简介：目的构荧光蛋白和canstatin融合蛋白基因的真核表达载体pEGFP-N1／canstatin，以深化研究血管生成抑制剂canstatin的生物学性能和用于肿瘤生物治疗的可能性。方法提取人胚肝总RNA，RT—PCR扩增canstatin基因片断，T—A克隆到pGEM—T中，从pGEM—T／canstatin克隆载体中，将人canstatincDNA亚克隆入真核表达载体pEGFP-N1，构建含人canstatincDNA的重组质粒pEGFP-N1／canstatin，通过酶切鉴定出重组体并测序分析。结果成功构建pEGFP—N1／canstatin真核表达载体，双酶切及测序鉴定显示canstatin基因片断正确插入载体，与Genebank中报道的序列一致。结论pEGFP—N1／canstatin真核载体的构建为进一步进行canstatin蛋白表达和活性研究以及canstatin用于基因治疗奠定了基础。

简介：目的建立脐血来源树突状细胞（dendriticcells，DC）的体外培养方法，为进一步研究DC的功能、特性及临床应用提供了技术方法。方法取正常人脐血，分离获得单个核细胞，利用贴壁法去除悬浮细胞后，加入1000U／mLrhGM-CSF、500U／mLrhlL-4，至d7再加入500U／mLTNF-α进行培养，收集培养至d10的DC，分别从形态学、免疫表型和功能上加以鉴定。结果体外培养的d10，大量细胞出现典型的树突状形态；经流式细胞仪检测，高表达HLA-DR、CD80、CD83、CD1a、CD11c；混合淋巴细胞反应显示其在体外能有效刺激同种淋巴细胞增殖。结论在合适的细胞因子组合下，能够在体外利用脐血成功诱导出成熟DC。

简介：

简介：目的：鉴定LRP16与ART-27的相互作用,推测LRP16基因在肿瘤发生、发展中涉及到的信号途径。方法：酵母双杂交系统筛选出ART-27可与LRP16相互作用,采用酵母双杂交回复验证、免疫共沉淀及GSTpull-down等体内、体外方法对二者之间的相互作用进行验证。结果：LRP16与ART-27在体内、体外均可形成复合物。结论：ART-27是LRP16的特异性结合蛋白,二者的相互作用为进一步研究LRP16在胚胎发育及肿瘤发生、发展中的功能及信号传导途径奠定了基础。

简介：目的：构建并制备能够有效表达EB病毒BHRF1基因的重组慢病毒载体,观察BHRF1表达对人胚肺成纤维细胞（KMB17）凋亡的影响。方法：采用RT-PCR法,从B95-8细胞扩增EBVBHRF1基因,克隆至pWPIGW慢病毒载体上,与pVSVG及pSPAX质粒共转染人胚肾293T细胞,包装出重组慢病毒。将纯化后的重组慢病毒直接感染293T和KMB17细胞,荧光显微镜、实时定量RT-PCR、免疫印迹等方法检测BHRF1在细胞中的表达水平。流式细胞仪检测BHRF1表达对凋亡诱导剂或无血清培养诱发KMB17细胞凋亡的影响。结果：重组慢病毒介导BHRF1在293T和KMB17细胞内获得表达,能有效地抑制KMB17细胞的凋亡。结论：成功构建了表达BHRF1基因的重组慢病毒载体。

简介：“神农尝百草”是一个流传至今的美丽传说，也是最早最原始的临床试验。古往今来，医者以“济世救人”为宗旨，留下了无数闪耀着人文主义光辉的范例，如战国时期的扁鹊、东汉时期的华佗、明代的李时珍……他们所留下的不慕荣华富贵，终生以医济世的杏林佳话流芳百世。但医学发展到今天，正如人大常委会副委员长、中国科学院院士韩启德在《关于医学技术发展的价值思考》主题报告中所指出的，“技术至上”盛行正在导致医学离人渐行渐远。

简介：目的：对MTT法肿瘤药物敏感试验的方法进行选择,旨在建立一种MTT肿瘤药敏试验的规范化操作流程。方法：MTT法测定K562细胞对抗癌药卡铂与紫杉醇的敏感性实验及其影响因素。结果：在每孔K562细胞数为5×10^3（浓度为5×10^4个/ml）、药物作用时间48h、MTT20μl作用6h、单波长570nm处测OD值时,药物对肿瘤细胞的抑制率较高,实验效果较好。结论：规范化的MTT肿瘤药敏试验可以为临床医师开展和实现化疗个体化提供较为可靠的实验依据。

