简介：Objective:Todetectandquantitategenitalherpessimplexvirus(HSV)DNAinspecimensfrom100patientsclinicallydiagnosedwithgenitalherpes.Methods:PolymeraseChainReaction(PCR)andenzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA)wereusedwithastandardcurveofDNAcopiesofHSVasquantitativecontrast.Results:Ninety-threecaseswereconfirmedHSVpositiveand7caseswerefoundtobenegative.Therewere58casesofHSV-2(62.4%)and35casesofHSV-1(37.6%)amongthe93positivecases.ThenumberofDNAplasmidsrangedfrom115to1.1×l0^5per250pLamongthe93positivesamples(mean=7.1×10^4/250μL).ThenumberofHSVDNAplasmidsrangedfrom136to1.1×l0^5copiesper250pL(mean=7.6×10^4)amongthosewithHSV-2,and115to9.4×10^4per250pL(mean=6.3×10^4)amongthosewithHSV-1.Meanwhile10μLofextractedanddissolvedDNArandomlytakenfrom8eachofHSV-2andHSV-1samplesweretested.ThenumberofHSV-2DNAplasmidsrangedfrom35copiesto2.7×10^4(Mean=l.8×10^4)andthenumberofHSV-1DNArangedfrom29to2.5×10^4(Mean=1.6×10^4).Inthe7negativecases,thequantityofHSVplasmidswaszero.Conclusion:ThesensitivityofELISAquantitation(93%)isequaltothatofSouthernblot.ThesensitivityofPCRfordiagnosisis91%,and88%forPCRtyping.

简介：目的探讨端粒酶RNA（hTR）和反转录酶（hTERT）在银屑病皮损中的表达情况以及它们与角质形成细胞增殖关系。方法应用原位杂交方法检测银屑病皮损hTR、hTERTmRNA的表达，应用免疫组织化学方法检测Kj-67抗原表达，并对hTR、hTERTmRNA的表达与Ki-67抗原表达进行相关性分析。结果hTR表达在基底细胞、棘细胞、颗粒层细胞和所有有核细胞的胞浆，与细胞的增殖情况无关；其表达强度和阳性细胞百分率各组之间无明显差异（P〉0．05）。而hTERT的表达与细胞增殖状态有关，主要表达在基底细胞层和棘细胞层下方，表达强度和阳性细胞百分率要明显高于正常皮肤（P〈0．05）。Ki-67抗原主要表达在细胞生发层和分裂旺盛的组织；它的表达与hTERT的表达呈正相关（r=0．674，P〈0．01）；而与hTR（r=-0．295，P〉0．05）无关。结论hTERTmRNA在银屑病皮损中的表达明显升高，与细胞增殖活性有关。hTR的表达和细胞增殖活性无关。

简介：目的：筛选出对孢子丝菌结合效率相对较高的探针。方法以50株纯培养的孢子丝菌及标准株为样本，以毛霉、烟曲霉、念珠菌各1株为阴性对照，用聚合酶链反应-酶联免疫法（PCR-ELISA）对已报道的5个孢子丝菌特异性探针（U26852、U26866、U26866′、M85053及AF117945）进行筛选。记录各探针与合成DNA片段杂交底物显色与否及酶免疫测定指数（EI）值。结果PCR产物测序证实5个探针均位于产物序列上；在相同的ELISA条件下，探针U26852显色最强，EI值最高。结论针对28SrRNA的探针U26852是目前与孢子丝菌结合效率相对较高的探针。

简介：Objective:ToexploretherelationshipbetweenquantitativeTreponemapallidumDNA(TP-DNA)PCRtestingandtheToludineRedUnheatedSerumTest(TRUST)inpatientswithsyphilisbeforeandaftertreatment,andevaluatetheclinicalvalueofquantitativeTP-DNAtestinginthediagnosisandtreatmentevaluationofsyphilis.Methods:29patientswithprimary(12cases)orsecondary(17cases)syphilis,whometthecriteriasetforthisstudywererecruitedassubjects.Allpatientsweretreatedwith2.4millionunitsbenzathinepenicillinIMweeklyfor3weeks.QuantitativetestsofTP-DNAinthepatients'plasmawereperformedusingFQ-PCRbeforeandafterthetreatment.SerologictestsincludingTRUSTandTPPAwerealsoperformed.Results:Beforethetreatment,9outof12primarysyphilispatients(75%)andallsecondarysyphilispatients(17/17)testedpositiveforTreponemapallidum(TP)byTP-DNAtesting.TheaveragequantitativetestvaluesofTP-DNAinprimaryandsecondarysyphilispatientswere(3.38±2.34)×10^4and(5.73±1.33)×10^6copies/ml,respectively.Afterthreemonthsoftreatment,1ofthe9primaryand5outof17secondarysyphilispatientswerepositiveuponTP-DNAtesting,respectively.TheaveragequantitiesofTP-DNAwere2.01×10^2copies/mlinprimaryand5.87×10^2copies/mlinsecondarysyphilispatientswithpositiveTRUSTandTP-DNAtests,and3.09×10^2copies/mlforthosewithnegativeTRUST,respectively.Afterninemonthsoftreatment,alltheprimaryandsecondarysyphilispatientswerenegativeuponTP-DNAtesting,whileallprimaryand14of17(82.35%)secondarysyphilispatientsshowednegativeTRUSTresults.Conclusion:ThattheresultsofTP-DNAtestsarenotconsistentwiththoseofTRUSTbeforeandaftertreatmentindicatesthatquantitativeTP-DNAtestingmayhavevaluableclinicalsignificanceintheearlydiagnosisandevaluationoftreatmentregimensforsyphilis.

