简介：摘要目的构建细胞凋亡受体通路相关蛋白FasL表达的RNA干扰(RNAi)质粒,为研究FasL参与的细胞信号通路提供稳定转染细胞的RNA干扰质粒。方法选取FasL基因的19nt特异性序列,设计针对FasL的shRNA序列,应用基因重组技术克隆到pSilencer1.0-U6表达载体中,EcoRI和ApaI进行双酶切和DNA测序鉴定重组克隆,在脂质体的介导下包含FasL基因RNAi的重组载体转染脐静脉血管内皮细胞,转染48h后,收集细胞裂解液，Westernblotting分析对照组与转染组FasL蛋白的表达水平。结果双酶切证实shRNA正确插入pSilencer1.0-U6质粒,DNA测序证实插入的序列正确;FasL基因RNAi的载体转染血管内皮细胞成功;Westernblotting结果显示与空质粒对照组比转染组细胞FasL表达下调。结论成功构建人FasL基因RNA质粒,为研究FasL参与的细胞信号通路提供了稳定的转染细胞载体。

简介：为了丰富栽培小麦转化受体基因型,优化农杆菌转化小麦幼胚的技术体系,本研究评价了21份四川优良小麦品种(系)的幼胚再生能力,并以筛选到的最佳受体为材料,利用正交设计研究了预培养时间、菌液浓度、侵染时间、抑菌剂浓度、共培养方式和农杆菌菌株等易互作的6个因素对幼胚抗性愈伤再生率的影响,并探讨了筛选剂卡那霉素(Kanamycin)的适宜浓度。结果表明,21份材料中‘5157’、‘川农16’、‘R364’、‘川麦42’‘、内麦8号’的绿苗率超过了30%,可作为优良转基因受体加以利用。以‘5157’为受体材料建立农杆菌转化体系,正交试验表明菌液浓度和农杆菌菌株对幼胚抗性愈伤再生率的影响达到显著水平,而其他因素影响不显著。经优化后的遗传转化体系为:农杆菌菌株用C58C1,幼胚不经预培养,在菌液OD值为0.4的农杆菌中侵染40min,共培养介质选用培养基,抑菌剂为200mg/L羧卞青霉素(Carbenicillin),适宜的卡那霉素筛选浓度为50mg/L。本研究为四川小麦遗传转化提供了5个候选基因型,为建立和优化小麦幼胚转化技术体系提供了理论依据,同时初步建立了农杆菌转化小麦幼胚的技术体系。

简介：大豆遗传转化一直是植物基因工程领域的难点之一,受体品种对农杆菌的敏感程度以及不同农杆菌菌株对靶组织的侵染能力是影响转化效率的主要因素。本研究利用GUS组织瞬时表达技术,比较了4个农杆菌菌株对靶组织子叶节的侵染能力差异,同时利用筛选到的侵染能力最强的菌株评估了33个不同受体基因型对农杆菌的敏感性。结果表明,超毒农杆菌菌株Ag10对靶组织的侵染能力最强,优于其他3个菌株;地方与野生大豆种质在农杆菌侵染后GUS的平均瞬时表达效率显著高于选育品种。此外,通过鉴定筛选出6个对农杆菌敏感性较高的受体材料,其对农杆菌的敏感性优于前人报道的敏感材料Peking,为大豆高效遗传转化体系的建立和新型转化受体的开发提供了参考。

简介：MicrostructuralevolutionofinfraredvacuumbrazedCP-TiusingtwoTi-basedbrazealloys,Ti-15Cu-15NiandTi-15Cu-25Ni,hasbeeninvestigated.TheinfraredbrazedjointconsistedofeutecticTi2Cu/Ti2NiintermetalliccompoundsandTi-richmatrix.TheeutecticTi2Cu/Ti2Niintermetalliccompoundsdisappearedfromthejointafterbeingannealedat900Cfor1h.Incontrast,thedepletionrateofbothCuandNifromthebrazealloyintoCP-Tisubstrateat750Cannealingwasgreatlydecreasedascomparedwiththatannealedat900C.BlockyTi2Cu/Ti2Niphaseswereobservedevenifthespecimenwasannealedat750Cfor15h.BecausetheNicontentoftheTi-15Cu-25NibrazealloyismuchhigherthanthatoftheTi-15Cu-15Nialloy,theamountofeutecticTi2Cu/Ti2NiphasesinTi-15Cu-25NibrazedjointismorethanthatinTi-15Ci-15Nibrazedjoint.However,similarmicrostructuralevolutioncanbeobtainedfromtheinfraredbrazedjointannealedatvarioustemperaturesand/ortimeforbothfillermetals.