简介：目的研究胃癌组织体外对化疗药物的敏感性,以筛选出敏感性较强的化疗药物。方法收集33例新鲜人胃癌标本,采用ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术（ATP-TCA）,分别检测其对11种临床常用化疗药物的敏感性。结果33份胃癌标本中,31份标本成功进行ATP-TCA检测,可评估率为93.9%。胃癌组织体外对化疗药物敏感性存在明显差异,敏感性自高到低依次为紫杉醇（PTX）、多西紫杉醇（DOC）、氟脲嘧啶（5-Fu）、顺铂（DDP）、丝裂霉素（MMC）、奥沙利铂（L-OHP）、阿霉素（ADM）、表阿霉素（EPI）、长春地辛（VDS）、长春新碱（VCR）和足叶乙甙（Vp-16）等。结论胃癌组织对化疗药物的敏感程度相对较低,且存在明显个体异质性。ATP-TCA可为胃癌选择合适的化疗药物,为临床合理用药提供参考。

简介：目的危重症患者早期常规营养支持的最佳方案仍不明确，设想肠外营养要优于肠内营养。方法对英国33个重症监护室新人院的成年患者进行随机对照研究。把患者随机分为肠外营养组或肠内营养组，营养支持在入院后36小时内开始，持续不超过5天n主要结局指标是30天的死亡率n结果共纳入患者2400例进入研究，2388例（99．5％）纳入最终的统计分析，其中1191例采用肠外营养，1197例采用肠内营养。营养支持第30天时，肠外营养组的累计死亡率是33．1％（393／1188），肠内营养组的累计死亡率是34．2％（409／1195），肠外营养相对于肠内营养的相对危险度是0．97（95％CI：0．86．1．08，P=O．57）n在减少低血糖发生率（3．7％VS．6．2％，P=O．006）和降低呕吐发生率（8．4％VS．16．2％，P〈O．001）方面，肠外营养显著优于肠内营养。在治疗相关性感染性并发症（O．22VS．O．21，P=O．72）、90天累计死亡率（37．3％VS．39．1％，P=O．40）方面，以及其他14项次要结局指标的发生率和不良反应发生率方面，肠外营养与肠内营养相比无显著差异。热量摄入方面两组无显著差异，大多数患者均未达到要求的能量摄入量。结论危重症患者早期肠外或肠内营养支持第30天累计死亡率没有统计学差异，但是肠外营养可以减少低血糖和呕吐的发生。

简介：目的：研究非小细胞肺癌对化疗药物原发敏感情况及药敏试验相关影响因素。方法：采用MTT比色法测定31例非小细胞肺癌标本对9种化疗药物的敏感性，每种药物设3个浓度等级，根据每种药物的抑制率进行分析。结果：31例肺癌标本对9种化疗药物的敏感程度依次为：异长春花硷83．87%、长春新碱77．42%、丝裂霉索74．19％、阿霉素69．72%、卡铂69．72％、顺铂61．29％、足叶乙甙58．06%、氨甲喋呤22．58%、5-氟脲嘧啶19．35％；足叶乙甙和阿霉素对肺鳞癌抑制率明显高于肺腺癌，足叶乙甙和顺铂对低分化肺癌抑制率明显高于中高分化肺癌。结论：体外药敏试验受到多因素影响，药敏结果能够较好指导临床化疗。

简介：目的探讨原发性肝癌患者的癌细胞、外周血白细胞、淋巴细胞和粒细胞等系列化疗药敏或耐药的关系及可行性。方法采用MTT法分别进行体外药敏或耐药试验，检测31例原发性肝癌患者新鲜肿瘤组织标本的癌细胞和外周血有核细胞中的白细胞、淋巴细胞及粒细胞对10种化疗药物的敏感性或耐药性。结果除HCPT（羟基喜树碱）外，癌细胞对其它9种化疗药物的抑制率均明显高于白细胞、淋巴细胞和粒细胞的抑制率；癌细胞、白细胞和淋巴细胞对前5个由高到低化疗药物的敏感性大致相同，癌细胞分别与白细胞、淋巴细胞及白细胞与淋巴细胞的抑制率呈正相关关系（P〈0．01、0．05）。结论对无法取得组织标本确定药敏结果的原发性肝癌患者以外周血白细胞、淋巴细胞药敏或耐药试验的检测是可行的，并能为临床扩大优化个体治疗方案提供实用而有参考价值的实验依据。

