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  • 简介:毒素免疫学研究动物中毒性疾病发生机理、诊断防治,一个全新交叉性研究领域.就相思子毒素免疫免疫学基础、相思子毒素免疫检测方法、免疫保护作用、相思子毒素免疫临床研究应用进行了综述,为进一步研究抗毒素免疫学提供理论资料。

  • 标签: 抗毒素免疫学 相思子毒素 免疫毒素
  • 简介:芋螺毒素不仅具有很高靶位选择性组织专一性,而且具有分子小、活性高、易合成特点。作为理想神经药理学工具在离子通道受体研究中正越来越受青睐,广泛开展芋螺毒素调查研究意义重大。研究了菖蒲芋螺毒液,首次在食虫性芋螺中发现了对哺乳动物小鼠致死芋螺毒素,LD50=0.3μg/g,对其中几个毒素进行了结构鉴定。

  • 标签: 芋螺毒素 菖蒲 靶位 神经药理学 首次 受体
  • 简介:对我国云南昆明相思子进行了分离纯化特性研究,相思子经稀酸浸泡,抽提,硫酸铵分级沉淀,酸化Sepharose4B亲和层析,DEAE-SepharoseFF阴离子交换层析,分离到两种毒素成分P1、P2一种凝集素P3。通过SDS-PAGE测定分子量P1、P2,分别为68Kd、62Kd,P3为129Kd;亚基分子量P1为36Kd、33Kd、31Kd,P2为35Kd、29Kd,P3为39Kd、37Kd、31Kd;P1、P2、P3等电点分别为6.9、6.2-6.3、5.3;中性糖含量分别为9.4%、3.3%、10.5%;凝集兔红细胞最小凝集浓度分别为19.0μg/ml、2.5μg/ml、0.3μg/ml;对小鼠腹腔注射LD50分别为25.8μg/ml、2.4μg/ml、1.2mg/kg。

  • 标签: 相思子 毒素 凝集素 分离 纯化
  • 简介:瑞士联邦国防部民防体育运动部发布了有关葡萄球菌肠毒素B(StaphylococcalEnterotoxinB,SEB)说明书。SEB金黄色葡萄球菌(图1)所产生一种外毒素。这些细菌尺寸一般在0.8~1.2μm,是非运动性、革兰氏阳性、不具有形成内生芽孢能力,属于兼性厌氧。

  • 标签: 葡萄球菌肠毒素B 金黄色葡萄球菌 体育运动 瑞士联邦 兼性厌氧 国防部
  • 简介:κ-银环蛇毒素(κ-bungarotoxin,κ-BGT)一种突触后神经毒素,由66个氨基酸残基组成,其结构中含有5个保守二硫键,能选择性识别α,β2亚型神经元烟碱乙酰胆碱受体,α—BGT有很高同源性。在原核细胞真核细胞克隆表达κ-BGT均具有一定生物活性。

  • 标签: κ—银环蛇毒素 研究进展 基因克隆 毒素 生物武器 化学武器
  • 简介:选择合适相思子毒素受体结合条件,对相思子毒素多种动物红细胞受体结合活性进行了研究,获得了不同种动物红细胞受体特征参数,并分析了相思子毒素P1、P2,凝集素P3以及蓖麻毒素对^125I-Abrin结合红细胞竞争抑制作用,4种毒素表现出不同抑制活性。

  • 标签: 相思子毒素 核糖体失活蛋白 受体 红细胞 生物活性 蛋白质
  • 简介:为制备β-BGTA1链重组蛋白并进一步开展β-BGT生物活性研究,在大肠杆菌克隆了D—BGTA1链基因,从银环蛇毒腺中提取总RNA,经反转录PCR获得银环蛇毒素cDNA.根据β-BGTA链基因保守序列设计引物,以银环蛇毒素cDNA为模板进行PCR扩增,将PCR产物连接到克隆载体pUCm-T,转入层coilTop10感受态细胞,经蓝白斑筛选,PCR鉴定为阳性克隆后测序.测序证明获得了β-BGTA1链基因.测序获得D—BGTA1链基因序列文献报道D—BGTA1基因序列一致.

