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  • 简介:目的分析癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)的B细胞,为肿瘤治疗提供理论基础。方法以CEA的完整氨基酸序列为研究基础,采用Hopp&Woods的亲水性方案,Emini表面可及性方案和Jameson-Wolf抗原指数方案,辅以CEA的二级结构及其柔性区域分析,预测CEA的B细胞。结果预测的B细胞可能位于CEA的N端第150~160、168~172、207~211、332~338、372~377、467~472、485~490、507~516、580~584区段。结论应用多参数预测CEA的B细胞,可进一步用于CEA相关肿瘤治疗性疫苗的分子设计和研究。

  • 标签: 癌胚抗原 B细胞表位 预测
  • 简介:目的预测鳞状细胞癌抗原(squamouscellcarcinomaantigen,SCCAg)的B细胞抗原及HLAI类限制性细胞毒性T细胞。方法获得SCCAg的三维结构后,采用生物信息学方法预测SCCAg蛋白存在的B细胞;而后,采用NetCTL、ProtParam等软件方法预测SCCAg中可能存在的HLAI类限制性CTL。结果SCCAg蛋白中包含10个线性B细胞和5个构象B细胞;结合与HLAI类分子结合力、蛋白酶体切割效率和TAP转运效率,经NetCTL预测发现,针对不同的HLAI类分子,肿瘤抗原SCCAg蛋白中存在多个HLAI类分子的限制性CTL。结论综合运用多种方法预测了肿瘤抗原SCCAg蛋白中存在的B细胞抗原和HLAI限制性的CTL,为下一步针对SCCAg蛋白开展靶向免疫治疗提供了基础。

  • 标签: SCCAG B细胞表位 CTL表位
  • 简介:比较不同MHC-Ⅱ类抗原预测软件的优缺点,为后续应用提供依据。在众多HLA-Ⅱ类抗原中,选取HLA-DR的6个(DRB1*0101,0301,0401,0701,1101和1501)为代表,选取MHCBN数据库中的309条已知抗原的肽链为待测肽链。使用近年来常用的7个预测软件,根据不同软件的临界值确定入选结果数据,比较各软件所得结果与已有的实验结果之间的差距以确定其优劣。综合7个软件预测结果进行评价,得出NetMHCⅡ和NetMHCⅡpan所得结果准确率最高。可以用NetMHCⅡpan及NetMHCⅡ进行MHC-Ⅱ类分子抗原预测。不同软件HLA的各个亚型的预测所得指标不一致,提示综合运用不同软件对多肽进行预测十分必要。

  • 标签: MHC-Ⅱ 表位预测 临界值 软件 比对
  • 简介:目的通过生物信息学与合成多肽方法,寻找SARS-CoVS蛋白的抗原,为抗SARS多肽疫苗的深入研究提供试验依据.方法利用网络共享软件对与S蛋白抗原性相关的参数进行预测分析,从而设计S蛋白的抗原多肽;将合成的抗原多肽免疫家兔,用ELISA法检测产生的抗体.结果ELISA法检测发现,设计合成的2个抗原多肽片段(残基348-380,434-470)在家兔体内均能诱导抗体产生.结论设计合成的2个抗原多肽片段中包含SARS-CoVS蛋白的抗原,免疫家兔后能产生特异性抗体.

  • 标签: 抗原表位 S蛋白 SARS-COV 合成多肽 免疫反应 家兔
  • 简介:通过PCR方法扩增并分析了恶性疟原虫多抗原融合基因awte序列,再分别克隆于温度诱导型融合表达载体pEX31b和IPTG诱导型融合型表达载体pGEMEX1中,并进行了诱导表达,并对表达产物MS2-AWTE和T7Ф10-AWTE融合蛋白进行间接ELISA检测,证实MS2-AWTE和T7Ф10-AWTE都具有免疫学活性.另外,同样将a1wte基因分别克隆于温度诱导型和IPTG诱导型非融合表达载体pBV200、pKEN中并进行诱导表达,但在SDS-PAGE中并未检测到可见的AWTE表达带.

  • 标签: PCR 基因克隆 表达 融合蛋白 ELISA 恶性疟原虫
  • 简介:目的探讨乳腺上皮粘蛋白(SBEM)基因在三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达,进一步筛选出蛋白的保护性抗原.方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学和流式细胞仪检测SBEMmRNA和蛋白在MDA-MB-231细胞中的表达;应用生物信息学方法结合SYFPEITHI和ProPred-I预测数据库,预测乳腺癌中SBEM蛋白的白细胞抗原(HLA)-A*0201限制性.结果SBEMmRNA在MDA-MB-231细胞中呈阳性表达,SBEM蛋白在MDA-MB-231细胞膜上呈高表达.对候选抗原进行筛选和分析,获得两条九肽作为SBEM的候选HLA-A*0201限制性抗原肽.结论SBEM基因在恶性程度较高的MDA-MB-231细胞中呈高表达,筛选出的SBEM蛋白保护性抗原为个体化治疗乳腺癌转移提供理想的干预靶点及新的治疗思路.

