简介:目的研究体外谱系选择法诱导胚胎干细胞(ES)神经分化的特点,建立ES细胞体外神经分化的模型。方法通过悬滴和悬浮培养、Nestin阳性筛选培养、神经样细胞增殖培养以及神经细胞分化培养的方法,建立体外诱导未分化的ES细胞分化为多巴胺能神经元模型;观察各神经分化及各阶段的ES细胞形态,并通过RT-PCR以及荧光免疫化学方法检测各分化阶段ES细胞神经特异表达基因和蛋白的表达特点;通过高效液相检测各阶段分化细胞分泌神经递质多巴胺的能力。结果随着分化培养阶段的延长,分化的ES细胞中可见大量神经样细胞出现,分化末期可见清晰的神经元结构(包括突触);分化早期,仅有部分神经细胞特异基因和蛋白表达,且表达水平低,随着培养阶段延长,特异基因和蛋白均表达,且表达水平明显增加;神经递质多巴胺的水平在未分化和分化早期细胞中未检出,分化的中后期可检测出并呈现随分化时间延长而增加的趋势。结论建立的体外谱系选择培养方法可诱导ES细胞分化获得具有多巴胺能神经元特性的细胞,可为神经发育毒性研究提供模型。
简介:将甲基丙烯酸六氟丁酯、甲基丙烯酸十二氟庚酯分别和乙二醇胺进行Michael加成反应,合成氟碳链长度不同的有机氟二元醇,用其做扩链剂合成有机氟改性水性聚氨酯(WPU)。对含氟二元醇进行了表征分析,并研究了其氟碳链长度和用量对WPU乳液性能和膜性能的影响。结果表明,合成的含氟二元醇收率和含量分别达到96.8%和98.9%以上。当扩链接采用50%或100%的有机氟二元醇时,均可得到稳定的WPU乳液。提高氟碳链长度或增加其扩链剂用量,WPU乳液的平均粒径增大,膜的拉伸强度、热稳定性能、耐水性能和表面疏水性能等得到了提高,但膜的断裂伸长率降低。和未改性的WPU相比,用甲基丙烯酸十二氟庚酯合成的二元醇扩链所得WPU膜的拉伸强度从10.1MPa提高到14.5MPa,吸水率从18.0%降低至6.5%,表面水接触角从71.4°提高到93.9°。