简介：摘要目的探讨耐药基因突变以及L型耐利福平的关系。方法对2015年8月到2016年8月期间，在我院收治的96例肺结核患者进行研究。采用PCR-SSCP法，对50株MTL型临床分离株进行测试。同时，进行常规的药敏实验。然后，对比检测的结果。结果在96例肺结核标本中，有54份被检出为MTL型，占56.3%，包括42例人型结核分支杆菌，12例牛型结核分支杆菌。在药敏试验中，将50株MTL型临床分离株作为研究对象。其中，有24株敏感，耐药率为52%。通过PCR-SSCP分析中，显示21例为阳性，检出率为42%。在恢复试验中，显示21株rpsL基因突变株中，15株依然对利福平有耐药性，占到71.4%。29株rpsL基因阴性株中，有26株恢复为细菌性，占到89.7%。结论对50株MTL型临床分离株进行测试后，有24株对利福平产生耐药性，占52%。21株显示阳性，检出率为42%。根据药敏结果，以及PCR-SSCP法，得出的两种办法的符合率为80.9%。

简介：三疣梭子蟹作为重要的海洋经济动物，其常见体色为茶绿色。近年来在我国东部沿海海域海捕三疣梭子蟹中开始出现体色为紫色的一类梭子蟹，除体色不同外，二者表型特征并无显著差异。为确定两种体色三疣梭子蟹之间的关系，本文对两种体色三疣梭子蟹不同个体的线粒体COl和16srRNA基因进行了比较分析以判定体色的差异是否由于种属的差异引起的。通过对以上两个基因部分序列的SSCP和相关序列测定分析，发现在紫色和茶绿色群体中这两个线粒体保守序列基因的SSCP电泳条带图谱相似，序列分析表明COl和16srRNA基因在两种体色三疣梭子蟹群体中的核苷酸序列相似度分别为99．81％和99．91％。以上结果表明，紫色三疣梭子蟹并未发生亚种的分化，即紫色和茶绿色群体属于同一个种。此外，紫色梭子蟹群体的线粒体DNA序列在进化关系上较茶绿色群体更为保守。

简介：TherRNAgeneticlocusisfoundinallprokaryoticorganisms,andishighlyconservative,althoughitsrelativelystablevariationsarefoundfrequentlyindifferentbacteria.Theutilityofthislocusasataxonomicandphylogenetictoolhasbeenreportedwidely.Thisstudy,aimedat16SrRNAgene(16SrDNA)andwiththehelpofbiomolecularmethods,attemptedtoachievethegoalofrapididentificationofcommonpathogensInthisstudy,333clinicalisolatedpathogenicbacteriawerecollected。TwopairsofprimerswerechosenandlabeledwithdifferentfluorescentdyesandthenusedtoamplifythegenomicDNAextractedfrombacteria.ThePCRproductswerethendetectedbycapillaryelectrophoresis-singlestrandconformationpolymorphism(CE-SSCP).Inordertopursuehigherresolutionandpeak-separationeffect,ahighefficientseparatingmedium,linerpolyacrylamidedel(LPA),wasputtouseinthisstudy.Finally,everybacteriacolonygenerateddistinctpatternsfromeachother,whichwereeasilytobeusedforidentification.TheseresultsindicatedthatPCR-CE-SSCPwasarapididentificationmethodforbacterialidentification,withtheaspectsofhighefficiencyandhighprecision.Comparedwithtraditionalmethod,thistechnologyisofgreatutilityforclinicaluseespeciallyforitshighsensitivity.

简介：在人教版高中《生物·选修3·现代生物科技专题》关于PCR的教学中，有几个问题会经常困扰教师和学生。下面就列举这些问题并作以解答。

简介：摘要院有色金属产业是重要的基础原材料产业，产品种类多、应用领域广、产业关联度高。青海省有色金属资源丰富，有色金属产业是青海省经济发展最为重要的支柱产业之一。SSCP框架认为青海省有色金属产业结构层面，市场集中度越大，产业绩效越好；产业产权结构层面，非国有企业产出越少，产业绩效越好。故青海应支持大型国有有色金属企业兼并重组，组建二到三家国有控股大型集团；进而构建产学研结合新模式，持续增强产业发展内生动力；同时支持非国有企业发挥优势，加快发展生产性服务业，为有色金属产业持续发展做好配套。

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简介：目的探讨生殖支原体在非淋菌性尿道炎(NGU)／粘液脓性宫颈炎(MPC)中的发病情况。方法应用聚合酶链反应对236例STD门诊的非淋菌性尿道炎(NGU)／粘液脓性宫颈炎(MPC)患者泌尿生殖道标本进行了生殖支原体的检测。结果生殖支原体的阳性检出率为17．8％。结论生殖支原体在性病高危人群中有一定发病率，可引起非淋菌性尿道炎(NGU)／粘液脓性寓颈炎(MPC)。