  • 标签: 乳腺上皮粘蛋白 乳腺肿瘤 表位
  • 简介:摘要目的掌握克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)核蛋白(NP)和糖蛋白(GP)片段的精细抗原谱分布,明确优势抗原位在克里米亚-刚果出血热(CCHF)实验室检测中的价值。方法2014—2021年在新疆大学生命科学院实验室将CCHFV YL04057株采用改良生物肽合成方法分段表达出由8个氨基酸组成的最小合成短肽,以CCHFV多克隆抗体或单克隆抗体14B7(IgM)或CCHFV阳性羊血清为抗体,用免疫印迹方法鉴定出NP和GP片段上具有抗原活性的最小抗原(BCE),并采用邻接法将获得的具有序列多态性的BCE与不同地区的CCHFV进行空间聚类,确定BCE组合方式与地理区域分布的相关性,探讨其在建立血清学诊断中的应用价值。采用原核表达质粒(pET-32a、pGEX-KG)和带有不完整谷胱甘肽(GST188)标签的原核表达质粒(pXXGST-ST-1)构建和表达NP片段上6个不同肽段长度的优势抗原,建立间接酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法,以经免疫荧光法(IFA)鉴定的CCHF羊血清为对照,统计分析不同肽段长度的抗原重组蛋白与IFA检测结果的特异度、敏感度和总符合率。结果CCHFV NP和GP片段共有30个具有抗原活性的BCE,其中NP片段抗原集中的核心中间片段NP2(aa 170~305)有6个BCE,两端的NP1(aa 1~200)和NP3(aa 286~482)有9个BCE;GP片段的Gc(aa 1~558)和Gn(aa 533~708)片段有14个BCE和1个包含15个氨基酸的长抗原肽(AP),NP片段BCE氨基酸序列的同源性为97.1%,GP片段对应的同源性为89.1%。在GP片段9个具有序列多态性的BCE中,由GnEc1、GnE2、GnE4、GcE3、GcE6和GcAP-4(Ap)6个组合BCE可将15株来自全球不同地区的CCHFV聚类成亚洲Ⅰ、亚洲Ⅱ、非洲Ⅰ、非洲Ⅱ和欧洲 5个地理类群。构建表达的PET-32a-NP(全长)、PGEX-KG-NP2(aa 170~305)、pGEX-KG-NP2-1(aa 235~275)、PGEX-KG-NP2-1-1(aa 237~256)、pXXGST-1-NP2-1-2(aa 250~265)和PGEX-KG-NP2-1-3(aa 260~276)6个重组蛋白CCHFV NP兔多克隆抗血清(pAb)免疫印迹反应阳性,以33份经IFA CCHF检测的羊血清为参照,以NP2和NP2-1 2个片段构建的重组蛋白为抗原建立的间接ELISA检测方法检测敏感度、特异度和总符合率最好,敏感度分别为73.4%(11/15)和66.7%(10/15),特异度分别为100%(18/18)和94.4%(17/18),总符合率分别为87.9%(29/33)和81.8%(27/33)。结论CCHFV NP和GP上分布着数量较多的具有抗原免疫活性的BCE,其中,优势抗原位在CCHF实验室血清学诊断中具有较高的应用价值。

  • 标签: 出血热病毒,克里米亚-刚果 表位 酶联免疫吸附测定 核蛋白 糖蛋白
  • 简介:摘要目的了解CD19异构体对双特异性T细胞衔接器(BiTE)治疗的反应,进一步探讨BiTE治疗无效的相关机制及相应的解决方案。方法通过半定量RT-PCR的方法检测1例CD19+急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者BiTE治疗前后CD19异构体mRNA表达量的情况,Sanger测序对相应的异构体序列进行分析,流式细胞术及转录组测序分析治疗前后谱系特异性分子的表达情况。结果患者初诊时即存在2号外显子缺失型CD19异构体的表达,BiTE治疗后患者未缓解,流式细胞术检测发现CD19抗原表达转阴,但2号外显子缺失型CD19异构体的表达量并无增加,且细胞表型及转录组测序均未见谱系转化的发生。外显子可变剪接引起的缺失型CD19异构体的表达及谱系转化并非该患者CD19抗原缺失的机制。该例患者在疾病进展退出BiTE治疗组之后,采用中国医学科学院血液病医院自主研发的CD22及CD19 CAR-T序贯治疗后完全缓解。结论该例患者CD19抗原-缺失导致BiTE治疗无效,其缺失并非由可变剪接或谱系转换所致,更换为CD22、CD19双靶点CAR-T细胞治疗有效。

