简介:摘要目的构建并拯救增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)标记的EGFP-EV-A71重组病毒。方法利用重叠PCR技术,以pMD19T-SDLY107全长质粒为模板,将2A蛋白酶识别序列加入到结构蛋白VP4的5′端;以pEGFP-N1质粒作为模板,扩增获得EGFP目的片段,将其插入到上述重组质粒中,得到重组质粒pMD19T-107-EGFP。经酶切和体外转录后,转染横纹肌细胞肉瘤(RD),拯救获得重组病毒EGFP-EV-A71。采用Karber法计算细胞培养半数感染量(CCID50)以测定病毒滴度。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同时间点的病毒复制水平,并绘制病毒复制曲线,比较重组病毒与母本病毒的复制力有无差异。乳酸脱氢酶(LDH)和细胞增殖(CCK-8)实验分别测定被感染细胞的细胞损伤率和存活率。结果包含EGFP的重组EV-A71感染性cDNA克隆被成功构建;转染RD细胞后,出现典型的细胞病变并且表达出较强的绿色荧光;重组病毒与母本病毒具有相似的复制动力学特征和致细胞病变效应。结论成功拯救了EGFP标记的重组病毒EGFP-EV-A71。
简介:目的观察HBsAg阳性患者血清标记物与HBVDNA水平间的关系.方法用时间分辩免疫荧光分析法测定HBV感染者的血清标记物,荧光定量PCR法测定HBVDNA含量.结果204例HBV感染者中,血清标记物出现三种组合,组合Ⅰ为HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)104例,血清HBVDNA阳性率为86.5%;组合Ⅱ为HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)80例,血清HBVDNA阳性率为32.5%;组合Ⅲ为HBsAg(+)、抗-HBc(+)20例,血清HBVDNA含量均低于检测低限(<1×103拷贝/毫升).结论HBV感染者血清HBVDNA水平更能反映病毒复制的程度,应努力开展此项检测.
简介:目的探讨孕妇孕中期二联血清标记物用于产前筛查时,对唐氏综合征、18-三体、神经管畸形等出生缺陷疾病检出的实际应用意义。方法应用时间分辨荧光免疫分析技术对孕中期(15~20+6周)35岁以下妇女进行二联血清标记物(AFP、free-βHCG)检测,2T-risk软件计算风险值。对于高危孕妇进行产前诊断。结果共筛查109703例孕妇,其中唐氏综合征高危孕妇4725人,阳性率为4.31%(4725/109703),18-三体高危588人,阳性率0.54%(588/109703),神经管畸形高危861人,阳性率0.78%(861/109703)。接受羊膜腔穿刺术的高危孕妇1952人,发现染色体异常59人,异常检出率为3.02%(59/1952)。结论利用孕妇二项血清标记物进行孕中期产前筛查可有效检出唐氏综合征等染色体异常疾病及其它部分先天性疾病,是预防和降低出生缺陷的有效手段。
简介:摘要目的探讨CEA、CA125和NSE三种肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的意义。方法采用化学发光免疫分析法分别测定52例肺癌、39例肺良性疾病患者胸水中CEA、CA125和NSE水平。结果肺癌患者胸水中CEA为60.6±23.5ng/mL,CA125为243.4±120.5U/mL,NSE为33.4±24.5ng/mL,显著高于肺良性疾病组的胸水中的水平(P<0.01)。胸水中三项标志物对肺癌的敏感性分别为67.2%、70.7%、55.2%,胸水中三项联检对肺癌的敏感性达87.1%。结论联合检测CEA、CA125和NSE三项标志物可提高肺癌诊断的敏感性,对诊断和鉴别诊断良、恶性胸水有重要临床价值。
简介:摘要目的探讨血清S100B、NSE在COPD中临床意义。方法收集97例就诊我院COPD患者,对所入选者均进行血清S100B、NSE、血气分析、电解质、血渗透压等检测。检测血清S100B、NSE采用酶联免疫法。并对观察值进行统计学处理。结果肺性脑病组血清S100B、NSE含量较非肺性脑病组明显增高,具有显著性差异(P<0.01);观察9例低渗血症合并肺性脑病组血清S100B、NSE值,并与单纯肺性脑病组和低渗血症组比较,混合组血清S100B、NSE值明显高于另外二组,有显著性差异。结论血清S100B、NSE的测定有助于肺性脑病的诊断及损害情况的判断。
简介:文章通过讨论分析“来”从趋向动词到焦点标记词的语法化历程,确认其内因是动词结构“VP1+(NP1)+来+VP2+(NP2)”提供的句法格式以及“来”在该结构中表空间位移义的语义消退;在与“是”语法化为焦点标记的过程比较后,认为句子焦点的位置和焦点结构的变化是促成焦点标记产生的一个重要因素。
简介:摘要对弥漫性大B淋巴瘤的治疗传统上受到临床参数的指导。虽然国际预后指数(IPI)代表了最大程度上公认的预后模型,但是具有相同IPI亚组的结果仍然有着显著的差异,反映了这种恶性肿瘤的异质性。DLBCL分子层面的分类可能会导致具有相似的生物学特性、临床行为及结果的特殊疾病本质的分类。一旦经验定有效,新一代的预后模型将成为日常医学实践整体不可分割的一部分,对现有的临床预测模型提供有效的辅助信息。
简介:摘要原发性肝癌(HCC)是我国最为常见的恶性肿瘤之一,该病手术后复发率和转移率都很高,治疗效果不是很理想。据统计,我国每年肝癌死亡率占我国恶性肿瘤死亡率的第2位。血清甲胎蛋白(AFP)是目前应用最广泛的原发性肝癌血清标记物,美中不足的是血清甲胎蛋白的敏感性和特异性不高。随着科技的发展,近年来肝癌相关肿瘤标记物研究有很大的进展,现就一些具体情况综述如下。