简介:摘要目的探讨穗花杉双黄酮(AF)在体外和体内对肺腺癌细胞的影响及其作用机制。方法细胞实验选用人肺腺癌细胞株H1299(购自美国典型菌种保藏中心),设立对照组、AF 5 μmol/L组和AF 10 μmol/L组,采用克隆平板、细胞周期分析、赫斯特染色(Hoechst)、蛋白质印迹法(Western blot)等检测AF对肺腺癌细胞的影响。动物实验选用BALB/c雄性8周龄小鼠(江苏集萃药康生物科技有限公司),皮下注射H1299,设立对照组、AF 20 mg/(kg·d)组和AF 40 mg/(kg·d)组,通过比较肿瘤组织体积、重量及原位末端标记法检测AF对肺腺癌细胞的影响。同位素定量分析发现差异蛋白是磷酸酶2A抑制因子(CIP2A),在上述实验的同时用Western blot检测CIP2A蛋白表达;经过转染构建CIP2A低表达和CIP2A过度表达细胞,分别设立AF 10 μmol/L组、CIP2A过度表达+AF 10 μmol/L组和CIP2A低表达+AF 10 μmol/L组,用赫斯特染色(Hoechst)+流式细胞仪检测各组的细胞增殖和凋亡。两样本均数间的比较采用t检验。结果细胞实验中肺腺癌细胞增殖百分比AF 5 μmol/L组[(75.12±3.11)%,t=9.638,P<0.01]、AF 10 μmol/L组[(58.01±4.02)%,t=11.382,P<0.01]低于对照组[(100.02±8.11)%];细胞G0/G1期百分比AF 5 μmol/L组[(55.23±2.21)%,t=6.928,P<0.01]、AF 10 μmol/L组[(65.33±3.23)%,t=10.132,P<0.01]高于对照组[(47.12±3.32)%];肺腺癌细胞凋亡百分比AF 5 μmol/L组[(12.38±0.51)%,t=26.583,P<0.01]、AF 10 μmol/L组[(21.88±0.95)%,t=43.709,P<0.01]低于对照组[(2.29±0.13)%];CIP2A蛋白表达AF 5 μmol/L组(0.72±0.02,t=9.782,P<0.01)、AF 10 μmol/L组(0.49±0.03,t=19.816,P<0.01)低于对照组(1.00±0.02)。动物实验中肿瘤体积实验组低于对照组(P<0.05);肿瘤重量AF 20 mg/(kg·d)组[(438.33±30.40) mg,t=19.036,P<0.01]、AF 40 mg/(kg·d)组[(255.83±24.58) mg,t=60.782,P<0.01]低于对照组[(810.83±30.40) mg];肿瘤组织中CIP2A蛋白表达AF 20 mg/(kg·d)组(0.60±0.03,t=31.529,P<0.01)、AF 40 mg/(kg·d)组(0.43±0.03,t=40.613,P<0.01)低于对照组(1.00±0.01);原位末端标记法显示AF明显增加肿瘤细胞的凋亡。CIP2A低表达+AF 10 μmol/L组(0.49±0.03,t=8.012,P<0.01)抗增殖活性强于AF 10 μmol/L组(0.60±0.03);CIP2A低表达+AF 10 μmol/L组(28.06±0.89,t=17.663,P<0.01)促凋亡活性强于AF 10 μmol/L组(22.02±0.73);CIP2A过度表达+AF 10 μmol/L组(0.80±0.05,t=10.484,P<0.01)抗增殖活性弱于AF 10 μmol/L组(0.58±0.04);CIP2A过度表达+AF 10 μmol/L组(8.13±0.68,t=37.165,P<0.01)促凋亡活性弱于AF 10 μmol/L组(22.02±0.73)。结论AF对肺腺癌细胞有抑制生长、促进凋亡作用,AF可能通过CIP2A来发挥作用。
简介:目的:建立复方银杏叶刺梨胶囊银杏黄酮醇苷的HPLC测定方法。方法:色谱柱为汉邦C18柱(200mm×46mm,5μm);流动相为甲醇-04%磷酸水溶液(50∶〖KG-*2/3〗50);流速为10mL·min-1;检测波长为360nm;柱温为30℃。结果:槲皮素、山柰素、异鼠李素分别在128~638μg·mL-1、129~644μg·mL-1、26~132μg·mL-1线性关系良好,平均回收率槲皮素为9948%,山柰素为10269%,异鼠李素为10015%。结论:该测定方法简便易行、准确性好、灵敏度高、重复性好,可用于复方银杏叶刺梨胶囊中银杏黄酮醇苷的质量控制。
简介:摘要:本论文综述了银杏叶中总黄酮的提取方法,包括溶剂萃取法、超声辅助酶法、超临界二氧化碳萃取法等,在此基础上提出低共熔溶剂对银杏叶总黄酮的提取并进行了展望,以期为低共熔溶剂的提取提供借鉴和参考。
