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  • 简介:随着女性对自身健康意识的不断提高和社会普查的广泛化,乳腺检出率逐年递增,呈现出低龄化的趋势。经过严格治疗后仍出现的复发、转移等情况成为目前临床治疗难以逾越的鸿沟。研究人员认为癌症的复发、转移同干细胞有密切关系。Bonnet等[1]于1997年首次分离出具有永久分化能力的细胞,并命名为干细胞。2003年,Al-Hajj等[2]以CD44+CD24-/lowlin-细胞表面标记分离出乳腺干细胞。现今,乳腺干细胞已成为乳腺研究方面的热点和难点。

  • 标签: 乳腺肿瘤 干细胞 上皮间质转化 微环境 治疗
  • 简介:干细胞是一类具有自我更新和多项分化潜能的原始细胞。在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞。肿瘤干细胞是肿瘤中具有自我更新能力并能产生异质性肿瘤细胞细胞,与肿瘤进展、耐药、复发、转移等关系密切。肿瘤干细胞在肿瘤细胞中的比例一般不到5%,却可能是癌症演进的关键细胞。直到2003年,人类乳腺干细胞才被发现和鉴定,这是进入21世纪后,乳腺基础研究领域最重要的发现之一。

  • 标签: 乳腺癌干细胞 干细胞标志 信号调控 靶向治疗
  • 简介:摘要目的富集裸鼠乳腺移植瘤中的乳腺干细胞并进行分选。方法将人乳腺MDA-MB-231细胞接种于20只裸鼠右侧腋窝皮下,观察肿瘤的生长情况,30 d后剥离肿瘤,对组织进行HE染色,并从组织中分离出肿瘤细胞。用含血清的DMEM培养液培养分离出的移植瘤细胞,观察移植瘤细胞的形态及生长情况;应用流式细胞分选仪检测移植瘤细胞干细胞(CD44+ CD24-/low细胞)比例。用含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和B27细胞培养添加剂的无血清DMEM培养液培养移植瘤细胞,获得细胞微球体;应用流式细胞分选仪检测培养第10天微球体中干细胞比例,并根据细胞表面标志分选出干细胞。结果20只裸鼠皮下注入MDA-MB-231细胞9 d后,17只皮下出现肿瘤,肿瘤组织实质细胞多,间质少,瘤细胞呈条索样排列,细胞体积大,胞质丰富,细胞核大小不一,深染,核分裂象多见,核仁清晰,多形性明显。用含血清的DEME培养液培养移植瘤细胞24 h后,细胞开始贴壁,3 d后贴壁率达60%,7 d后细胞增殖加快,细胞形态更趋于一致,多呈梭形,和MDA-MB-231细胞形态无明显差异,其中干细胞比例为(0.10±0.02)%。用含细胞培养添加剂的无血清培养液培养移植瘤细胞后,细胞呈球样生长,第10天微球体中干细胞比例为(70.47±2.03)%。结论裸鼠皮下接种MDA-MB-231细胞能建立裸鼠乳腺异位移植瘤模型,分离出的移植瘤细胞经无血清培养能富集移植瘤中的乳腺干细胞,从而能分选出更多乳腺干细胞,为研究乳腺干细胞生物学特性提供基础。

  • 标签: 乳腺肿瘤 肿瘤干细胞 肿瘤移植 乳房肿瘤,实验性 细胞分离 小鼠,裸 流式细胞术
  • 简介:摘要目的对乳腺干细胞的生物特性进行分析,并探讨其治疗疗效。方法使用计算机进行检索,对关于乳腺干细胞进行标志物和鉴定工作,并查找相应的文献,对文献内容进行进一步分析。结果乳腺细胞是第一个在实体肿瘤中被鉴定的肿瘤细胞,人们通过对肿瘤细胞进行观察,从而能够有效对其行为进行深入认识,对乳腺干细胞的分化和更新进行调控。结论对乳腺细胞进行靶向治疗,能够有利于根治乳腺,利用靶向治疗是目前研究的热点方向之一。

