简介:目的构建大鼠神经营养因子3(NT-3)基因真核表达载体并观察其在真核细胞内的表达情况。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从大鼠脑组织总RNA中扩增NT-3基因cDNA序列,将其克隆到真核表达载体pcDNA3中,经酶切鉴定和序列分析后,以阳离子脂质体Li-pofectamine2000介导转染L929细胞,应用免疫细胞化学和westernblot鉴定NT-3在细胞内的表达。结果RT-PCR产物为822bp的特异片段,重组质粒pcDNA3/NT-3酶切后产生822bp和5.2kb的片段,DNA测序证实822bp片段的碱基序列与大鼠NT-3基因序列完全一致,成功构建了pcDNA3/NT-3重组质粒。将其转染真核细胞后,免疫细胞化学、westernblot结果表明NT-3能在真核细胞中正确表达。结论成功构建了重组真核表达质粒载体pcDNA3/NT-3,为后续的研究奠定基础。
简介:目的:检测人胃癌细胞系中FHIT基因mRNA的表达状况及构建pcDNA3.1-FHIT真核表达载体。方法:RT-PCR法检测三种不同类型人胃癌细胞系中FHIT基因mRNA的表达,构建真核表达质粒pcDNA3.1-FHIT,通过酶切法、PCR扩增法和DNA序列分析鉴定重组质粒后,用脂质体转染至FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45,经G418筛选后RT-PCR鉴定。结果:FHIT基因在人胃癌细胞系BGC-823中呈阳性表达,在MGC-803、MKN-45细胞系中呈阴性表达。FHIT基因cDNA正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,并成功转染FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45。结论:FHIT基因在不同类型人胃癌细胞系中表达各异。成功构建pcDNA3.1-FHIT,并转染到FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45,使其FHIT基因阳性表达。
简介:目的构建白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶真核表达质粒pcDNA3.1/SAP2.为以其作为基因疫苗进行免疫动物实验奠定物质基础。方法从白假丝酵母菌中提取基因组DNA,以其为模板采用聚合酶链反应(PCR)法获取SAP2基因,将真核表达质粒pcDNA3.1(+)myc-HisC和SAP2基因行EcoRI和XhoI双酶切,琼脂糖凝胶纯化,连接酶切产物,转化TOP10感受态细菌,筛选菌落和测序鉴定。结果经PCR扩增获得的目的基因分子量与预计相同,并定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)myc-HisC,电泳获得预期的SAP2条带,测序证实为正确的SAP2序列。结论利用真核表达质粒pcDNA3.1(+)myc-HisC可以方便而高效地构建pcDNA3.1/SAP2重组质粒,该质粒能直接激活抗原提呈细胞,可以使重组质粒具有较强的免疫原性和免疫反应性。
简介:儿童心理学的研究如何更加有效地直接为提高我国人才素质服务?如何以心理科学为基础,立足于我国的教育实际,逐步建立我们自己的教育科学实验研究体系?为此目的,我们以“儿童推理过程的发展与教育”的实验研究为基础,经过多年的理论及上万人次的实验和各种形式的社会探测,逐步确定了《学习与全面发展》这个总课题,并把总课题的理论“物化”成一套工具——《3·3.3…系列智能学具》。我们这项研究的一个特点就是把科研成果的普及推广作为整个科研工作的有机组成部分。这套学具的应用过程就是我们同广大教师,家长和学生结合在一起深入进行科学实验的过程;同时它也是为教育实践服务取得社会效益的过程。目前,学具的一种型号已经在国内十多个省市的幼儿园、小学、中学、师范院校以及科研单位试用。为有组织、有计划地在国内逐步推广这项科研成果,我们已经同北京、天津、沈阳、徐州、蚌埠、杭州和遵义等地的有关单位签订了合作研究的协议书,还有几个地区的单位,即将同我们签订协议。为使各协作点的普及推广工作深入持久地向前推进,使这项科研成果更有效地为提高我国人才的素质和当前的教育改革服务,我们通过这个专栏:1.向老师、家长和学生提供有关学具的理论和方法方面的具体指导;2.介绍教师、家长和学生运用学具的收获体会、教案和个案等;3.交流各地协作研究工作的动态、信息。本栏的编者是中央教育科学研究所教育心理研究室的学习与发展组。愿这个专栏成为一座架在科研工作者与教育实际工作者之间的“立交桥”。欢迎各协作点的同志踊跃来稿。来稿可直接寄:北京北环西路10号中央教科所《3·3·3》编辑组。
