简介:研究长牡蛎肉小肽营养液制备的工艺条件。先以水解度为指标,确定长牡蛎肉中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶单酶的最适水解条件,通过正交试验确定各单酶水解的最佳工艺条件:然后以此为基础进行三酶复合试验,根据水解度确定最佳工艺条件,制备长牡蛎肉水解液:最后以该水解液为原料,通过正交试验确定最佳配方,按最佳配方制备小肽营养液。在最佳工艺条件下,长牡蛎肉三酶复合水解度达52.97%.经聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳测定,小肽峰值相对分子质量范围在300~1000之间;17种游离氨基酸含量500.16mg/100mL:小肽营养液最佳配方:水解液(mL):蔗糖(g):柠檬酸(g):氯化钠(g)为100:10:0.2:0.2,游离氨基酸总量≥5000mg/L。本小肽营养液营养丰富,制备工艺较简单,可应用于长牡蛎肉的高值化开发。
简介:以分离筛选、鉴定的假单胞菌为研究材料,提取假单胞菌的基因组为模板基因.设计引物进行PCR扩增。扩增的条件为94℃预变性4min,98℃变性10S,58℃退火1min,72℃延伸2min,35个循环,72℃复性10min。用试剂盒回收PCR产物,以PGEM—TEasyVector为载体。产生重组质粒,转化到大肠杆菌(E’coli)JM109细胞中,于LB平板上进行蓝白筛选阳性克隆。提取阳性克隆的质粒,电泳筛选滞后质粒,EcoRⅠ酶切验证后进行测序,检测弹性蛋白酶基因在JM109Ecoli细胞中的表达。结果表明:PCR扩增出1,67kh的基因片段。并成功克隆在EcoliJM109细胞中:挑取白斑提取的质粒,检测有滞后质粒,EcoRⅠ酶切检测到3.0kh的载体和1,67kb的基因片段;以滞后质粒为模板再次进行PCR扩增,扩增出1.67kb基因片段。证明该质粒为重组质粒,经上海博亚生物技术公司测序为1.67kh的基因片段。并在EcoliJM109细胞中表达。