简介：一“哥哥。”小奕在门口叫了一声,哥哥就欢欢地朝他奔过来。晚饭后,小奕带哥哥去楼下散步。这是小奕一天中最快活的时刻,他们可以在下面玩半小时,然后小奕就要上来画画了。他们来到电梯口,小奕揿了向下的键,电梯上方显示楼层的绿色数字就一跳一跳。从1一下一下地跳上来,哥哥仰着头等待着,快到23了,哥哥激动起来,做好往里冲的准备。小奕家住在23楼。

简介：随着氟喹诺酮类抗生素在临床上日益广泛的应用,细菌的耐药性问题日趋突出,迫切需要对其耐药机理及防治进行研究。国内外迄今为止对氟喹诺酮类抗生素耐药性研究认为,细菌对这类抗生素的耐药性为染色体介导,尚未发现氟喹诺酮耐药质粒。我们首次从一株临床分离的大肠杆菌(E.coli)多种耐药株中克隆到氟喹喏酮耐药质粒,并对质粒的结构及耐药性进行了进一步的分析。通过对临床分离的多重耐药菌E.coliHx88108的

简介：作为雅典卫城供奉希腊雅典娜女神的主神庙,虽首次登上我国方寸,但却因其译名中有一字不同而出现了三个不相同的称谓:邮票和邮报刊上多谓之“帕提农”,英汉大词典和简明不列颠百科全书中则称之“帕台农”,而电视台播音员有时念作“帕特农”。可见,译名的规范化问题仍然没有很好解决。“Parthenon”是它的英文名,

简介：2005年底，WTO第六次部长会议在香港举行，相信大家都透过传媒目睹了来自世界各地的农民“反对经济全球化、声讨富国欺压穷国”示威的场面。其中韩国农民抗议队伍的声势最大、行为最激烈、方式也颇另类，吸引了最多的眼球，从而让世人充分领略了韩民族强悍、坚韧的示威文化。

简介：目的：构建天然免疫胞内识别受体核苷酸寡聚域1（NOD1）真核表达质粒。方法：NOD1基因片段经PCR扩增获得，经酶切后连接到真核表达载体pcDNA3／flag中，对挑选出的阳性克隆测序，将序列正确的重组质粒pnag—NOD1转染293T细胞，用Western印迹检测目的蛋白的表达，同时用NF-κB的萤光素酶报告基因检测NOD1蛋白的活性。结果：pflag-NOD1可以在真核细胞293T中表达，并可以增强NF-κB报告基因的转录活性。结论：构建了重组质粒pnag—NOD1，在细胞中表达NOD1后能够提高NF—κB转录的生物活性，为进一步研究NOD1的功能奠定了基础。

简介：目的筛选出对人CathepsinK（CTSK）基因抑制效率最高的1对siRNA，并通过质粒载体表达该siRNA，为进一步抑制去分化人软骨细胞中CTSK的表达奠定基础。方法针对CathepsinK基因设计4个靶位点，并根据靶位点合成4对siRNA．并转染人软骨细胞。通过Real-timePCR检测4对siRNA中抑制效率最高的1对，与线性化的PGCsilencer-H1／Neo／GFP连接、转化、扩增与纯化质粒。结果4对siRNA转染软骨细胞后72h，通过对照FITC-siRNA的绿色荧光观察．siRNA的转染效率达到70％～80％。Real-timePCR检测每对siRNA的CTSK量与对照组比的百分率得到其抑制效率，分别为：第1对的比值大于对照组（无抑制作用），第2对47．5％，第3对53．1％，第4对67．3％（抑制效率最大）。成功构建出pGCsilencer^TMH1／Neo／GFP／CTSKRNAi载体，经测序证实了克隆的RNAi打靶序列100％正确。结论成功构建了CTSK基因的siRNAs表达质粒，为进一步研究抑制该基因表达对延缓软骨细胞的去分化过程并促进其成软骨能力奠定了基础。

简介：目的构建人Seipin基因的真核表达质粒并转染293T细胞后进行鉴定。方法采用PCR法从人睾丸组织中扩增人Seipin基因,通过BamHI/XhoI限制性酶切位点克隆入真核表达载体pEGFP-C1内,构建含人Seipin基因的真核表达质粒pEGFP-Seipin。运用真核转染、Westernblot和免疫荧光实验的方法,鉴定Seipin在真核细胞293T中的表达。结果克隆的人Seipin基因,测序结果显示完全正确。瞬时转染真核细胞293T后,采用Westernblot在预期的位置检测出目的条带,免疫荧光实验显示293T细胞中存在人Seipin基因的表达。结论成功构建了含人Seipin基因的真核表达质粒。