简介:ThephaseandmorphologytransformationduringthehydrothermaltreatingprocessofY2O3wasevaluatedwithX-raydiffcrcnce(XRD),scanningelectronmicroscopy(SEM),transmissionelectronmicroscopy(TEM),particlesizeandspecificsurfaceareadetermination.TheresultsshowedthatthecubicY2O3didnottransferintohexagonalY(OH)3inpurewater.Therefore,purehexagonalY(OH)3withnanotubeandmicrorodmorphologieswereobtainedbyhydrothermaltreatingY2O3at150℃for12hin15mlof2mol/LNaOHsolutionwithandwith-outPVAorPEGItwassuggestedthatthecharacteristicpreferentialgrowthofY(OH)3wasattributedtothestructureanisotropyofhexahedronY(OH)3.TheadditionofPVAorPEGcouldpromotetheformingprocessofnanotubesbyselectiveadsorptionondifferentcrystalplanes,whichalteredthegrowthratealongdifferentdirectionsandresultedinthediffusionlimitofconstructingionsinthecentertopofrods.Finally,Y(OH)3:EuandY2O3:Eunanotubeswerealsosynthesizedbyusingthismethod,andtheirphotoluminescencepropertieswereevaluated.
简介:摘要:本教学设计案例围绕 预备单元(Starter Unit 3What color is it ? )展开。通过复习句型(What’s this/that? It’s an apple. What color is it? t’s red. Spell it ,please.It’s red)谈论物体颜色学习语法(an/a/the),同时训练学生听,说的能力 .本教学设计依据新课程标准要求,通过希沃游戏,大转盘游戏激发学生学习兴趣,采用图片直观教学法, 通过师生练习,小组练习,双人练习呈现新句型(It’s a red apple.The apple is red.),让学生观察发现总结 规律学习语法。通过完成听力任务培养学生抓住关键词寻找答案的听力技能,培养学生好的听力习惯 。同时以教材为本,结合实际,采用小组合作表演培养学生的口语技能和初步写作能力。本教学案例教学手段多样,使用希沃游戏教学,大转盘游戏,图片插入直观教学,图片裁剪,多媒体希沃白版5手机拍照视频上传,音乐剪辑插入播放等多种信息技术教学手段提高学生学习兴趣,调动学生积极性, 尽力让学生全体参与。教学过程中贯穿课程思政的理念,作业设计注重学生能力的培养。
简介:Anewμ3-Otriiron(Ⅲ)complex[Fe3O(OBz)6(CH3OH)3](NO3)(CH3OH)2(HOBZ=benzoicacid)hasbeensynthesized,itsstructurehasbeendeterminedandvariabletemperaturemagneticsusceptilityhasalsobeenmeasured.Inthemolecule,threeironatomsformedanequilateraltrianglewithu3-Oincenter.ThefittingtothemagneticsusceptibilityshowedthatanintramolecularantiferromagneticexchangeinteractionoccurredbetweenironatomswithJ=-25.51cm-1,andaweakerintermolecularantiferromagneticexchangeinteractionoccurredwithzJ’=-2.30cm-1.
简介:摘 要:首先概述了成都动车段电压过高导致机车不能出库的基本情况,然后基于实测数据对电压电流信号进行分析,从峰值电压、基波有效值电压、电压总谐波畸变率和电压谐振等角度分析动车段电能质量,从而对导致过电压的原因进行探究,综合分析结果得到导致过电压的原因并提出了治理措施的建议。