简介:目的:研究两株新种放线菌次生代谢产物。方法:采用柱层析方法分离纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定化合物的结构。结果:从白色球孢囊菌分离鉴定了4个环二肽为环(L-脯氨酸-L-天冬酰氨)(1)、环(L-脯氨酸-L-丝氨酸)(2)、环(L-脯氨酸-L-丙氨酸)(3)、环(L-脯氨酸-L-苏氨酸)(4)。从云南韩国生工菌分离鉴定了3个环二肽为环(L-脯氨酸-L-丝氨酸)(2)、环(L-脯氨酸-L-苏氨酸)(4)、cyclo-di-Nδ-acetyl-L-ornithyl(5)。结论:化合物5为新天然产物。首次对化合物1,5的碳氢谱数据进行了归属。所有化合物均首次从该两种放线菌中分离得到。其中化合物1对慢性粒细胞白血病细胞株有一定的细胞毒活性。
简介:摘要目的探讨分泌性中耳炎患者中耳积液糖酵解代谢物变化及其与炎症水平的关系。方法选取2018年2月到2022年2年驻马店市中心医院收治的57例分泌性中耳炎患者和同期57例健康体检者作为研究对象,收集两组研究者的中耳积液,采用代谢组学分析与糖酵解相关的代谢物的变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组中耳积液炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平。培养人中耳上皮细胞系(HMEEC),分为采用1 mmol/L和10 mmol/L乳酸处理24 h,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析炎症因子mRNA和细胞因子水平。采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析组蛋白乳酸化水平。组间数据比较采用t检验。结果分泌性中耳炎中耳积液中糖酵解主要产物乳酸水平[(5.37±0.80) mmol/L]明显高于健康者[(1.41±0.25) mmol/L],差异有统计学意义(t=17.690,P<0.05)。分泌性中耳炎患者中耳积液中TNF-α和IL-1β水平[(70.02±8.73)、(90.65±12.54) ng/ml]明显高于健康者[(26.09±6.76)、(11.69±1.63) ng/ml],差异有统计学意义(t=14.890、23.360,P<0.05)。1 mmol/L乳酸处理的HMEEC细胞TNF-α和IL-1β mRNA水平(1.46±0.14、2.14±0.12)明显高于对照细胞(1.05±0.09、1.20±0.14),差异有统计学意义(t=6.015、7.877,P<0.05)。10 mmol/L乳酸处理的HMEEC细胞TNF-α和IL-1β mRNA水平(2.14±0.12、2.29±0.11)明显高于1 mmol/L乳酸处理的HMEEC细胞TNF-α和IL-1β mRNA水平(1.46±0.14、1.73±0.09),差异有统计学意义(t=17.900、15.250,P<0.05)。1 mmol/L乳酸处理的HMEEC细胞TNF-α和IL-1β蛋白水平[(34.23±3.24)、(24.36±2.72) ng/ml]明显高于对照细胞[(15.33±2.52)、(11.86±2.31) ng/ml],差异有统计学意义(t=11.270、8.587,P<0.05)。10 mmol/L乳酸处理的HMEEC细胞TNF-α和IL-1β蛋白水平[(51.68±3.90)、(44.63±4.07) ng/ml]明显高于1 mmol/L乳酸处理的HMEEC细胞TNF-α和IL-1β蛋白水平[(34.23±3.24)、(24.36±2.72) ng/ml],差异有统计学意义(t=8.434、10.130,P<0.05)。1 mmol/L乳酸处理的HMEEC细胞组蛋白乳酸化水平(1.42±0.13)明显高于对照细胞(0.83±0.09),差异有统计学意义(t=9.246,P<0.05)。10 mmol/L乳酸处理的HMEEC细胞组蛋白乳酸化水平(1.96±0.19)明显高于1 mmol/L乳酸处理的HMEEC细胞(1.42±0.13),差异有统计学意义(t=5.789,P<0.05)。结论分泌性中耳炎患者中耳积液中糖酵解产物乳酸水平显著增加,高乳酸影响了中耳上皮细胞炎症因子的分泌。
简介:目的建立可靠的前处理方法,采用超高效液相色谱-串联质谱法检测纯牛奶中喹乙醇及其代谢物3-甲基-喹嗯啉-2-羧酸(MQCA).方法样品经盐酸水解,乙腈-乙酸乙酯(1∶1,V/V)提取,分析了直接浓缩及分别经PAX、PEP固相萃取小柱净化、富集的结果;以乙腈-0.05%氨水为流动相,经InertsilODS-3色谱柱(2.1mm×100mm,3μm)分离,采用多反应监测正离子模式进行定性及定量分析.结果直接浓缩具有较好的回收率,喹乙醇的方法检出限为0.06μg/kg,方法定量限为0.20μg/kg,在0.20、1.00、5.00μg/kg3个加标水平下回收率分别为69.8%、111%、97.4%;MQCA的方法检出限为0.02μg/kg,方法定量限为0.10μg/kg,在0.10、1.00、3.00μg/kg3个加标水平下回收率分别为75.8%、112%、117%.结论该检测方法适用于纯牛奶中喹乙醇及其代谢物残留的检测.