  • 标签: 白血病,淋巴细胞,急性 双特异性T细胞衔接器 表位缺失 异构体 CD19
  • 简介:<正>连日来,出席十届全国人大一次会议的吉林代表审议《政府工作报告》十分热烈,会上会下,代表相见三句话不离《政府工作报告》。这不,驻地金台饭店的吉林不少代表已用过晚餐,离开一楼餐厅,惟有8号桌的三没有离去,他们手里拿着碗筷,却谈兴正浓。这三是一汽总经理竺延风、中石化吉林分公司总经理王永春、东北师大附中校长孙鹤娟。竺延风:《政府工作报告》中,关于发展教育事业、搞好国企改革两部分份量很重。孙鹤娟:我们的任务光荣而艰巨。竺延风:孙校长,搞教育你

  • 标签: 政府工作报告 竺延风 国企改革 教育事业 东北师大附中 汽车工业
  • 简介:摘要目的研究泛素羧基末端水解酶-1(UCH-L1)抗原自身抗体在干燥综合征(SS)筛查诊断中的临床意义。方法用ELISA检测2017年1月至2020年1月于郑州大学第五附属医院和北京大学人民医院就诊的98例SS患者[男17例,女81例,年龄(49.1±12.3)岁]和37名体检健康志愿者[对照组,男6名,女31名,年龄(46.3±5.8)岁]血清UCH-L1抗原自身抗体的水平。分析与合成UCH-L1三种潜在的抗原肽段,最终抗UCH-L1203-214抗体和抗UCH-L158-69抗体进入研究,比较两组抗UCH-L1抗体水平,并使用Pearson相关分析UCH-L1与患者临床资料的相关性。结果SS组血清中抗UCH-L1203-214抗体水平显著高于健康对照组(108.2±54.3比78.9±25.8,P<0.001)。SS组血清中抗UCH-L158-69抗体水平显著高于健康对照组(86.8±33.3比60.4±21.5,P<0.001)。SS患者血清中抗UCH-L1203-214抗体及抗UCH-L158-69抗体阳性率分别为27.6%(27/98)和25.5%(25/98),健康对照组分别为2.7%(1/37)和5.4%(2/37)。在血清抗UCH-L158-69抗体阳性的SS患者中,血清IgG、γ球蛋白及类风湿因子(RF)水平及抗SS相关抗原B(SSB)抗体阳性率均高于抗UCH-L158-69抗体阴性患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。SS组,在抗核抗体(ANA)、抗RNA结合蛋白(RNP)抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体阴性患者中抗UCH-L1203-214抗体阳性率分别为32.1%(9/28)、27.2%(25/92)、36.4%(12/33)、28.6%(18/63);抗UCH-L158-69抗体阳性率分别为21.4%(6/28)、30.4%(28/92)、30.3%(10/33)、20.6%(13/63)。血清抗UCH-L1203-214抗体水平与SS患者血清IgA水平呈正相关(r=0.21,P=0.024);抗UCH-L158-69抗体水平与SS患者血清γ球蛋白、IgG、RF水平均呈正相关(r=0.35、0.33、0.32,均P<0.01)。结论UCH-L1抗原自身抗体与SS患者某些临床指标具有相关性,对SS的筛查及诊断具有一定意义。

  • 标签: 干燥综合征 抗泛素羧基末端水解酶-1 自身抗体 病例对照研究
  • 简介:摘要目的探讨HBV PreC/C及S基因抗原的突变对慢性乙型肝炎患者HBeAg血清学状态的影响。方法在横断面研究中,通过纳入35例未经抗病毒治疗慢性乙型肝炎患者,采用巢式PCR-TA克隆-测序方法筛选与HBeAg血清学状态相关的HBV PreC/C和S基因突变位点。然后在纵向研究中(60例)利用多元回归模型校正相关混杂因素,探讨HBV PreC/C及S基因抗原的突变与HBeAg状态之间的独立关系。结果在横断面研究中,64.4%的PreC/C突变和68.2%的S突变发生在抗原区。有10个突变位点(PreC/C50、55、79、84、103、126、145、184和s110、s213)与HBeAg阴性状态相关(P < 0.05)。在纵向研究中校正了年龄、性别、HBV基因型、血清丙氨酸转氨酶水平和PreC W28*突变等混杂因素后,结果显示Tc细胞(PreC47-56、PreC117-125、s208-216)和Th细胞(PreC176-185)的突变是影响宿主HBeAg血清学状态的主要独立危险因素。结论HBV PreC/C区(PreC47-56、PreC117-125和PreC176-185)和S区(s208-216)的突变是影响宿主HBeAg状态的主要独立因素,提示这些抗原的突变可能参与HBeAg的血清学转换。