  • 标签: 乳腺癌 肿瘤干细胞 放射耐受性 临床治疗
  • 简介:目的通过微球体培养富集乳腺干细胞,并检测其相关基因的表达。方法将MCF-7乳腺细胞进行第一代微球体培养,7d后消化微球体获得单细胞悬液,取部分细胞进行第二代微球体培养,另一部分细胞则在胶原底物进行分化培养。于培养第11天收集第二代微球体细胞、分化细胞,采用流式细胞术进行干细胞比例分析;同时应用Real-timePCR技术检测β-catenin、CXCR4、SOX2、ALDH3A1mRNA表达。结果流式细胞分析显示,微球体细胞和分化细胞的侧亚群细胞比例分别为(7.36±0.54)%和(4.32±0.42)%(P〈0.05),CD55^high比例分别为(17.41±1.09)%和(4.47±0.33)%(P〈0.05)。Real-timePCR检测结果表明,微球体细胞与分化细胞相比,β-catenin、CXCR4、SOX2及ALDH3A1mRNA表达分别上调了约1.5、5.0、4.0和5.7倍(P〈0.01)。结论微球体细胞富集了较高比例的乳腺干细胞,且β-catenin、CXCR4、SOX2、ALDH3A1mRNA呈现高表达。

  • 标签: 乳腺癌细胞 相关基因表达 细胞富集 干细胞 Β-CATENIN REAL-TIME
  • 简介:长链非编码RNA(lncRNA)是不编码蛋白质的新型RNA分子,在表观遗传学、基因转录及转录后水平调控基因表达,并能够与蛋白质、核酸互相作用,参与多种生理和病理过程的调控。研究表明,lncRNA在多种癌细胞异常表达,并在癌症的起始、发展、侵袭及转移等过程中发挥重要功能。乳腺发生、发展和转移等过程受到多基因、多因素的调控,不同lncRNA分子对乳腺的调控功能和作用机制各异。笔者回顾了lncRNA在乳腺中的最新研究进展,对lncRNA参与调控乳腺增殖、转移、耐药以及乳腺干细胞等多个环节分别讨论,并对lncRNA在乳腺早期诊断和靶向治疗等方面的应用前景和面临的挑战进行了展望和分析。

  • 标签: 乳腺肿瘤 细胞增殖 肿瘤转移 抗药性 肿瘤 RNA
  • 简介:乳腺的发病率在世界范围内呈逐年上升趋势,在我国一些大城市和沿海城市,乳腺亦位居女性恶性肿瘤发病率首位。随着早期检测技术及更有效的辅助治疗及靶向治疗的进步,许多国家乳腺的死亡率已明显下降。然而手术、化疗、放疗及生物免疫治疗等传统治疗方法,仍然无法从根本上解决乳腺复发、转移和治疗耐药等问题。造成这一现象的原因之一就是乳腺中存在有干细胞特性的一组亚群,即乳腺干细胞。由于乳腺干细胞对传统治疗抵抗,即使经过有效的治疗,患者仍易出现复发和转移。只有传统治疗联合针对这一特殊亚群的靶向治疗,才有可能根除肿瘤,避免复发,从而改善患者的预后。

  • 标签: 乳腺癌干细胞 靶向治疗 女性恶性肿瘤 生物免疫治疗 癌复发 世界范围
  • 简介:目的了解肿瘤干细胞乳腺发生发展关系的研究现状。方法复习国内外相关文献,综述肿瘤干细胞的特征、肿瘤干细胞乳腺组织发生的相互关系及可能存在的信号分子机制和内分泌调控特征。结果肿瘤干细胞乳腺的发生、发展、转移及耐药之间存在很强的相关性。结论肿瘤干细胞理论可解释乳腺的很多生物学行为,为临床诊断、治疗开辟了新的途径,但仍有许多问题尚待解决,有很长的路要走。

  • 标签: 干细胞 肿瘤干细胞 乳腺癌
  • 简介:摘要目的通过构建间充质干细胞(MSC)与乳腺细胞间相互作用的共培养模型,探讨MSC对乳腺细胞生长的影响。方法用含荧光基因第三代自身失活慢病毒载体感染人类脐带分离提取的MSC和乳腺细胞MDA-MB-231、MCF-7,以单独培养的乳腺细胞MDA-MB-231和MCF-7分别设立对照,2种乳腺细胞分别与MSC共培养,检测乳腺细胞在MSC作用下增生能力的改变,流式细胞术检测共培养后细胞表面标记物表达。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,多重比较采用Dunnet-t检验。结果MSC在与乳腺细胞共培养过程中促进肿瘤细胞生长,第3天共培养组乳腺MDA-MB-231细胞数高于单独MDA-MB-231培养组[(5.50±0.71)×103个比(1.63±0.41)×103个],培养至第7天,两组间MDA-MB-231细胞数差异进一步增大[(81.25±7.40)×103个比(26.25±4.15)× 103个],差异具有统计学意义(P均< 0.001);共培养后MSC促进乳腺细胞表达干细胞特有标记物CD90,MCF-7从共培养第2天CD90表达率(1.38±0.30)﹪升高至第9天(92.45±2.04)﹪。在共培养中MSC围绕肿瘤细胞集落方式生长,在形态上变长,并发现一种新型混合细胞(hybrid融合细胞)同时表达绿色和红色荧光,且对化疗药物更敏感。结论MSC促进乳腺细胞的生长,伴随MSC形态学改变和hybrid融合细胞出现,乳腺细胞获得MSC特有CD90表达。

