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38 个结果
  • 简介:目的建立克罗诺杆菌的特异、灵敏的TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR检测方法。方法根据GenBank公布的克罗诺杆菌MMS基因高保守序列,设计特异引物和TaqMan—MGB探针,建立和优化反应体系,用25种其他常见致病菌评价反应体系的特异性,用克罗诺杆菌MMS基因重组质粒构建实时荧光定量PCR标准曲线,对重组质粒、纯菌和人工模拟污染样本进行灵敏度试验,并与FDA推荐的TaqMan探针实时荧光PCR比较,配对t检验分析两种方法对Ct值和荧光强度的差异。结果采用TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR检测克罗诺杆菌MMS基因仅需40min,与25种非目标菌无交叉反应,仅对克罗诺杆菌有特异性扩增;所构建方法线性关系良好,相关系数r2=0.999,扩增效率为99.972%,对重组质粒、纯菌、人工模拟污染样品标本的灵敏度分别达10拷贝/反应、3.8和38cfu/ml;与FDA推荐的TaqMan探针实时荧光PCR相比,TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR的Q值更小、△Rn值更高,灵敏度和分辨率差异均有统计学意义(Ct:t=-14.406,P〈0.01;△Rn:t:14.230,P〈0.01)。结论本研究建立的TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR反应体系能够快速、特异、灵敏地检测克罗诺杆菌MMS基因,可用于婴幼儿奶粉中克罗诺杆菌的快速筛查和鉴定,具有较大的的应用价值和推广价值。

  • 标签: 克罗诺杆菌(原阪崎肠杆菌) 实时荧光定量PCR TaqMan—MGB探针 局部大分子合成操作子 MMS基因 食源性致病菌
  • 简介:根据转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9外源基因的旁侧序列,采用ABIPrimerExpress3.0设计引物和TaqMan探针,建立转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9品系特异实时荧光定量PCR检测方法。采用该检测方法对DAS-40278-9玉米含量为1%(质量分数)的标准样品进行检测,结果显示,采用建立的方法获得的标准曲线,通过斜率、相关系数、扩增效率判断是可靠的,待测样品的定量检测结果为1.024%,非常接近真实值。本试验表明建立的转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9品系特异定量PCR检测方法的特异性好,灵敏度和准确度高,值得推广应用。

  • 标签: DAS-40278-9 z SSIIb 旁侧序列 定量PCR 检测
  • 简介:采用含有亚抑菌浓度(1/2×MIC)山梨酸钾的LB琼脂平板连续传代的方法,对大肠杆菌(Escherichiacoli)进行诱导,获得具有一定耐受性的大肠杆菌菌株;通过定量竞争性RT—PCR检测诱导后的各个菌株与未经诱导的各个菌株的acrA—mRNA的表达水平。结果表明,各个菌株经过含有亚抑菌浓度山梨酸钾的LB琼脂连续培养10代后获得的诱导菌株,与普通LB琼脂平板连续培养10代后获得的菌株相比可以耐受更高浓度的山梨酸钾,并且acrA-mRNA表达水平在诱导后的各个菌株中比未经诱导的各个菌株均有一定程度的提高。说明大肠杆菌主动外排系统AcrAB-TolC中acrA基因的表达水平提高可能与大肠杆菌对山梨酸钾的耐受程度增加有一定相关性。

  • 标签: 定量竞争性RT—PCR 亚抑菌浓度 山梨酸钾 耐受性 acrA—mRNA
  • 简介:生产中定量纸的纸机目前国内数量最多,使用最普遍,因此对其进行计算机自动控制也最有意义,本文介绍了中定量纸纸机计算机控制系统的设计思想,建模方法、控制策略、软件结构、仪表与计算机配置等方面内容。

  • 标签: 纸机 定量 水份 使用 计算机控制 设计思想
  • 简介:利用分子生物学中的聚合链式反应(PCR)方法对毛皮中的貂基因成分进行鉴定检测研究。研究设计了貂线粒体基因特异性引物和探针,优化了PCR反应体系和条件,采用了普通PCR实时荧光PCR(RT-PCR)两种PCR检测方法进行比较。结果表明,设计的引物和探针在9份貂肉样品中通用性好,在兔、狐狸和貉子等10种其他物质中特异性良好,在于貂毛皮的PCR鉴定检出率为100%。但是在实时荧光PCR检测方法对样品的前处理要求比较高,检出率低于普通PCR检测方法,只有不到66.7%,对于市场上的貂毛皮鉴定检测,还是普通PCR方法比较好。