简介:摘要儿茶酚胺包括多巴胺、去甲肾上腺素和肾上腺素,其主要的代谢物有3-甲氧基酪胺、甲氧基去甲肾上腺素、甲氧基肾上腺素、高香草酸和香草扁桃酸。儿茶酚胺及其代谢物的检测是诊断来源于神经嵴的神经内分泌肿瘤如嗜铬细胞瘤、副神经节瘤及神经母细胞瘤的基石。液相色谱串联质谱法因其高灵敏度、高特异性等优点逐渐广泛用于儿茶酚胺及其代谢物的检测,但不同实验室间液相色谱串联质谱法的检测结果差异大,缺乏可比性。由于儿茶酚胺及其代谢物易氧化降解、存在众多干扰物及在血浆和尿液样品中浓度低,因此准确测定血浆及尿液中儿茶酚胺及其代谢物是当前临床检测领域的一项挑战。
简介:目的对酶联免疫分析试剂盒测定水产品中呋喃唑酮代谢物(AOZ)残留量的方法进行改进。方法采用标准溶液与样品同时衍生化后用酶联免疫分析法检测,并用LC—MS—MS方法对比验证。结果ELISA方法检测限为0.2μg/kg;样品平均加标回收率:在0.5μg/kg添加水平为99.0%,在1.0μg/kg添加水平为88.2%;RSD为9.18%~17.8%。实际样品对照实验显示:AOZ值0.5μg/kg时,ELISA与LC-MS-MS的测试结果完全一致,无假阴性结果;AOZ值〉8.1μg/kg时,两法结果一致;1.0μg/kg〈AOZ值〈8.1μg/kg时,其EUSA与LC-MS-MS的结果相对误差〈30%。结论该方法适合于一次性大批量水产品中AOZ残留量的快速筛选。
简介:目的:建立人血浆中氯沙坦及其代谢物EXP3174同时测定的HPLC—MS方法,并研究健康受试者单剂量口服氯沙坦钾片后氯沙坦及其代谢物EXP3174的药代动力学特征。方法:血浆样品以乙腈沉淀蛋白后,进行HPLC—MS分析,色谱柱为LichrospherC18流动相为甲醇-20mmol·L^-1醋酸铵水溶液(含0.1%的甲酸)(60:40,V/V),氯沙坦及其代谢物EXP3174的检测离子均为m/z207.1,传输区电压为250V。12名男性健康受试者口服100mg氯沙坦钾片后,测定血浆中氯沙坦及其代谢物EXP3174的浓度,计算主要药动学参数。结果:在1—2000ng·mL^-1范围内,氯沙坦及其代谢物EXP3174两者峰面积与内标峰面积的比值和浓度的线性关系均良好,批内、批间RSD均小于10%?受试者口服100mg氯沙坦钾片后,氯沙坦的血药浓度达峰时间为(1.6±1.1)h,达峰浓度为(890.2±476.4)ng·mL^-1,消除半衰期为(2.7±1.6)h;EXP3174的血药浓度达峰时间为(2.9±1.0)h,达峰浓度为(1233±611.6)ng·mL^-1,消除半衰期为(6.4±1.2)h。结论:本试验通过选择相同的碎片离子作为氯沙坦及其代谢物EXP3174的检测离子,提高了灵敏度和准确度;所建立的HPLC—MS分析方法准确、灵敏、方便,可用于氯沙坦及其代谢物的人体药动学研究.
