简介：目的观察灵孢多糖对脂多糖诱导的小胶质细胞激活的影响及对TNF-amRNA和iNOSmRNA表达的影响。方法建立中脑原代小胶质细胞的培养，用灵孢多糖预处理30min，再加入脂多糖处理24h，通过免疫组化检测OX-42的阳性细胞数及RT-PCR检测TNF-amRNA和iNOSmRNA的表达。结果激活的小胶质细胞体积增大．细胞数量增多．TNF-amRNA和iNOSmRNA表达增高，但经较大剂量灵孢多糖（100μg／mL，300μg／mL）预处理后，小胶质细胞的激活被抑制，且总的细胞数量显著减少（P〈0．01），TNF-amRNA和iNOSmRNA表达量也降低（P〈0．01）。结论灵孢多糖可以减少TNF-amRNA和INOSmRNA的表达，可能是由于灵孢多糖的预处理阻断了由脂多糖诱导的小胶质细胞的激活，提示灵孢多糖可能对中脑多巴胺能神经元具有保护作用。

简介：

简介：目的在转录水平上检测人脑胶质瘤干细胞（BGSCs）中白介素-10（IL-10）的mRNA表达,探讨其在胶质瘤免疫及免疫治疗中的作用。方法从8例临床标本中培养出BGSCs,并通过生物学特性和免疫细胞化学方法予以鉴定。然后提取BGSCs以及相对应的原代脑胶质瘤细胞中的RNA进行实时逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测,测定IL-10的mRNA表达水平,并予统计学分析。结果成功从8例临床标本中培养出BGSCs并通过鉴定。定量检测mRNA表达显示,在BGSCs中IL-10的mRNA表达显著高于相应的原代培养的脑胶质瘤细胞,配对t检验显示P〈0.05,有统计学意义。结论首次检测了BGSCs中IL-10的mRNA表达水平,证实其高于相应的原代胶质瘤细胞。这可能是脑胶质瘤能逃避肿瘤免疫并且复发的原因,若要根治脑胶质瘤,应以BGSCs为靶点进行治疗。

简介：目的建立荧光定量PCR方法检测Alzheimer病（AD）患者外周血中淀粉样蛋白前体（APP）的mRNA水平，并探讨该基因在AD患者外周血中的表达及意义。方法根据APP的基因序列。设计并合成引物和荧光标记探针。将PCR扩增目的片段用AT克隆的方法克隆入T载体，重组质粒经筛选、鉴定后，作为阳性模板，用于标准曲线的制定和样品检测。用该方法检测30例AD患者和23例正常老年人对照组外周血中APP基因的mRNA水平。结果应用重组质粒制作的定量曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系。AD组APP基因平均表达水平为（2.54×10^5±1．53×10^5）copies／μgRNA，高于对照组（6．03×10^4±7．58×10^5）copies／μgRNA（P〈0．001）。结论荧光定量PCR检测AD患者APPmRNA水平的方法较常规PCR技术更为简便、快速、准确。用该法测得APP在AD患者外周血中的mRNA水平有所增加。

简介：目的探讨Notch信号通路在人脑胶质瘤发展中的作用。方法收集脑胶质瘤组织标本60例,其中Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤35例及Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤25例,并取22例瘤旁正常脑组织标本作为对照。采用半定量RT-PCR方法检测这些标本中Notch-lmRNA的表达。结果Notch-1mRNA在人脑胶质瘤中的表达显著高于正常脑组织（P〈0.01）,且在Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组中的表达显著高于Ⅰ-Ⅱ级组（P〈0.01）。相关性研究发现,Notch-1mRNA的表达与人脑胶质瘤病理分级呈正相关（r=0.706,P〈0.01）。结论Notch-1mRNA在人正常脑组织和脑胶质瘤中均有表达,但其在脑胶质瘤中的表达与脑胶质瘤的病理分级呈正相关。