  • 标签: PCR 蓝白斑筛选 阳性克隆 大肠杆菌 β-银环蛇毒素 A1链重组蛋白
  • 简介:κ-银环蛇毒素(κ-bungarotoxin,κ-BGT)属于突触后神经毒素,能选择性识别α3β2亚型神经元烟碱乙酰胆碱受体,可作为药理学研究工具药。由于κ—BGT分离提取比较困难,难于从自然界中大量获取,无法满足各项研究需要,所以本文探讨在大肠杆菌毕赤酵母表达体系中表达κ—BGT及其在实验室规模生产可行性。

  • 标签: 表达 银环蛇毒素 乙酰胆碱受体 药理学研究 亚型 基因
  • 简介:应用建立氨基酸结构描述符c-scalesG/PLS统计方法,对ω-芋螺毒素N-型P/Q-型钙离子通道拮抗剂进行了定量构效关系研究,两种亚型QSAR模型交叉验证相关系数XV-r^2相关系数,都在0.96以上,表明模型均有较好预测能力拟合能力。通过对模型权重系数图分析,直观了解两种亚型ω-芋螺毒素类似物结构对生物活性影响,为进一步设计高活性多肽类似物提供一定理论依据。

  • 标签: 亚型 ω-芋螺毒素 钙离子通道拮抗剂 多肽类 类似物 定量构效关系
  • 简介:利用InsightⅡ软件包Homology模块,通过同源建模方法在SGI02图形工作站上依据白喉毒素晶体结构,在其催化区活性部位截取了S^146-Q^155,S^19-N^45,N^45-S^55T^56-N^714个片段,每个片段只舍有1个α-螺旋。以此构象为结构基础,利用量子化学半经验AM1方法,分别对4个片段进行了量子化学计算,得到了重要电子结构信息,为突变研究提供了理论依据。研究结果表明,在受体相互作用时,能够提供电子主要氨基酸D^29,D^49,D^68,E^154,D^47,E^70,E^148;能够接受电子主要氨基酸K^39,F^53,K^59,Y^54,Y^149,K^3,K^24,W^153;能够同受体进行疏水作用主要氨基酸Y^20,H^21,Y^27,I^31,I^35,Y^46,W^50,Y^54,Y^60,Y^65,I^150,W^153,上述氨基酸都可能对活性产生重要影响。

  • 标签: 白喉毒素 受体 氨基酸 活性部位 突变研究 研究结果
  • 简介:ω-芋螺毒素由24到29个氨基酸残基组成多肽类似物,对不同亚型电压敏感钙离子通道有很好选择性,它们在生物化学、药理学、药物化学军事化学等方面都有着广泛地应用前景。近年来,以各种理论计算方法分子模拟技术为基础计算机辅助分子设计,在先导化合物研究开发得到了有效地应用。本文主要应用计算机辅助分子设计技术,采用定量构效关系虚拟组合化学技术,对ω-芋螺毒素进行构效关系分子设计研究。

  • 标签: ω-芋螺毒素 构效关系 多肽类 亚型 药物化学 药理学
  • 简介:芋螺生长于热带海域软体动物,全球约有500多种,主要分布于印度洋太平洋海域。我国近海芋螺科约有70多种。芋螺毒素芋螺毒液一些小分子多肽类组分,据估计每一种芋螺毒液约含有i00余种不同药理活性组分,且不同种芋螺毒液组成不同,所有自然界生存芋螺,毒液中含有的药理活性组分可达到50000种之多,可谓一个庞大天然多肽库。

  • 标签: 芋螺毒素 毒液 药理活性 肽类 肽库 二硫键
  • 简介:应用DNA重组技术,构建了金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)原核表达载体pET22b(+)-SEB,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。经终浓度为0.4mmol/LIPTG诱导作用,可获得分子量约为29KD表达蛋白。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果表明,重组表达SEB主要以可溶形式存在于细胞周质,表达SEB量约占菌体总蛋白30%左右。重组表达SEB经HiTrap^TMchelatingHP柱纯化能达到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纯。ELISA试验表明纯化重组SEB天然野生型SEB单克隆抗体呈现明显阳性免疫反应。

  • 标签: SEB 重组表达 金黄色葡萄球菌肠毒素B SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 ELISA试验 ET
  • 简介:为满足科研医学应用上需要,用基因工程方法制备海蛇神经毒素。首先人工合成海蛇神经毒素Erabutoxin(Eb)基因,重组到T载体。通过PCR扩增Eb基因,用限制性内切酶把基因片段酶切成黏性末端,然后将目标基因插入表达载体pPET22b(+),电转重组质粒到宿主菌BL21(DE3),在25℃0.5mmol/LIPTG诱导培养8h收获培养物,SDS-PAGE电泳检测目标蛋白大部分存在于包涵体,用8mol/L尿素溶解后,利用C末端His-6Ni^2+离子亲和层析纯化,得到单一电泳蛋白带。

  • 标签: 海蛇神经毒素 DNA克隆 基因表达 包涵体 亲和层析
  • 简介:报道了采用亲和树脂法对相思子毒素蛋白进行反复SELEX筛选,获得与靶物质结合率这32.5%富集文库,并克隆得到了单克隆适配子序列,软件模拟了这些序列二级结构,选择部分序列选择性剪切后利用荧光偏振方法进行检测,对靶蛋白检测限达到亚nmol量。

  • 标签: 适配子 相思子毒素蛋白 SELEX