  • 标签: 间充质干细胞 乳腺癌 CD90 共培养 细胞周期
  • 简介:盐霉素是一种从白色链丝菌培养物中分离提取的聚醚类离子载体型抗生素,它广泛应用于畜禽类动物鸡球虫病的防治,并且还能作为饲料添加剂以促进畜禽的生长。最近新发现盐霉素具有特异性抑制肿瘤干细胞的作用。目前盐霉素钠的价格只是盐霉素的十分之一,但两者在抑制肿瘤细胞和肿瘤干细胞方面的异同却未见文献报导。本研究以人乳腺细胞MCF-7及其干细胞为模型,通过SRB实验对盐霉素及其钠盐的细胞毒性进行了评价和比较。首先,通过流式细胞仪从MCF-7细胞中分选得到了SP细胞;然后用乳腺干细胞表面特异性标志物CD44~+/CD24~-对SP细胞进行了鉴定;最后,分别测定了盐霉素和盐霉素钠对分选得到的肿瘤干细胞和肿瘤细胞的体外生长抑制率。结果表明,与乳腺细胞相比较,盐霉素和盐霉素钠对肿瘤干细胞均表现出了更强的抑制作用,在同样的给药浓度下,盐霉素和盐霉素钠对肿瘤细胞和肿瘤干细胞的抑制作用未表现出明显的差异。本研究结果提示,在抑制肿瘤干细胞的相关研究中,可以用盐霉素钠替代盐霉素而不会影响抑制效果。

  • 标签: 盐霉素 盐霉素钠 肿瘤干细胞 人乳腺癌细胞MCF-7
  • 简介:目的:检测乳腺患者外周血单核细胞(PBMC)中循环肿瘤细胞(CTC)和具有癌干细胞(CSC)标志的CTC(CSC-CTC),探讨患者外周血微转移与CSC的相关性。方法:患者和健康者PBMC与磁珠偶联上皮细胞黏附分子单抗孵育后,用磁性分离法富集PBMC中的上皮细胞。以CK+为患者PBMC中CTC标志,用流式细胞术(FCM)检测健康者和患者的PBMC中CK+细胞及CK+/CD44+/CD24-细胞含量,并比较各组间CTC、CSC-CTC含量的差异。结果:用FCM在73.07%的患者中检测到CTC,在19例检测到CTC的患者中18例有CSC-CTC(94.74%),CTC中CSC数量比例平均为19.01%,且患者PBMC中CTC和CSC-CTC比例与临床TNM分期相关。结论:初步建立了患者外周血CSC-CTC的检测方法,结果显示乳腺患者外周血微转移中有CSC-CTC的参与,临床分期越晚的患者CTC和CSC-CTC的数量越多。

  • 标签: 乳腺癌 循环肿瘤细胞 癌干细胞 外周血单核细胞 磁性分离
  • 简介:目的通过克隆柱法提取MCF-7乳腺细胞中的乳腺干细胞,并进行鉴定。方法采用单细胞克隆加低密度干细胞培养基筛选获得呈“球样”生长的乳腺干细胞,行CD44、CD24免疫荧光细胞化学染色及诱导分化实验。结果CD44+CD24^-/Low细胞的比例为12.1%,且在全克隆中富含CD44+CD24^-/Low细胞。在形成的细胞球中富含CD44+CD24^-/Low细胞,并且在诱导分化时可见明显类管腔样结构形成,并表达CK18及CK14。结论克隆柱法是提取细胞系中癌干细胞的简单有效方法。

  • 标签: 乳腺肿瘤 肿瘤干细胞 克隆柱法
  • 简介:摘要目的对癌细胞凋亡指数(AI)、增殖细胞核抗原(PCNA)、P糖蛋白(PgP)几项指标在乳腺患者预后影响的作用进行探讨分析。方法根据2005年至2010年我院的80例乳腺患者石蜡包埋病理标本进行研究分析,对患者的乳腺细胞凋亡指数(AI)及PCNA、PgP相关基因进行分析研究。结果乳腺细胞凋亡的特征为,染色质在细胞核上,颜色棕黄,部分凋亡细胞核会缩小,核膜处于完整状态。此次研究中有7例没有出现凋亡,73例有不同程度凋亡,凋亡率是91.2%。此次研究中共出现了54例凋亡指数介于0到0.21的病例,其中有4例淋巴结转移;还有26例的凋亡指数介于0.25到0.57,其中有三例属于淋巴结转移,患者的增殖细胞核抗原阳性率是78.6%。P糖蛋白阳性表达率为28.7%。结论肿瘤发病和细胞凋亡、增殖有直接联系,PCNA蛋白表达和组织分级以及淋巴结转移关系紧密,PgP在乳腺组织存在表达,该指标和患者生存期有关系,因此可以将AI、PCNA、PgP作为乳腺预后诊断指标。