简介：BACKGROUND:Epidemiologicstudieshaveindicatedthattheincidenceofstrokeinpremenopausalfemalesislowerthaninmalesatthesameage,butitsignificantlyrisesinpostmenopausalfemales.Estrogenisusedclinicallytoalleviateinjurycausedbycerebralischemia.Ithasbeenhypothesizedthattheneuroprotectiveroleofestrogenrelatestoangiopoietin(Angpt),whichplaysanimportantroleinvascularization,vascularremodelingandmaturation.OBJECTIVE:Toobserveandvalidatetheeffectofestradiolonangiopoietin-1(Angpt1)mRNAexpressioninovariectomizedratswithfocalcerebralischemiaafterreperfusion,soastoexplorethemolecularmechanismsofestradiol-mediatedprotectionfromcerebralischemicdamage.DESIGN,TIMEANDSETTING:Randomized,controlled,molecularbiology,prospectiveanimalstudy.TheexperimentwasperformedattheCentralLaboratoryofChongqingMedicalUniversityfromSeptembertoDecember2005.MATERIALS:Fiftyhealthyfemalewildtype(WT)ratsaged6monthsandfiftyfemaleratsaged6monthswithknockoutoftheestrogen-alphareceptorgene(ERKO).METHODS:WTratsandERKOratsweredividedintoestradiolandcontrolgroups(n=25),andinjectedin-tramuscularlywithestradiolbenzoate(100μg/kgperday)orcornoil(1mL/kgperday)for7days,30daysafterbilateralovariectomy.Ratmodelsofcerebralischemia/reperfusionwereestablishedwiththemiddlecerebralarteryocclusionmethod.After30minutesofmiddlecerebralarteryocclusion,ratsfromtheestradiolandcontrolgroupswereinjectedintramuscularlywithestradiolbenzoateorcornoilattheabovedose.MAINOUTCOMEMEASURES:Weusedradio-immunityanalysisandlaser-Dopplerflowmetrytomeasureplasmaestradiollevelsandchangesincerebralbloodflow.WeusedimmunohistochemicalstainingofCD34epitopestomeasurechangesinthecapillarydensityinbrainfollowingcerebralischemia/reperfusion,andquantitativeRT-PCRanalysistoassessmRNAexpressionlevelsofAngpt1,Angpt2,Tie2,vascu

简介：目的观察急性脑梗死患者Toll样受体4（TLR4）mRNA表达及与TNF-α仅浓度的相关性，初步探讨TLR4在急性脑梗死缺血炎性损伤中的作用，为临床治疗脑梗死提供新的思路。方法分别运用RT-PCR法、ELISA法测定35例急性脑梗死患者的外周血单个核细胞（淋巴细胞、单核细胞）TLR4mRNA表达及血清TNF-α仅浓度，同期与20例正常者、20例动脉粥样硬化患者比较。结果脑梗死组发病第1天TLR4mRNA表达、血清TNF-α仅浓度均显著高于正常对照组和动脉粥样硬化组（P〈0．01）。TLR4mRNA表达与血清炎性因子TNF-α仅浓度呈正相关（P〈0．01）。结论脑梗死患者急性期外周血单个核细胞TLR4mRNA表达上调，可能通过促使炎性因子产生分泌增多来介导脑缺血炎性损伤。

简介：目的动态观察实验性脑出血大鼠脑内血肿周围神经细胞凋亡情况和Caspas-3蛋白及mRNA表达水平的变化，探讨脑H{血后血肿周围神经细胞损伤机制。方法健康雄性Wistar大鼠随机分为生理盐水对照组、假手术组和脑出血模型组，分为术后3h，6h，12h，24h，48h，3d，5d，7d共8个时相点，采用尾状核注射自体非抗凝动脉血复制大鼠脑出血模型，术后制作冰冻切片，对切片进行TUNEL染色，以及Caspase-5免疫组化和原位杂交染色，之后利用图像分析仪，观察阳性细胞数。结果脑出血后3h血肿周围尚无凋亡细胞出现，6h有凋亡发生，以后逐渐增多，3d达高峰后逐渐下降，生理盐水对照组仅有少量TUNEL阳性细胞。假手术组及生理盐水对照组3h无Caspase-3蛋白和mRNA表达，生理盐水对照组6h以后有少量表达，脑出血模型组在6hCaspase-3蛋白和mRNA开始表达，3d时Caspase-3的蛋白达到高峰，5d以后逐渐下降，24hCaspase-3mRNA表达达高峰，5d以后逐渐下降。脑出血后血肿周围脑组织Caspase-3蛋白的表达与TUNEL阳性细胞数呈正相关（r=0．515，P〈0．05）；Caspase-3蛋白表达与mRNA表达呈正相关（r=0．625，P〈0．05）。结论脑出血后血肿周围神经细胞损伤有凋亡机制参与，在出血后6h发生凋亡，第3天达高峰。Caspase-3的表达在Caspase-5蛋白水平变化趋势与脑m血后细胞凋亡的趋势一致，Caspase-3的mRNA水平的表达高峰时间先于Caspase-3蛋白的表达及凋亡的发生，提示Caspase-3的表达决定脑出血后细胞凋亡的发生，在脑出血后细胞凋亡中起促进作用。