  • 标签: 肝炎,乙型,慢性 肝炎病毒,乙型 表位 突变
  • 简介:摘要目的研制用于H7N9禽流感病毒诊断的血凝素线性B细胞抗原单克隆抗体。方法采用H7N9禽流感病毒血凝素特异性线性B细胞抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞技术和间接ELISA法筛选、鉴定获得稳定分泌抗H7N9禽流感病毒血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞株;通过SDS-PAGE、间接ELISA和斑点免疫印迹技术鉴定其亚型、效价、纯度等生物学特征。结果共获得2株单克隆抗体(7C8H8和8E9E2),其中7C8H8抗体亚类为IgG2a,腹水抗体效价>1∶512 000,且可以特异性结合H7N9禽流感病毒血凝素。8E9E2仅具有较低的H7N9禽流感病毒血凝素蛋白结合力。结论获得1株可分泌高效价、高特异性的抗H7N9禽流感病毒血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞株7C8H8。

  • 标签: 禽流感病毒 血凝素 表位 特异性 单克隆抗体
  • 简介:摘要本文针对邯郸市区因新装小区交叉出现的优质服务风险,发明了一种不用进入用户家就能核对表的测量仪器,并对该测量仪器进行具体介绍。

  • 标签: 优质服务 串户 免入户分户测量仪
  • 简介:生物学的新发现将极大地依赖于我们在多个维度和不同尺度下对多样化的数据进行组合和关联的分析能力,而不再仅依赖对传统领域的继续关注。在生物信息的存储、获取、联网、处理、浏览以及可视化等方面,都对理论、算法和软件的发展提出了迫切的需要,计算机科学也从生命系统中获得启示,产生了许多新概念,包括:决策树、随机森林、支持向量机、人工神经网络等等。这样的学科交叉丰富了各个相关领域,这将在未来的几十年中得到进一步发展。

  • 标签: 生物学 信息 支持向量机
  • 简介:摘要:对于电能而言,自动化检定流水线通常涉及到较多表,并伴随较高的故障频率,如果单纯应用人工巡视,将无法满足当前日益发展的故障修复需求,因此,本文以实际情况出发,围绕自动化检定流水线,完成了对表故障定位以及报警系统的设计,通过以多个角度展开分析,在提高故障定位准确性的同时,同步启动报警系统,并在用户界面中显示相应的信息。本文经验证试验后,对该系统定位、报警功能予以证实,提示该系统可行性良好。

  • 标签: 自动化检定流水线 电能表 表位故障
  • 简介:摘要:随着科技的发展,自动化电表技术不断提升,为提升电表的使用效率,应为电表设计相应的报警系统。本文就电能自动化检定流水线故障定位及报警系统设计进行探究,简单分析电表的故障定位系统以及报警系统的设计理念与相关技术,旨在为相关工程建设人员提供几点参考意见。

  • 标签: 电能表 自动化检定流水线 表位故障
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  • 简介:HCV的研究主要集中在以下几个方面:①HCV基因及其产物结构与功能的分析;②HCV的复制机制;③HCV保护性抗原的鉴定及疫苗的研制;④抗HCV药物筛选;上述4个方面的研究都需要HCV动物模型和体外细胞模型。筛选出与原始抗原序列完全相同的线性(Linerepitope),又可以筛选出与原始抗原序列不同但功能相似的构像(conformationalepitope),即模拟。这些研究及技术为选取中国HCV流行株T细胞模拟和构建细胞模型奠定了基础。理想的细胞模型应具备以下基本条件:①稳定性,即细胞在培养条件下能够稳定地复制和表达;②易于重复;③高水平表达基因产物;④检测方法方便敏感。有研究利用人外周血淋巴细胞建立了HCV感染HCV病毒细胞模型。所以采用人丙型肝炎病毒T细胞模拟片段融合基因转染外周血淋巴细胞具有充分依据。

  • 标签: 肝炎病毒 丙型 T细胞 表位