简介：

简介：Objectives:Todevelopamulti-nestedpolymerasechainreactioninanassaytodetectearlyTreponemapallidumandHaemophilusducreyiDNAintheswabsofgenitalulcers.Methods:Fourpairsofouterandinnerprimers,specifictothebasicmembraneproteingeneofTreponemapallidumandtothe16srRNAgeneofHducreyiweresynthesized.Themulti-nestedPCRwasdevelopedandappliedtodetectTreponemapallidumandHaemophilusdicreyiinclinicalswabs.Result:ThetwosamplesofstandardstrainsofHaemophilusducreyiandoneTreponemapallidumwereamplifiedandshowed309-bprRNAgeneofHaemophilusducreyiand506-bpDNAofTreponemapalidum,respectively.Outof51samplesofgenitalulcerdetected,29showedTreponemapallidumpositiveproductandnoHaemophilusducreyiDNAwasfound.Conclusion:Themulti-nestedPCRforTreponemapallidumandHaemophilusducreyicouldbeusefulforearlydetectionanddistinguishingdiagnosisbetweensyphilisandchancroid.

简介：对肿瘤研究的不断深入发现除了基因突变之外,表观遗传改变也与肿瘤的发生发展密切相关。肿瘤表观遗传的改变以DNA的异常甲基化为主,其主要的机制是由肿瘤抑制基因启动子超甲基化引起基因沉默。DNA的异常甲基化几乎存在于任何类型的人类肿瘤中,包括皮肤恶性肿瘤。现对DNA甲基化、DNA甲基化与肿瘤、DNA甲基化在基底细胞癌、鳞状细胞癌、黑色素瘤和皮肤淋巴瘤等皮肤恶性肿瘤中的研究进行综述。

简介：细颗粒物（particulatematter,PM2.5）是城市大气的重要污染物,因其粒径小,面积大,活性强,易附带有毒、有害物质如重金属、微生物等,且在大气中的停留时间长、输送距离远,故而对人体健康具有很大影响。目前已有大量关于其致病机制的研究,如机体免疫功能的改变,诱导细胞氧化应激和损害,基因突变和DNA损伤,但具体的致病机制尚未完全明确,该文就以上致病机制进行综述。

简介：Objective:Todevelopasensitive,specificandsimplemethodfordetectionofextremelylownumbersofT.palliduminclinicalspecimens,asasignificantadditiontotheserologictestsforsyphilisdiagnosis.Methods:Double-tubenestedPCR(DN-PCR)andsingle-tubenestedPCR(SN-PCR)assayswereperformedtoamplifyspecificfragmentsoftheDNApolymeraseIgene(polA)ofT.pallidum.SensitivityandspecificityofthetwoPCRassaysweretested.EightysixwholebloodspecimensfrompersonswithsuspectedsyphilisweredetectedbythetwonestedPCRmethods.TheTPPAtestwasusedasacomparisonfordetectingsyphilisinserafromcorrespondingpatients.Results:OnlyspecificampliconscouldbeobtainedduringamplificationoftheT.pallidumpolAgeneandthedetectionlimitwasapproximately1organismwhenanalyzedongelbythetwoPCRmethods.Of86clinicalspecimens,62werepositivebyTPPA.Ofthese,54and51werepositivebytheDN-PCRandSN-PCR,respectively,whichdoesnotrepresentastatisticallysignificantdifferencebetweenthetwoPCRtests.Of24TPPA-negativespecimens,5werepositivebybothDN-PCRassayandSN-PCRassay.Conclusion:TheSN-polAPCRmethodisextremelysensitive,specificandeasytoperformfordetectinglownumbersofT.palliduminclinicalbloodspecimensasacomplementarytoserologyforsyphilisdiagnosis.