简介：目的评价磁敏感加权成像（SWI）对脑丘底核（STN）的显示价值。方法收集帕金森氏病患者13例,所有患者均接受3.0TMRI检查,扫描序列包括T2W/FSE（T2-weightedfastspin-echo,T2加权快速自旋回波）序列、T2W/FSTIR（T2加权快速短时反转恢复）及SWI序列,分别测量不同序列STN与周围组织（脑白质）的对比度和对比噪声比,并进行比较。结果三组序列STN与脑白质的对比度及对比噪声比存在显著差异。结论SWI提高了STN与脑白质的对比度及对比噪声比,提高了对STN的显示能力,最大限度地实现了对STN的可视化,对帕金森氏病患者脑深部刺激术（DPS）前定位评价、术中位置准确性的判断具有良好的应用前景。

简介：目的定量研究细胞间粘附分子基因（ICAM-1mRNA）在不同病理类型颅咽管瘤的表达差异及意义。方法收集30例经手术治疗的颅咽管瘤标本，采用SYBR荧光实时定量PCR法检测ICAM-1mRNA在肿瘤组织的表达，并对表达结果行统计学分析。结果造釉细胞型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达量为（62．18±6．43）×10^3copies／μg，鳞状乳头型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达量为（1．13±0．17）×10^3copies／μg，造釉细胞型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达量显著性高于鳞状乳头型颅咽管瘤（P〈0．01）。结论两种病理类型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达存在显著性差异，此差异性可能与两种病理类型颅咽管瘤不同的肿瘤炎症有关。

简介：目的观测石杉碱甲对血管性痴呆小鼠海马神经元N-甲基D-天门冬氨酸受体原位杂交变化的影响,以探讨其在血管性痴呆发病中的作用及石杉碱甲干预作用的机制.方法双侧颈总动脉线结,反复缺血-再灌注法制备模型,药物组用石杉碱甲溶液灌胃,跳台试验和水迷宫试验观测其行为学改变,采用原位杂交技术观测小鼠海马神经元N-甲基D-天门冬氨酸受体的表达变化.结果石杉碱甲组小鼠学习、记忆成绩优于模型组(P＜0.01),其海马N-甲基D-天门冬氨酸受体mRNA表达也明显增高(P＜0.01).结论石杉碱甲改善血管性痴呆小鼠学习、记忆成绩与其恢复海马低水平的N-甲基D-天门冬氨酸受体mRNA有关.

简介：目的探讨GATA-3及Th2细胞因子IL-4与多发性肌炎（PM）/皮肌炎（DM）的关系。方法用RT-PCR方法检测PM/DM患者外周血单个核细胞（PBMC）中GATA-3、IL-4的mRAN表达,并与正常健康人进行比较。结果PM、DM组中GATA-3mRNA表达阳性率（85.7%,86.4%）均高于正常对照组（25%）（P〈0.05）;PM、DM组GATA-3的表达强度（0.268,0.411）均高于正常对照组（0.000）（P〈0.05）;皮肌炎IL-4mRNA的表达强度（0.251）高于正常对照组（0.000）（P〈0.05）;GATA-3与IL-4的表达强度呈正相关（r=0.475,P〈0.05）。结论皮肌炎的Th2细胞过度分化及体液免疫增强可能与GATA-3表达增强有关。