简介:摘要目的探讨孕母妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)对新生儿代谢物的影响。方法采用回顾性队列研究设计,纳入2018年1月至12月在广东省佛山市妇幼保健院孕母诊断GDM并活产分娩的580例单胎新生儿(GDM组),按照孕妇年龄1∶1匹配的非GDM单胎孕妇的新生儿580例作为非GDM组。新生儿生后3~7 d内进行遗传代谢病筛查。比较组间代谢物的差异,分析GDM与新生儿代谢物水平间的关系。采用两独立样本t检验及多重线性回归模型进行统计学分析。结果GDM组和非GDM组间新生儿代谢物中共有7种氨基酸及10种脂肪酸的差异有统计学意义,其中GDM组子代血清中6种氨基酸和8种脂肪酸水平升高,而胡椒酰胺[(140.79±32.60)与(150.26±35.46)μmol/L,t=-4.733,P<0.001]、棕榈酰肉碱[(2.59±0.81)与(2.73±0.82)μmol/L,t=-2.940,P=0.003]及二十四碳酰肉碱[(0.066±0.022)与(0.069±0.022)μmol/L,t=-1.937,P=0.042]水平下降。多重线性回归发现,校正母亲孕次、产次及新生儿出生体重和性别后,GDM与子代新生儿期3种氨基酸呈正相关,分别是半胱氨酸(β=0.012)、同型半胱氨酸(β=0.263)和亮氨酸(β=4.225);与2种氨基酸呈负相关,分别为甘氨酸(β=-6.271)和胡椒酰胺(β=-9.885)。GDM与子代新生儿期8种脂肪酸呈正相关,分别是丙酰肉碱(β=0.214)、丁酰肉碱(β=0.014)、3-羟基丁酰肉碱(β=0.006)、异戊酰肉碱(β=0.009)、3-羟基异戊酰肉碱(β=0.024)、二十六碳酰肉碱(β=0.001)、癸二烯酰肉碱(β=0.045)、十八碳二烯酰肉碱(β=0.128);与2种脂肪酸呈负相关,分别为棕榈酰肉碱(β=-0.119)和二十四碳酰肉碱(β=-0.002),差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论GDM与多种新生儿氨基酸和脂肪酸代谢物水平存在相关关系,提示GDM可能影响子代生命早期的氨基酸和脂肪酸的代谢水平。
简介:于氟氰菊酯分子的酸部分连接4-氨基丁酸间隔臂(HCA1)、醇部分连接丁二酸酐间隔臂(HCB2),分别合成了两种不同的半抗原,通过碳二亚胺法将HCA1和HCB2分别与牛血清蛋白(BSA)偶联制备了人工抗原HCA1-BSA和HCB2-BSA,通过混合酸酐法将HCA1、HCAS[3-(2-氯-3,3,3-三氟丙烯基)-2,2-二甲基环丙烷羧酸]和HCB2分别与卵清蛋白(OVA)偶联制备包被抗原,两种人工抗原通过免疫新西兰大白兔制备相应的多克隆抗体。结果表明,用HCA1-BSA获得的多克隆抗体对氯氟氰菊酯和氯氟氰菊酸有免疫反应性(IC50值分别为33.12和0.95mg/L),用HCB2-BSA获得的多克隆抗体对氯氟氰菊酯几乎没有免疫反应性。
简介:目的建立尿液中15种常见安眠镇静药物及代谢物的液相色谱-串联质谱分析方法。方法尿液经酶水解、固相萃取后,用C18液相柱分离,以含甲酸铵和甲酸的水、乙腈为流动相梯度洗脱,质谱采用电喷雾电离(ESI)-正负离子模式同时扫描,采用二级质谱多反应监测(MRM)模式检测目标化合物。结果以化合物的保留时间、两对母离子/子离子对定性,尿中常见安眠镇静药物的检测限为0.01~0.5ng/mL(ESI+)和10ng/mL(ESI-);相关系数r在0.994以上;日内及日间精密度均在18%以下;绝对回收率在64.80%~116.20%之间。结论方法快速、灵敏、简便、可靠,能同时分析尿液中的15种安眠镇静药物及其代谢物。