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简介：1985年Cetus公司的Mullis发明的聚合酶链反应（PolymeraseChainReaction，PCR）是现代分子生物学研究中的一项非常重要的技术，它可在短时间内在试管中获得数百万特异DNA序列的拷贝，从而很容易地对目的基因进行分析、鉴定以及其它操作。这一技术现已广泛应用于生物学的各研究领域。PCR的定量实质是核酸的体外扩增，当人们利用技术扩增出大量的特异DNA序列后，还必须对这些PCR产物进行定性或定量检测，特别是临床检验中，定量分析PCR产物可以为临床诊断、疗效观察等提供更为准确的信息。另外，在研究基因的表达调控研究中，经常利用RT-PCR定量检测某一特定的转录mRNA，因此，建立灵敏、准确、重复性好的PCR产物定量检测法是目前PCR及其相关技术研究的特点，电是定量PCR技术的基础。本文将对这一技术近年来的研究进展状况作一简要综述。

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简介：免疫PCR基本原理与ELISA相似，即用一段可扩增的DNA分子代替ELISA中酶放大检出信号,建立了直接免疫PCR的检测蓖麻毒素技术，实验结果表明，其灵敏度达1pg／ml，比ELISA方法灵敏度高10^3倍.

简介：目的：用荧光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）法准确地定是检验血清中乙型肝炎病毒（HBV）的数量和免疫指标，以指导临床。方法：采用HBV－DVAFQ－PCR诊断试剂盒，以一种完全闭管式的PCR和荧光探针杂交技术组合所产生的实时检验定量PCR方法，检测了58例临床血清标本。结果：经FQ－PCR检测，9例HBV的HBsAg、HBeAg、HBcAg、HBcAb都阳性标本，其HBV－DNA的阳性率为100％，平均HBV－DNA拷贝数为2．0×10^8/ml；16例HBsAg、HBeAb、HBcAb都阳性的标本，其阳性率为62．5％（10例），平均拷贝数为5．2×10^5/ml，而常规PCR只有33％的阳性率；7例HBsAb、HBeAb、HBcAb都阳性的标本，其阳性率为14．3％（1例），平均拷贝数为4．7×10^3ml。结论：HBV－DNA的FQ－PCR检测较常规PCR更具有较高的灵敏度和特异性，且定量准确，结果可靠，能够避免PCR后处理导致物假阳性污染，可以真实反映HBV的感染和低复制状态，对于乙型肝炎的临床诊断，治病方案的选择和疗效观察有较大的指导意义。

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简介：摘要：本文介绍了PCR实验室设计的基本要求及不同布局设计，并着重强调设计过程中需要关注的重点。

简介：结果电泳检测及纯化后DNA产物测序分析均显示TDPCR扩增产物条带特异性、效率较普通PCR扩增产物高,因此我们在VHL基因突变筛查中使用了普通PCR和TDPCR两种方法,在许多普通PCR无产物的基因扩增

简介：本实验通过合成与原有下游引物（Ｂ）相似的一条新引物（Ｂ’），经聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）扩增出比原ＢＣＲ－ＡＢＬｃＤＮＡ序列减少了４个碱基的参照物，达到定点诱变的目的。经酶切分析证明，两型ＢＣＲ－ＡＢＬｍＲＮＡ均可通过此方法得到相应的ｃＤＮＡ参照物。参照物和特测模板的共扩增产物可通过毛细管电泳达到基线分离，证明了其可行性。该参数物可用于慢性粒细胞白血

简介：目的建立检测常见丝状真菌感染病原菌的PCR-RFLP和多重PCR方法。方法建立以PCR技术为基础的限制片段长度多态性（RFLP）方法,首先用真菌通用引物扩增丝状真菌的ITS区,然后用限制性核酸内切酶对PCR产物进行酶切。用4种丝状真菌的特异性引物建立多重PCR体系,用该体系检测单模板、双模板和三模板的扩增情况,并测定该体系的特异性和敏感性。结果用PCR-RFLP技术能够鉴别5种常见丝状真菌,多重PCR能够根据扩增片段的不同鉴别菌种,在合适的反应条件下,对单模板、双模板和三模板均能扩增出目的片段。结论PCR-RFLP和多重PCR技术能够快速鉴定丝状真菌感染病原菌,有临床应用的良好前景。

简介：

简介：Objective:Infectionofhumanpapillomavirusincondylomaacuminatum(CA)wasdetectedbyrealtimefluorescencequantitativePCR(FQ-PCR)technique.Methods:SpecimensofCA-DNAquantificationfrom94caseswereexaminedbyrealtimeFQ-PCRtechniqueand32caseswerecomparedwiththesamemethodafter10-daystreatment.Results:CA-DNAwasfoundinallpatients,withanaverageof4.0×10^6copies/ul.After10daysoftreatment,theaveragewas2.1×10^5copies/ul.TherewasasignificantdifferenceintheaverageamountofCA-DNAbeforeandafterthetreatment.Conclusion:RealtimeFQ-PCRisagoodmethodforexaminingCA-DNAamountanditcandirectthetreatmentofCA.