  • 标签: 乳腺癌 细胞凋亡指数(AI) PCNA P糖蛋白
  • 简介:摘要目的研究芬太尼对乳腺细胞干细胞特性(简称干性)的影响及分子机制。方法2018年1月至2019年10月采用人乳腺细胞系BT549作为体外研究对象,经0.01和0.10 μmol/L芬太尼处理后,通过成球能力实验和克隆形成能力实验检测乳腺细胞干性的变化;采用实时定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测干性相关转录因子性别决定区Y框蛋白2(Sox2)、八聚体结合转录因子4(Oct4)和Nanog mRNA表达水平;利用蛋白免疫印迹实验检测Wnt信号通路关键蛋白Wnt3a、磷酸化糖原合酶激酶-3β(p-GSK-3β)、糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平。下调Wnt3a后,再行蛋白免疫印迹实验和成球能力实验。结果0.01和0.10 μmol/L芬太尼处理的乳腺细胞球体直径、克隆形成率、Sox2 mRNA、Oct4 mRNA、Nanog mRNA、Wnt3a、p-GSK-3β、GSK-3β和β-catenin明显大于空白对照[(131.22 ± 1.06)和(636.37 ± 0.02) μm比(72.68 ± 0.13) μm、(41.33 ± 0.03)%和(60.58 ± 1.08)%比(20.93 ± 0.15)%、2.25 ± 0.20和3.82 ± 0.84比1.00、1.87 ± 1.06和3.35 ± 0.04比1.00、2.85 ± 0.03和4.36 ± 0.50比1.00、1.82 ± 0.03和2.57 ± 0.42比1.00、2.04 ± 0.13和2.81 ± 0.05比1.00、1.62 ± 0.17和2.93 ± 0.06比1.00、2.15 ± 0.02和3.54 ± 0.21比1.00],0.10 μmol/L芬太尼处理的乳腺细胞各指标明显大于0.01 μmol/L芬太尼处理的乳腺细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。干扰Wnt3a后,p-GSK-3β、GSK-3β、β-catenin、Sox2、Oct4和球体直径的表达明显低于空白对照[0.12 ± 0.05比1.00、0.53 ± 0.06比1.00和0.24 ± 0.21比1.00、0.28 ± 0.10比1.00和0.06 ± 0.01比1.00、(18.14 ± 0.30)μm比(74.32 ± 0.12)μm],差异有统计学意义(P<0.01)。结论芬太尼通过激活Wnt3a/β-catenin信号通路促进乳腺细胞干性。

  • 标签: 乳腺肿瘤 芬太尼 肿瘤干细胞 Wnt3a/β-连环蛋白信号通路
  • 简介:摘要目的比较改良后乳腺手术与传统乳腺手术治疗乳腺的临床效果。方法选择我院2016年9月至2017年9月收治的乳腺患者88例,随机分为观察组和对照组两组,每组44例,对照组采用传统根治术,观察组采用改良根治术治疗,比较两组临床治疗效果。结果观察组手术时间、术中出血量及住院时间均显著少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组复发率及病死率显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组病灶转移率比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组美容优良率88.64%,显著优于对照组的72.72%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论传统根治手术与改良根治手术均不会出现较高复发率以病灶转移情况,改良根治手术的治疗效果及美容效果均显著优于传统根治术,值得临床大力推广。

  • 标签: 乳腺癌 改良根治术 临床效果
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  • 简介:摘要美国癌症联合会(AmemicanJointCommissionforCancerStaging,AJCC)于2003年1月采用了新版的《癌症分期手册》。其中的乳腺TNM分期系统较以前版本有很大改动和补充。新版分期系统融人了更多的影像学和病理学新技术(如前哨淋巴结活检和淋巴结的免疫组织化学检查)。在乳腺的分期组合中还把腋窝淋巴结受累数量作为一个分期因素。

  • 标签: 乳腺癌 分期辨治 临床经验 医案