简介：目的探讨大鼠局灶性脑缺血后脑内水通道蛋白-9（AQP-9mRNA）表达与脑水肿动态变化的关系，评价依达拉奉的干预作用。方法216只雄性Sprague—Dawley（SD）大鼠随机分为3组：假手术组（A组，6只），生理盐水组（B组，大脑中动脉阻断后6h、12h、24h、48h、72h、5d、7d7个时点，各6只），依达拉奉处理组（C组，同B组），术后即刻予以依达拉奉干预。分别测定脑组织含水量；实时荧光定量PCR（realtimequantitativepolymerasechainreaction，RT—PCR）法检测mRNA表达；用HE染色方法观察病理形态学改变。结果B组大鼠MCAO后脑组织含水量呈上升趋势，48h达高峰，各时点均高于与A组（P〈0．05）。同时，AQP-9mRNA表达量与脑含水量呈相同趋势改变，相关性分析表明AQP-9mRNA表达量（r=0．788，P〈0．05）与脑组织含水量呈正相关。B组与C组相比，各时点脑组织含水量明显下降（P〈0．05）；AQP-9mRNA表达显著下调（P〈0．05）；组织病理提示脑水肿及神经元损伤程度减轻。结论大鼠脑缺血后脑内AQP-9mRNA表达与脑水肿变化呈正相关，提示AQP-9可能参与大脑中动脉阻断后的脑水肿形成。依达拉奉干预可减少AQP-9mRNA的表达，从而减轻大鼠大脑中动脉阻断后脑水肿，减少神经元坏死，改善神经功能预后。

简介：目的探讨内皮素(ET)在脑心综合征发病机制中的作用.方法利用组织原位杂交技术检测实验性脑出血大鼠的中枢心血管特定调节区域及心肌ETmRNA表达的动态变化,并对阳性反应物进行图像定量分析.结果实验性脑出血可迅速诱导ET基因在脑出血周围区、下丘脑、脑干、海马、心肌的异常表达.脑出血6h即可见ETmRNA表达上调,到24h达高峰,72h时段虽略有减少,但仍高于正常水平.同时心肌的ET表达增多.结论脑出血周围区及中枢心血管调节区域的ET过多释放,这可能是脑心综合征的病理基础之一.

简介：目的研究创伤性脑损伤（traumaticbraininjury，TBI）后抑制Toll样受体4（Toll-likereceptor4，TLR4）与小鼠海马区髓样分化因子88（myeloiddifferentiationprimaryresponsegene88,MYD88）mRNA表达变化以及对小鼠行为变化的关系。方法采用Mamarou自由落体方法建立小鼠TBI模型，腹腔注射TLR4抑制剂CLI-095，采用实时定量聚合酶链（real-timepolymerasechainreaction,RT-PCR）反应及矿场实验，高架十字实验，Morris水迷宫方法检测创伤72h后海马区MYD88表达变化情况及行为学变化特征。结果模型建立并抑制TLR4后，72h海马区MYD88mRNA表达量较仅腹腔注射溶剂减少（P〈0．05），但处理组及对照组MYD88mRNA表达量均高于假损伤组（P〈0．05）。矿场实验，高架十字实验，Morris水迷宫检测TBI后小鼠出现运动水平下降，抑制TLR4后有所好转（P〈0．05），但仍低于假损伤组（P〈0．05）。结论TBI影响小鼠行为水平，抑制TLR4可下调MYD88mRNA表达，并可对小鼠神经功能恢复发挥一定作用，可能是神经损伤修复的关键因素之一。

简介：目的探讨不同病理级别人脑神经胶质瘤组织中p57^kip2/p21^cip1mRNA的表达变化及其关系。方法采用实时荧光定量PCR检测p57^kip2/p21^cip1mRNA在68例脑胶质瘤组织和16例非肿瘤脑组织中的表达水平。结果①p57^kip2mRNA在脑胶质瘤中的表达水平显著低于非肿瘤脑组织（P〈0.01）,且其表达水平与肿瘤病理级别呈显著负相关（rs=-0.495;P〈0.01）。②p21^cip1mRNA在脑胶质瘤中的表达水平与非肿瘤脑组织相比无显著差异（P〉0.05）,但其表达水平与肿瘤病理级别呈显著负相关（rs=-0.615;P〈0.01）。结论p57^kip2/p21^cip1的异常表达可能与人脑胶质瘤的发生和发展有密切相关,其表达水平可反映肿瘤的恶性程度。

