简介:摘要目的利用多重实时PCR技术,通过优化反应体系和反应条件,探索一种可同时且快速准确检测五类致谢性大肠埃希菌、志贺菌的方法。方法选择78株大肠埃希菌、志贺菌为研究对象,筛选各菌种特有的一些毒性基因,包括aggR、eaeA、ipaH、lt、stlb、stx1及stx2,以这些毒性基因作为PCR扩增反应的检测目标,通过NCBI网站获取各基因的核苷酸序列,利用引物设计软件primer5.0进行引物序列的设计,而后进行PCR扩增反应,对反应产物进行验证从而证实引物的特异性,同时通过反应体系中各底物浓度的配比进行调节和对反应条件进行优化调整,确定最佳PCR扩增体系和条件,最终成功建立一种能同时鉴定五类致泄性大肠埃希菌和志贺菌的多重PCR方法。结果本研究结果发现,针对各菌种的毒性基因所设计引物经PCR扩增反应的验证,被证实均特异性地扩增出相应的目标基因产物,且在本研究中对78株大肠埃希菌及志贺菌的多重PCR检测结果与单重PCR检测结果吻合。结论本研究利用多重PCR技术,成功建立了一种能同时且特异性地检测致泄性大肠埃希菌及志贺菌特异性的检测方法,我们期望这种检测方法可应用在临床疾病诊断及在食品检验等方面发挥具有重要作用。
简介:目的观察补阳还五汤联合厄贝沙坦片治疗气虚血瘀型原发性高血压伴微量白蛋白尿患者的临床疗效。方法将83例气虚血瘀型原发性高血压伴微量白蛋白尿患者分为治疗组42例、对照组41例,对照组口服厄贝沙坦片,0.15g/次,1次/d,治疗组在西药治疗基础上,加用补阳还五汤口服治疗。比较2组中医证候疗效,症状积分变化,血压变化,尿白蛋白排泄率(UAER)、尿微量白蛋白(UMALB)及血肌酐(Scr)情况。结果治疗组42例中,显效17例(40.47%),有效19例(45.24%),无效6例(14.29%),总有效率为85.71%;对照组41例中,显效12例(29.27%),有效15例(36.58%),无效14例(34.15%),总有效率为65.85%。经Ridit分析,U=-1.983,P=0.023,P〈0.05,说明治疗组临床疗效优于对照组。2组治疗后眩晕、头痛、心悸、失眠、耳鸣、健忘、气短方面评分较本组治疗前均降低(P〈0.05)。治疗组各症状评分较对照组降低明显,治疗前后评分差值与对照组比较差异均有统计学意义(P〈0.05),说明治疗组优于对照组。2组收缩压(SBP)和舒张压(DBP)治疗后较本组治疗前均降低(P〈0.05),2组SBP和DBP治疗前后差值比较差异无统计学意义(P〉0.05)。2组UAER,UMALB治疗后较本组治疗前均降低(P〈0.05),治疗组较对照组降低明显,治疗前后差值与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05),说明治疗组优于对照组。2组Scr治疗前后比较差异无统计学意义(P〉0.05),2组治疗前后差值比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论补阳还五汤联合厄贝沙坦片治疗气虚血瘀型原发性高血压伴微量白蛋白尿患者具有较好的疗效。
简介:目的:比较补阳还五汤含药血清和含药血浆对缺氧培养的大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)分泌NO、vWF、6-ketoPGF1α的水平与体内实验真实值的接近程度,为半体内实验选择含药血浆还是含药血清提供参考依据。方法:以氧剥夺BMECs模型为研究对象,观察补阳还五汤含药血浆和含药血清对BMECs条件培养液中一氧化氮(NO)、血管性假血友病因子(vWF)、6-酮-前列腺素1α(6-keto-PGF1α)含量的影响,并与补阳还五汤干预的中动脉阻塞模型大鼠血浆上述指标水平进行比较。结果:结果发现:与空白血浆组合空白血清组比较,补阳还五汤含药血浆和含药血清均能明显降低氧剥夺BMECs条件培养液中vWF的含量,升高NO、6-keto-PGF1α水平,差异均有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01);含药血浆组vWF、6-keto-PGF1α水平与体内实验的相关系数r分别为0.928和0.933,明显高于含药血清组(r=0.715、0.770,P〈0.05),而含药血浆组和含药血清组NO含量与体内实验相关系数分别为0.702、0.759,两者差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:运用半体内实验研究补阳还五汤对脑血管内皮细胞的作用,血浆药理学方法比血清药理学方法可靠。