.50)发生率和视网膜缺血指数(F=22.80)比较,差异均有统计学意义(P=0.000 0、<0.050 0、<0.000 1 )。结论UWFA可动态评估DME患眼视网膜缺血情况;视网膜缺血区面积增大及RNV的形成更容易形成DL型黄斑水肿。