简介:从银杏(GinkgobilobaL.)叶中分离得到5个黄酮苷类化合物,通过波谱方法鉴定它们的结构为洋芹素-7-葡萄糖苷(apigenin7-glucoside1),木樨草素-?¢-葡萄糖苷(luteolin?¢-glucoside2),木樨草素-?¢-葡萄糖苷(luteolin?¢-glucoside3),柯伊利素-7-葡萄糖苷(chrysoeriol7-glucoside4)和tricetin?¢-methylether-?¢-b-D-glucoside(5)。其中化合物5为新化合物化合物3和4为首次从该种植物中分得。
简介:摘要目的探讨银杏黄酮与阿托伐他汀联用对高血脂小鼠的降脂作用。方法选取雄性金黄地鼠随机分配成空白对照组、高脂模型组、银杏黄酮组、阿托伐他汀组、银杏黄酮与阿托伐他汀复方给药组(简称复方给药组)。空白对照组喂养普通饲料,其余各实验组喂养高脂饲料。实验过程中记录小鼠体重变化,给药六周后断头处死分离血清,进行血脂成分总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)的检测。取其肝脏、肾脏及腹主动脉组织,观察肝脏表面的病理改变,并称量肝、肾的重量计算肝、肾指数。将各组织制成石蜡切片,肝、肾组织进行HE染色后在显微镜下观察组织形态变化;腹主动脉组织进行油红O染色后显微镜下观察组织形态变化,并应用MoticDigilabⅡ-Client图像分析软件测量腹主动脉内膜脂质的厚度,比较不同给药组的腹主动脉内膜的变化。结果①高血脂模型组与空白组比较体重呈现显著的快速增长,复方给药组与模型组比较可以极显著的抑制金黄地鼠体重的增加(P<0.01)。②高脂模型组小鼠血清TC、TG、LDL含量与空白组比较有显著性差异(P<0.05)。阿托伐他汀组、复方给药组分别与模型组比较血脂各成分均有显著性变化(P<0.01或0.001)③各给药组肝脏指数与模型组比较无显著差异,与空白组比较有显著的差异(P<0.05)。各组动物肾脏指数与空白组比较均无显著差异(P>0.05)。④银杏黄酮单用药组与模型组比较脂质厚度变化不显著(P>0.05);阿托伐他汀组和复方给药组分别与模型组比较脂质厚度具有显著性变化(P<0.05)。结论银杏黄酮与阿托伐他汀复方药物具有明显提高降脂效力的作用。
简介:目的:使用效应面优化法来优化银杏黄酮醇苷的水解条件,并验证在优化的水解条件下的银杏黄酮醇苷的定量分析方法.方法:采用4因素5水平的星点设计方法,考察溶剂甲醇(X1)、25%HCl(X2)的用量和水解时间(X3)及水解温度(X4)对银杏叶标准提取物中银杏黄酮醇苷含量测定的影响.结果:不同的水解条件组合产生不同的测定结果,跨度从13.44%到27.62%;表明各因素之间有复杂的交互作用.拟合出多元二次方程并绘出效应面,在此基础上得出银杏黄酮醇苷的最佳水解条件:将约25mg的GBE用12ml甲醇溶解后加入4.2ml25%HCl置于密封试管中于75℃水解100min;重复性试验和回收率试验表明结果良好.结论:方程的预测值和实际测定值的偏差较小,表明效应面优化法优化银杏水解条件切实可行.
简介:摘要目的建立血络通胶囊银杏黄酮醇苷的HPLC测定方法。方法AgilentC18柱(4.6mm×150mm,5?m);流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(50∶50);流速为1.0mL?min-1;检测波长为360nm;柱温为30℃。结果槲皮素、山柰素、异鼠李素分别在3.06~61.2μg?mL-1、2.46~49.2μg?mL-1、2.29~45.84μg?mL-1线性关系良好,平均回收率槲皮素为98.47%,山柰素为99.53%,异鼠李素为99.26%。结论该测定方法简便易行、准确性好、灵敏度高、重复性好,可用于血络通胶囊中银杏黄酮醇苷的质量控制。
简介:摘要目的建立以硝苯地平为替代对照品同时测定银杏叶片中槲皮素、山柰素和异鼠李素含量的方法。方法以硝苯地平为替代对照品,采用HPLC法,色谱柱为JADE-PAK十八烷基硅烷键合硅胶柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为0.5%磷酸溶液(用三乙胺调节pH2.2)-甲醇(50∶50),硝苯地平检测波长为236 nm,槲皮素、山柰素和异鼠李素检测波长360 nm,柱温35 ℃,通过测定硝苯地平与槲皮素、山柰素和异鼠李素的相对校正因子,采用内标法,并利用相对校正因子计算银杏叶片中槲皮素、山柰素和异鼠李素含量。结果硝苯地平、槲皮素、山柰素和异鼠李素进样量分别在0.12~1.16 μg、0.07~0.73 μg、0.06~0.56 μg、0.03~0.27 μg范围内与其峰面积线性关系良好;硝苯地平与槲皮素、山柰素和异鼠李素之间的相对校正因子分别为0.782 2、0.768 5、0.808 8;槲皮素、山柰素和异鼠李素平均回收率分别为98.48%、98.03%和94.55%。结论用硝苯地平作为替代对照品,对银杏叶片中槲皮素、山柰素和异鼠李素含量进行测定和质量控制具有经济性、可行性和实用性。