简介:摘要: 同时检测 DNA 代谢物,黄嘌呤( XA ),次黄嘌呤( HX )和尿酸( UA )对于早期诊断和预防由代谢紊乱引起的相关疾病非常重要。在这项研究中,基于有机 框 架材料与具有羟基的金属( OH-MIL-101 ( Fe ),称为 OH-MOF )和电化学还原氧化石墨烯( ERGO )纳米功能的协同催化作用,设计并构建了 OH-MOF-ERGO 。该界面通过电化学方法同时检测血清中的尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤。通过超声混合法制备了纳米复合功能材料,并通过 XRD , FT-IR 和 UV-vis 方法对其进行了表征,通过滴涂和电化学还原法在玻璃碳电极( GCE )的表面上构建 OH-MOF s -ERGO/GCE 。该修饰电极用于检测 UA , XA 和 HX 的线性范围为 0.20 微摩尔 / 升〜 1150 微摩尔 / 升 , 0.15 〜 800 微摩尔 / 升 和 0.40 〜 600 微摩尔 / 升 ,检出限分别为 0.12 、 0 分别为 10 微摩尔 / 升和 0.20 微摩尔 / 升 ( S/N=3 ),真实血清样品中富集的回收率在 96.1 % 到 106.6 %之间。 这种 方法为研究与嘌呤代谢相关的生理学和病理学提供了 一个简单而又快捷 的检测方法。
简介:摘要目的探讨结直肠癌患者手术前后尿液中卟啉代谢物变化及其与预后的关系。方法收集2016年6—12月河北北方学院附属第一医院100例结直肠癌患者,于术前、术后1周、术后1年及复发前留取尿液。用高效液相色谱法检测尿液中卟啉代谢产物尿卟啉原(UP)Ⅰ和粪卟啉原(CP)Ⅲ的含量,分析结直肠癌患者手术前后尿液中UPⅠ和CPⅢ的水平变化及与其临床病理特征的关系,分析其含量变化与术后复发、转移的关系。结果结直肠癌患者术后尿液中UPⅠ和CPⅢ水平显著低于术前[(66.80 ± 17.62)μmol/g比(35.58 ± 9.32)μmol/g、(20.14 ± 3.14)μmol/g比(10.38 ± 0.85)μmol/g],差异有统计学意义(t=26.788、25.712,P<0.05)。Dukes分期C/D期患者UPⅠ和CPⅢ水平均明显高于A/B期[(45.26 ± 5.26)μmol/g比(28.56 ± 3.45)μmol/g、(86.57 ± 6.58)μmol/g比(52.48 ± 3.36)μmol/g],有淋巴结转移患者UPⅠ和CPⅢ水平均明显高于无淋巴结转移患者[(45.44 ± 5.46)μmol/g比(30.27 ± 6.07)μmol/g、(86.67 ± 6.87)μmol/g比(56.10 ± 11.08)μmol/g],差异均有统计学意义(P<0.05)。尿液中UPⅠ和CPⅢ水平是结直肠癌患者术后复发、转移的独立危险因素(OR=1.149、1.065,P<0.05)。结论尿液卟啉代谢物(UPⅠ和CPⅢ)可能是一种有效评估结直肠癌患者的新型肿瘤标志物。
简介:应用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)建立了一种简便、快速、灵敏度高的定量检测尿液中甲基苯丙胺、苯丙胺、吗啡、O6-单乙酰吗啡、氯胺酮、去甲氯胺酮等常见毒品及其代谢物方法,尿液经蛋白沉淀、过滤后,采用BEHHIUJC(2.1*100mm,1.7μm)色谱柱进行分离,电喷雾正离子(ESI+)模式电离,多反应监测(MRM)模式进行检测,6种毒品及代谢物在5-500ng/mL浓度范围内均获得良好的线性(R2=0.998),回收率为91.04%-115.81%,定量检出限为0.1-1ng/mL.此外建立了同时检测尿液中40种常见药物的定性检测方法,定性检出限为1-10ng/mL.