简介：目的构建CathepsinK(CTSK)基因慢病毒表达质粒,为进一步研究CathepsinK在人软骨细胞体外老化过程中的作用奠定基础。方法采用RT-PCR技术扩增CathepsinK基因的蛋白翻译区,通过连接、转化等分子生物学技术,将该基因克隆至慢病毒pLenti6-V5载体上,经BamHI、XhoI双酶切电泳筛选、鉴定并测序。结果从软骨细胞中成功地克隆出990bp的CathepsinK基因,并经酶切分析得到6．964Kb和1．005Kb大小的两片断,测序结果显示接头两端序列正确。结论通过基因克隆方法成功构建了CathepsinK基因表达质粒,可用于进一步的病毒包装,为深入研究该基因对软骨细胞老化的影响奠定了基础。

简介：摘要：应用煮沸法、微波炉提取法、异丙醇沉淀提取法、改良碱裂解法、氯化锂法等五种质粒DNA提取方法，提取农杆菌pBI121质粒DNA。结果表明，这些方法相对于经典的碱裂解法都有一定的优点，其中的煮沸法、改良碱裂解法、氯化锂法，实验操作时间短，不使用有毒的酚和氯仿，提取的质粒DNA质量也较好，可以满足分子生物学的常规实验要求，适合在中学实验教学中应用。

简介：

简介：日前，德州仪器（TI）推出非隔离式插入电源模块系列，该系列采用最新技术，不仅可实现超高的瞬态响应速率，而且还能显著降低客户对输出电容器的需求。该款模块采用精确的1．5％输出稳压，能够以更小尺寸为各种应用设计人员实现更高的性能。

简介：目的通过11例中毒者分析研究铊中毒的症状,达到了解和认识铊中毒的目的.方法收集11例铊中毒的相关资料,分析铊中毒的特征.结果铊中毒的共同特征是出现症状的时候都有四肢疼痛或麻木,同时伴有严重脱发.结论铊中毒依个体的年龄、性别、状态及中毒量不同,其发病前具有一定潜伏期.但性别、年龄与死亡的时间关系目前尚不清.

简介：

简介：Inthepresentwork,anovelhybridcompositecomposedofTi-aluminidemulti-layeredpartandcontin-uous-SiCf-reinforcedTi-matrixpartusingavacuumhotpressing/hotisostaticpressure（VHP/HIP）sinteringprocesswassynthesized.Then,thedamagetolerancebehaviorofthishybridcompositewasstudiedbytensiletestsandinsituscanningelectronmicroscopy（SEM）three-pointbendingtests.Theresultsindicatethatthemechanicalpropertiesandcrackpropagationofthehybridcompositearestronglyinfluencedbytheextrinsictoughnessmecha-nism.Indetail,thecrackdeflectionofmulti-layeredcompositeandstrengtheningeffectofSiCf-reinforcedmatrixcompositeareobservedinthehybridcomposite.Owingtothestrengtheningeffectofcontinuous-SiCrre-inforcedTi-matrixpart,thetensilestrengthofhybridcompositeismuchhigherthanthatofneatTi-aluminidemulti-layeredcomposite.Furthermore,itisfoundthattheoptimaldamagetoleranceabilityisoptimizedwhenthenotchpositionislocatedattheTi-aluminidemulti-layeredpartduetothecrackdeflectionofmulti-layeredstructure.

简介：以便获得两高电镀物品迁居(他们)在高周波的表面的可靠性和罚款维的控制声学的波浪(锯)设备，4-layeredTi/Al-Mo/Ti/Al-Mo电极电影在128°Y-XLiNbO3上被调查由劈啪作响的底层免职。结果显示4-layered电影与常规Al-0.5wt.%Cu电影相比有改进他们可靠性。他们的一生比在5×的当前的密度测试的Al-0.5wt.%Cu电影的长约三倍107A/厘米2和200°C的温度。而且，4-layered电影容易在反应离子蚀刻被蚀刻，罚款维的控制为高周波的锯设备在模式复制期间被认识到。为4-layered电影，最佳瞬间数量和劈啪作响的参数为高他们可靠性是很重要的。

简介：摘要：采用Ti-36.5Zr-10Ni-15Cu-0.5Co-0.5Nb钎料对Ti2AlNb合金和Ti60合金进行真空钎焊，获得了良好的接头。研究了钎焊温度和保温时间对Ti2AlNb/Ti-36.5Zr-10Ni-15Cu-0.5Co-0.5Nb/Ti60钎焊接头的组织演变和力学性能的影响。接头区域内存在连续的金属间化合物，这类相在某种程度上促进了界面的冶金结合，但对接头整体的机械性能带来了不利的影响。随着钎焊温度和保温时间的提高，加速了液态钎料向基体的扩散，导致(Ti, Zr)2(Cu, Ni)脆性金属间化合物减少。在900℃下钎焊15min后，接头的抗拉强度达到最大值300.75Mpa，接头的断裂位置为(Ti, Zr)2(Cu, Ni)脆性相。通过调控钎焊温度和保温时间可以在一定程度上改善接头的微观组织结构，改善接头的机械性能。