简介：目的与细胞培养和LCR比较考察6种国产PCR试剂盒在检测性传播疾病门诊患者标本沙眼衣原体的诊断价值。方法在北京、上海、南京、天津5家临床医院性传播疾病门诊收集到673份尿道／宫颈拭子标本，分别进行沙眼衣原体培养和PCR检测，对结果不相符合的标本采用连接酶链反应(LCR)复检，比较分析检测结果。结果合格病例616例，36份培养法检测阳性6．3％，PCR检测阳性率分别为23．5％-28．7％。与培养结果比较，各种PCR检测的敏感性均在90％以上。LCR复核标本200份，与之相比，PCR检测的敏感性为83．9％-98．6％，特异性66．7％-94．7％，YI指数0．523-0．881。其中PCR2结果符合性最好(YI指数0．881)。综合分析发现国产PCR技术检测沙眼衣原体的敏感性均在85％以上，特异性均在95％以上。结论国产PCR技术检测尿道／宫颈拭子沙眼衣原体具有较高的敏感性与特异性，可以用于临床检验，实验率质控与监督是本方法得以正确应用的关键。

简介：目的：研究45例急性荨麻疹住院患者心肌酶的变化及与超敏C反应蛋白（hsCRP）、血细胞沉降率（ESR）、降钙素原（PCT）和血常规的相关性。方法：回顾性分析45例急性荨麻疹住院患者心肌酶谱包括肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌红蛋白（MB）、乳酸脱氢酶（LDH）以及hsCRP、ESR、PCT和血常规的水平,并与健康对照组的相应指标进行比较,分析患者心肌酶水平与hsCRP、ESR、PCT和血常规的相关性。结果：患者组45例中有32例（71.1%）心肌酶指标升高,其中患者组CK、CK-MB、LDH水平均较健康对照组明显升高（t=2.71、4.97、7.37,P值均〈0.01）;患者组LDH分别与hsCRP、ESR、PCT、白细胞、中性粒细胞呈正相关（r值分别为0.60、0.48、0.40、0.36、0.57,P值均〈0.05）,CK-MB水平与hsCRP、ESR、PCT、WBC呈正相关（r值分别为0.33、0.73、0.59、0.68,P值均〈0.05）;CK与ESR、PCT、白细胞、中性粒细胞正相关（r值分别为0.53、0.42、0.55、0.31,P值均〈0.05）。结论：症状较重的急性荨麻疹患者常伴有心肌酶指标异常,且与体内炎症指标存在相关性。

简介：目的评价连接酶链反应(LCR)技术对尿液中淋病双球菌诊断的意义。方法对在STD门诊就诊的276例尿道/宫颈炎患者进行分泌物细菌培养及尿液淋球菌LCR检测,对两项结果不符合的标本进行聚合酶链反应(PCR)检测,确定细菌培养、LCR法检测尿液中淋球菌的敏感性、特异性。结果276例患者中24例LCR检测阳性(8.7%),21例培养阳性(7.6%)。5例两项结果不符合者进行聚合酶链反应检测。结果表明LCR的敏感性及特异性分别为92.3%,100%。结论LCR分析法检测尿液中的淋球菌具有较高的敏感性及特异性。

简介：

简介：目的：探讨男性不育症患者精子DNA完整性与精子常规参数及形态的相关性。方法：纳入2016年1月至12月于我院就诊的男性不育症患者72例为观察组,同期体检健康男性100例为对照组。采用WLJY-9000型彩色精子质量检测系统检测精液常规参数及精子形态学参数,采用精子染色质扩散法（SCD）分析精子DNA完整性。对比观察组与对照组各检测指标差异。将观察组进一步划分为少精症组（n=16）、弱精症组（n=33）、白细胞精子症组（n=23）,对比各小组检测指标的差异。分析观察组中精子DNA完整性与其它指标的相关性。结果：观察组精子浓度、精子存活率、前向运动精子占比、正常形态精子占比、精子DNA完整性均明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。少精症组精子浓度最低,弱精症组精子存活率最低,白细胞精子症组前向运动精子占比及正常形态精子占比最低,上述差异均有统计学意义（P〈0.05）。观察组精子DNA完整性与精子浓度、精子存活率、前向运动精子占比、正常形态精子占比均呈正相关（r=0.398、0.304、0.662、0.404,P均〈0.01）。结论：不孕症男性精子DNA完整性、精子浓度、精子存活率、前向运动精子占比、正常形态精子占比均明显下降,且精子DNA完整性与后4项观察指标均呈明显正相关。

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简介：目的探讨活血化瘀中药对酪氨酸酶蛋白加工成熟的影响。方法体外传代培养人无色素黑素瘤细胞YUGEN8，分别加入红花、桃仁及赤芍3味中药提取液，利用蛋白免疫印迹、基因反转录扩增及内切糖苷酶酶切等方法，观察中药处理组细胞内酪氨酸酶的表达、成熟过程与阴性对照组的差异。结果与阴性对照组比，桃仁处理组细胞酪氨酸酶基因表达并未增加，酪氨酸酶蛋白80ku左右大分子量成熟片断表达增加，能够耐受内切糖苷酶酶切。结论桃仁提取物对人黑素瘤细胞内酪氨酸酶的加工成熟及稳定具有一定促进作用。

简介：

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简介：38岁女性患者因面部银屑病给予吡美莫司外用,连续外用2个月并停药1d后,面部出现湿疹,给予常规抗组胺药物、甲氨蝶呤抗炎治疗无效,改用环孢素75mg/次,2次/d口服,治疗2d后湿疹好转,24d后皮疹消退出院。