简介：目的因为顾忌早进食固体食物引起术后患者恶心、呕吐等一系列并发症，术后患者传统的营养方案是从流质饮食开始，逐渐过渡到半流质饮食，再到软质饮食，最后恢复普通饮食。本随机对照研究目的对比结直肠择期手术患者术后第1天给予低渣饮食或全流质饮食对患者的影响。方法111例行结直肠择期手术的患者被随机分配到低渣饮食组（n=54）或全流质饮食组（n=57）。主要观察指标是术后第2天呕吐发生率，次要观察指标是恶心指数、肛门恢复排气时间、住院天数、术后并发症。结果患者的一般情况、手术方式、术中情况、术后阿片类药物使用情况在两组间没有显著差异。与低渣饮食组比较，全流质饮食组术后第2天呕吐率更高（28％VS14％，P=O．09），平均恶心指数更高（4．7VS．3．5，P=O．01），肛门恢复排气时间更长（4．8VS3．7天，P=O．04），住院天数更长（7．0VS．5．0天，P=O．01）。即使调整协变量（腹腔镜技术、手术部位、术后伴随疾病、造口、鼻胃管），低渣饮食组的平均住院天数仍短于全流质饮食组。两组间术后并发症的发生率无统计学差异。对次要观察指标进行多因素分析，结果显示，与全流质饮食相比，低渣饮食可以使患者有更好的临床结局（P〈O．01）。结论结直肠手术后第1天低渣饮食在减少恶心感、加快肠道功能恢复、缩短住院天数等方面要优于全流质饮食，同时不会增加术后并发症的发生率。

简介：背景与目的：胶质瘤是颅内常见恶性肿瘤，治疗效果一直不令人满意，本文探讨雷公藤红素治疗人脑胶质瘤的丌丁行性。方法：建立BALB／c裸小鼠SHG-44胶质瘤同种移植动物模型，将34只荷瘤裸鼠随机分为5组，空白对照组、高、中、低剂量雷公藤红素作用组、阳性对照组，采用腹腔内注射给药方法。雷公藤红素按三种浓度4mg／kg、2mg／kg、1mg／kg分组给药，每日1次，每周5天；阳性对照顺铂组按2mg／kg给药，每周两次；空白对照组只喂养不做任何处理。共给药四周。全部荷SHG44胶质瘤裸鼠于给药后第28天断颈处死并剔出肿瘤，将肿瘤组织分块处置。定期观察肿瘤生长情况测量肿瘤体积，绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率。结果：5组荷SHG44胶质瘤裸鼠的移植瘤体积（处死后测量）比较，差异显著（F=5．519，P=0．002）；与空白对照组相比。雷公藤红素4mg／kg组、雷公藤红素2mg／kg组均能抑制肿瘤生长（P〈0．05），其体积抑瘤率分别为35％、26．9％。结论：雷公藤红素能明显抑制荷SHG44胶质瘤裸鼠的移植瘤生长，并存在剂量依赖性。

简介：背景和目的无法手术切除的结直肠癌肝转移(ColorectalLiverMetastases,CLMs)患者预后差,存活时间极少超过5年。尽管对部分肝脏原发及继发恶性肿瘤患者施行肝脏移植可获得较佳的预后,但目前仍普遍认为,结直肠癌肝转移是肝移植的绝对禁忌证。1995年之前,曾针对结直肠癌肝转移患者进行过数例肝脏移植,但预后不良(5年生存率仅为18%),自此放弃对此类患者进行肝脏移植。然而,目前总体肝移植生存率较当时提高30%左右。基于此,结直肠癌肝转移患者肝移植后的5年生存率有望达到50%。因此,本试验性研究旨在探讨CLM患者在接受肝移植后的潜在长期生存获益。方法自2006年11月到2011年3月,在此项前瞻性、试验性研究中,共对21名无法切除的结直肠癌肝转移患者进行肝移植术。患者入选标准包括一般状况良好(ECOG1分或以下)、结直肠癌伴无法切除的单纯肝转移、原发肿瘤已行根治性切除以及移植前接受过至少6周的化疗。结果入组的患者肝脏肿瘤负荷及原发肠癌T/N分期相异;肝移植术前,76%(16/21)患者存在至少一线化疗进展。Kaplan-Meier推算患者1、3及5年总体生存率分别为95%、68%及60%。与预期相同,移植术后复发转移现象普遍,21例中19例在中位时间6(2~24)个月内发生局部复发或转移。其中,单个肺转移灶7例;其余多部位(包括肺)转移者9例,包括移植肝新发转移7例,骨转移5例,卵巢或肾上腺转移3例,腹膜转移1例,腹主动脉旁淋巴结转移2例。2例发生直肠癌局部复发。然而,绝大多数的转移癌可经手术切除或射频治疗,且经过干预后,中位随访时间27个月(8~60个月),33%(7例)患者无病生存。肝移植术前肝脏肿瘤负荷、初次手术距肝移植的时间(肠癌切除距肝移植超过2年者生存获益更显著)以及化疗后肿瘤进展均为影响预后的显著性因素。结论研究结果表明,对于此类患者人群,肝移植�

简介：目的研究EBNA1和VCA-P18双多肽包被（EBNA1＋VCA-P18）的ELISA检测在鼻咽癌（NPC）血清学诊断中的价值。方法用合成肽EBNA1和VCA-P18建立ELISA法,检测37例病理确诊的鼻咽癌患者血清和33例健康人血清,并与国产EBVVCA/IgAELISA试剂盒比较。结果双多肽EBNA1＋VCA-P18/IgA灵敏度为91.9%,明显高于国产试剂盒的83.8%;二者特异度相同;EBNA1＋VCA-P18/IgA的阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比及优势比均高于国产试剂盒。结论双多肽EBNA1＋VCA-P18/IgA相比商品化试剂盒在鼻咽癌血清学检测中有更高的灵敏度,适用于鼻咽癌早期诊断和人群筛查。

简介：背景：本研究目的为评估替莫唑胺（TMz）治疗儿童和青少年复发性髓母细胞瘤／原始神经外胚层瘤fMB／FNET）患者的客观缓解率（ORR）。次要研究终点为评价替莫唑胺3次／天口服，5／28方案的安全性。

简介：目的腹腔镜辅助手术和多重管理方案（即加速康复程序,EnhancedRecoveryProgram,ERP）极大地改变了结直肠癌患者的围手术期管理,并改善了临床治疗结局。然而,腹腔镜手术尚未成为世界范围内结直肠癌手术治疗的标准,大量有着良好开腹手术技术的外科医生仍采用传统手术方式治疗。究竟传统开腹手术辅助ERP能否与腹腔镜辅助的微创治疗匹敌？这一问题还存在争议。EnROL（EnhancedRecoveryOpenversusLaparoscopic）多中心随机对照试验旨在解答上述问题。资料和方法该研究为Ⅲ期多中心随机对照临床试验,纳入可择期手术的成年结直肠癌患者（年龄≥18岁）,按1∶1随机分配至腹腔镜组或开腹组,两组均应用快速康复多重管理程序（ERP）进行围手术期管理。通过纳入中心、肿瘤部位（结肠或直肠）、年龄组（〈66/66~75/〉75岁）再进行分层分析。研究的主要结局指标为术后1个月的机体疲劳感（使用多维疲劳量表MFI-20评价）,次要结局指标包括：住院时间、术后并发症、患者其他不适情况及身体机能（简表SF-36）。术后7天或更早出院之前,受试患者和结局评估人员都不知晓治疗情况。手术质量及病理评估由中心负责人员进行盲评。该研究在英国临床伦理委员会南部牛津中心B注册,注册号为No.07/H0605/150。结果研究从2008年7月开始,至2012年4月结束,共在英国的12个中心纳入204例病人（其中腹腔镜组103人,开放结合ERP组101人）。腹腔组的切除范围[（6.8±3.7）vs.（18.4±7.5）cm]以及术中出血量[（115±152）vs.（257±290）ml]较开腹组减少,但手术时间[（182±69）vs.（135±54）min]相对延长,总体手术相关损伤评分[（31.2±6.0）vs.（31.8±6.0）]没有明显差别。两组病人术后1个月的机体疲劳感评分无显著差异[MFI-20（12.28,95%CI：11.3~13.1）vs.（12.05,95%CI：11.2~13.1）;P=0.93]。然而,腹腔镜组的中位

简介：背景和目的：评价2周期替莫唑胺联合拓扑替康治疗复发性或者难治性儿童神经母细胞瘤的客观缓解率（ORR）。