  • 标签: 毛皮 DNA PCR 检测
  • 简介:1概述现桶啤灌装普遍采用两种灌装方式,即上灌装和下灌装。上灌装是将啤酒桶一直灌满为止,由于啤酒桶有大小误差,每桶约多灌0.7公斤左右;下灌装是将啤酒一直灌到满过酒矛管,酒矛管的长短直接影响灌装量,在清洗和运输中,酒矛管松动和装错现象时有发生,导致啤酒计量出现误差。为解决这一矛盾,本公司决定改造传统的灌装方式,通过调研,选用进口啤酒专用流量计,与西门

  • 标签: 啤酒 桶啤定量灌装系统 改造 专用流量计 系统设置
  • 简介:造纸过程中,由于纸机种类及生产纸种不同,控制对象的结构和参数也各异。本文给出一种纸机定量水分通用模型的表示方法,并着重说明在该通用模型的基础上,通过最忧解耦,控制模型拟合,控制参数选取等通用步骤,获得纸机定量水分的通用控制算法,使系统稳定并具有良好的动态性能。

  • 标签: 纸机 造纸过程 定量 纸种 水分 控制参数
  • 简介:在造纸过程中,纸幅的定量横向分布是衡量纸张质量的一个极重要的指标。本文介绍了定量横向分布自动控制的意义和国内外现状,定量横向分布控制的原理,控制系统的软硬件结构以及该系统今后的发展趋势。

  • 标签: 造纸过程 纸幅 纸张质量 定量 衡量 国内外
  • 简介:为建立食品中副溶血性弧菌(VP)的PCR检测方法,选取tl基因作为靶序列设计一对引物,用该引物对14株从国内食品中分离的副溶血性弧菌(经传统方法验证)和30株非副溶血性弧菌进行PCR扩增,并用此方法对人工污染食品进行检测.扩增片段表现出极好的特异性,对人工污染的冷冻虾仁、沙丁鱼的检出限为10CFU/g,且与传统方法结果吻合.该方法适宜于食品中副溶血性孤菌的检测.

  • 标签: 食品 副溶血性弧菌 PCR技术 检测方法 分子生物学
  • 简介:基于DSP的纸张缺陷检测系统,分别对该系统的硬件和软件部分进行介绍。硬件部分采用高性能的DSP芯片作为图像处理的核心部分,为缺陷检测的实时性提供了保证;软件部分采用支持向量机算法,克服了传统方法的大样本要求和维数灾难及局部极小问题,又把非线性空间的问题转换到线性空间,降低了算法的复杂度,提高了计算速度。通过将支持向量机识别算法嵌入到高性能DSP芯片中,很好地实现了纸张缺陷的实时检测。

  • 标签: 纸张缺陷 DSP 分类 支持向量机
  • 简介:基于定量的横向耦合关系和纵向模型,建立了其横向分布的动态模型,设计了基于该模型的多变量广义预测控制器(GPC),根据模型结构特征将控制算法进行分解,得到相应的GPC并行算法,并绐出其多处理机系坑实现结构。计算机仿真结果表明,本文提出的建模与并行控制方法较好地改善了系统的的静、动态性能。

  • 标签: 并行算法 并行控制 多处理机 GPC 广义预测控制 控制算法
  • 简介:针对纸张横向定量控制中的测量数据去噪,在对横向定量测量数据特性进行分析的基础上,提出了一种改进阈值小波去噪方法,并进行了仿真对比分析。结果表明,相对于传统去噪方法,该方法具有较好的去噪效果,去噪后的波形更为平滑,更接近于原始横向定量数据,有利于进一步实施控制。

  • 标签: 横向定量 小波 阈值 去噪
  • 简介:单核细胞增生李斯特氏菌能引起人畜共患疾病,是食品卫生上的重要病原菌。应用常规方法检验耗时费力,程序复杂。采用聚合酶链反应(PCR)法检测,4h内可完成检测过程,大大缩短了检测时间。PCR检测方法的技术关键是引物设计和引物的特异性确定,研究中,采用了扩增单增李斯特氏菌毒力相磁编码基因的5对引物,并对这些引物进行了特异性研究。结果inlA引物、inlB引物、picA引物可以很好地用于单增李斯特氏菌的检测中。加

