简介：为最大程度地控制我国食源性疾病的发生,"食源性疾病监控技术的研究"于2001年被列入"十五"国家科技攻关计划."食源性疾病监控技术的研究"项目建立了全国食源性疾病监测网络,分析了1992年至2001年的食源性疾病暴发资料,对2002年部分个案进行了监测与分析.在常见食物病原菌DNA指纹图谱技术的研究,PCR快速检测技术的研究方面取得了满意的结果.建立了鸡蛋中沙门氏菌危险性评估模型,对牡蛎中副溶血性弧菌进行了定量监测与危险性评估.建立了国家食源性疾病监测数据库及信息系统.该研究将有效地提高我国食品卫生监督检测系统对食物中毒致病菌的快速检测和鉴定水平,为全国的系统监测提供技术支撑,为缩小我国食源性疾病监控技术与发达国家的差距,科学地监控食源性疾病迈出了重要的一步,为政府及国际食品法典提供了有价值的政策依据.

简介：目的建立克罗诺杆菌的特异、灵敏的TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR检测方法。方法根据GenBank公布的克罗诺杆菌MMS基因高保守序列，设计特异引物和TaqMan—MGB探针，建立和优化反应体系，用25种其他常见致病菌评价反应体系的特异性，用克罗诺杆菌MMS基因重组质粒构建实时荧光定量PCR标准曲线，对重组质粒、纯菌和人工模拟污染样本进行灵敏度试验，并与FDA推荐的TaqMan探针实时荧光PCR比较，配对t检验分析两种方法对Ct值和荧光强度的差异。结果采用TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR检测克罗诺杆菌MMS基因仅需40min，与25种非目标菌无交叉反应，仅对克罗诺杆菌有特异性扩增；所构建方法线性关系良好，相关系数r2=0．999，扩增效率为99．972％，对重组质粒、纯菌、人工模拟污染样品标本的灵敏度分别达10拷贝／反应、3．8和38cfu／ml；与FDA推荐的TaqMan探针实时荧光PCR相比，TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR的Q值更小、△Rn值更高，灵敏度和分辨率差异均有统计学意义（Ct：t=-14．406，P〈0．01；△Rn：t：14．230，P〈0．01）。结论本研究建立的TaqMan—MGB探针实时荧光定量PCR反应体系能够快速、特异、灵敏地检测克罗诺杆菌MMS基因，可用于婴幼儿奶粉中克罗诺杆菌的快速筛查和鉴定，具有较大的的应用价值和推广价值。

简介：目的建立不同水源中GⅡ型诺如病毒(NoVGⅡ)实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法,对某市疾病预防控制中心送检的10份疑似引起诺如病毒中毒的水样进行NoVGⅡ检测。方法以瓶装水、河水和生活污水为研究对象,采用硝酸纤维素膜-聚乙二醇(PEG)沉淀法富集病毒,对取样体积、病毒洗脱条件、PEG终浓度及PEG沉淀条件等进行了优化,提取病毒RNA、建立实时荧光RT-PCR检测方法;通过外加MS2计算方法的回收率,评价所建方法对水样中诺如病毒的回收效果。结果建立的方法对瓶装水、河水和生活污水中NoVGⅡ的平均回收率分别为(60.1±8.0)%、(22.0±6.5)%和(35.7±8.1)%,10份送检水样中3份检出NoVGⅡ。结论建立的实时荧光RT-PCR方法适用于瓶装水、河水和生活污水中NoVGⅡ的检测,饮用水被NoVGⅡ是引发某市人员中毒的原因之一。