  • 标签: 引物 单核细胞增生李斯特氏菌 单增李斯特氏菌 特异性研究 编码基因 PCR检测方法
  • 简介:为了建立能同时检测多种转基因成分的二重PCR检测方法,以转基因大豆(RoundupReady品种)为实验材料,优化了二重PCR的反应体系和反应奈件,包括引物浓度、TaqDNA酶用量和退火温度等;比较了二重PCR和单一PCR的灵敏度和检测含量。结果表明:二重PCR的灵敏度和检测含量与单一PCR的相当:用建立的二重PCR方法从大豆、豆腐、豆粕和油炸豆腐中筛选出合转基因成分的阳性样品:二重PCR与单一PCR相比,具有节约试剂、省时等特点,在转基因产品检测上具有很好的推广价值。

  • 标签: 大豆 转基因成分 二重PCR
  • 简介:目的建立转基因大豆的PCR-免疫层析(PCR—ICT)快速筛查新技术。方法利用转基因植物通常含有的CaMV35S启动子作为转基因成分的筛查标记,根据其序列设计特异性引物和探针,分剐用生物素和地高辛标记,用胶体金免疫层析技术检测并鉴定PCR产物。结果用新建立的PCR—ICT方法可以检出含0.5%转基因大豆的标准品,对大豆样品的检测结果与琼脂糖凝胶电泳检测结果一致。结论PCR—ICT方法通过DNA杂交和金标显色来同时检测、鉴定PCR产物,可以简便、快速地筛查转基因产品。

  • 标签: 黄豆 植物 基因修饰 启动区(遗传学) 聚合酶链反应 免疫测定
  • 简介:通过传统玻片凝集试验对78株沙门氏菌进行血清型检测,结果将这些沙门氏菌分成以鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌为主的21种血清型,其中沙门氏菌SJTUF10023证实为自凝菌,无法鉴定血清型.利用MLST可以较精确地预测、区分不同血清型菌株,聚类的各个分支与血清型基本呈对应关系(96.2%,75/78),其中有3株沙门氏菌(1株阿贡纳、1株阿伯丁和1株斯坦利)聚类结果与血清型不一致.根据O抗原(rfb基因簇)、H1抗原(fliC基因)和H2抗原(fljB基因)分别设计引物进行PCR反应,并与测序相结合,对78株沙门氏菌进行血清型测定,结果仅l株伤寒沙门氏菌的H2抗原出现假阳性结果,准确度达98.7%(77/78),且编号为SJTUF10023的自凝菌被鉴定为鼠伤寒沙门氏菌,说明该方法能够准确、快速检测沙门氏菌血清型,有望在沙门氏菌血清型鉴定中成为替代传统血清分型的方法.

  • 标签: 沙门氏菌 血清型 PCR检测
  • 简介:<正>近日,泰格林纸集团岳阳纸业股份公司开发并生产出低定量铜版纸。低定量铜版纸是2008年湖南省技术创新项目之一,该项目于2008年10月份成立通过了湖南省新产品专家组鉴定。该产品最大的特点是使用了高比例的废纸脱墨浆,大幅度降低了新浆料

  • 标签: 岳阳纸业 废纸脱墨浆 泰格林纸 技术创新项目 中性施胶 涂布
  • 简介:目的建立一种空肠弯曲菌定量检测方法,为食品安全风险评估提供准确的数据支持。方法参照ISO/TS10272—3和GB/T4789.9—2008,基于MPN原理建立空肠弯曲菌定量检测方法,对定量加标的生鸡肉和鸡粪样品进行不同增菌培养基、不同培养环境和不同培养方式优化比对研究,用加标回收试验对建立的方法进行验证。结果增菌培养基的优化选择:Preston肉汤对加标菌量10cfu/g的生鸡肉和鸡粪样品进行空肠弯曲菌检测的平均值分别为12.26和10.96MPN/g,Bolton肉汤检测的平均值分别为2.38和2.32MPN/g,二者比较差异有统计学意义(P〈0.05);微需氧环境的优化选择:用三气培养箱法、产气袋法、抽气换气法和烛缸法对加标生鸡肉和鸡粪中的空肠弯曲菌检测的平均值分别为12.26和12.12MPN/g、12.26和10.96MPN/g、12.26和12.86MPN/g、10.82和12.12MPN/g,和三气培养箱法两两相比差异无统计学意义(P〉0.05);培养方式:静止培养法对加标生鸡肉和鸡粪空肠弯曲菌的检测值分别为15.8和15.2MPN/g,振荡培养法检测值分别为11.36和8.72MPN/g,二者比较差异有统计学意义(P〈0.05);用该法对低、中、高浓度加标生鸡肉样品的回收率分别为115.25%、111.5%和95.0%。结论此方法可以对高污染样品中空肠弯曲菌进行准确定量,特异度高,值得推广应用。

  • 标签: 空肠弯曲菌 食源性致病菌 定量检测 食品安全 风险监测