简介：BACKGROUND:Highincidenceofstrokeatinterchangeperiodofautumnandwinterwasdemonstratedbyepidemiologicalsurvey,andthespecificcausesshouldbefurtherinvestigated.OBJECTIVE:Toinvestigatetheinfluenceofartificialcoldexposureontheincidenceofstrokeinrenovascularhypertensiverats(RHR),andanalyzetheassociationwithbloodpressureandcold-inducibleRNAbindingprotein(CIRP)mRNAexpressioninbraintissue.DESIGN:Acompletelyrandomizedgroupingdesign,arandomizedcontrolanimaltrial.SETTINGS:LabofNeurology,theFirstAffiliatedHospitalofSunYat-senUniversity;DepartmentofChemistry,OpenlaboratoryofChemicalBiology,InstituteofMolecularTechnologyforDrugDiscoveryandSynthesis,UniversityofHongKong.MATERIALS:MaleSDrats(n=460),weighing80-100gwereobtainedfromGuangdongProvinceHealthAnimalUnit.AmodifiedRXZ-300Aintelligentartificialclimatecabinet(NingboJiangnanInstrumentCo.,Ltd.,China).METHODS:TheexperimentwereprocessedintheLabofNeurology,theFirstAffiliatedHospitalofSunYat-senUniversityandtheOpenLaboratoryofChemicalBiology,InstituteofMolecularTechnologyforDrugDiscoveryandSynthesis,UniversityofHongKongfromOctober2004toNovember2005.Rats(n=400)wereoperatedtoestablish2-kidney2-clipRHRmodelasdescribedpreviously.Thesham-operatedrats(n=60)servedasnormotensivecontrols.Eightweekslater,300ofRHRwererandomlyselectedaccordingtotheirsystolicbloodpressure(SBP)anddividedinto3sub-groups(n=100pergroup):mildhypertensivegroup(SBPof160-200mmHg),moderatehypertensivegroup(SBPof200-220mmHg)andseverehypertensivegroup(SBP>220mmHg).Eachgroupwasfurtherdividedintotwogroups(n=50)underACEandnon-ACE.Normalsham-operatedSDrats(n=60),SBP<140mmHg,wererandomlydividedintotwogroups:Sham-operatedcontrolgroup(n=30)underACEandnon-ACE.ToestablishtheACEandnon-ACEtreatment,ratswerehousedindividuallyinartifici

简介：目的结合临床实践教学中显微手术基础培训的实际情况，探讨差异教学的必要性、实用性和可行性。方法针对多年来实践教学中所存在的一些难题，强调了在教学中立足于学员的个性差异，实施差异教学的方法。结果满足了学员个体学习的需要，促进每个学员在实践中得到充分发展。结论差异教学是显微手术培训有价值的手段，进一步提高了临床实践教学的质量。

简介：目的探讨弥散张量成像（diffusiontensorimaging,DTI）在颅脑病变周围水肿带纤维显示的局限性。方法对21例脑瘤病人术前均行DTI扫描并以弥散张量纤维束成像（diffusiontensortractography,DTT）重建颅脑病变周围水肿带纤维,比较所得结果与病人术前症状的符合程度。5例病人术后复查DTI,对比手术前后DTT与病人手术前后症状变化。结果DTI能无创显示颅内神经纤维的三维走行,但在水肿带纤维显示方面存在一定局限性,主要表现为纤维显示缺失、断裂等,与临床症状不符。结论术前应用DTI技术指导神经外科手术时,应充分考虑到DTI在颅脑病变周围水肿带纤维显示的局限性。应寻求更先进的数据扫描和重建方法真实显现水肿带纤维,更好指导手术。

简介：目的：探讨不同牛津郡社区卒中项目（OCSP）亚型急性脑梗死患者血清Fractalkine（FKN）浓度的变化。方法：45例急性脑梗死患者按OCSP分型分为完全前循环梗死（TACI）组、部分前循环梗死（PACI）组、后循环梗死（POCI）组和腔隙性梗死（LACI）组。采用酶联免疫吸附法检测发病1～3d、7d、14d和28d时血清FKN浓度，比较各组间的差异。分析FKN浓度与相应时间点美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分和3个月时Barthel指数（BI）的相关性。结果：各种亚型急性脑梗死患者血清FKN浓度均升高，TACI组最为显著；在不同时间点，血清FKN浓度变化大致为TACI〉PACI〉LACI〉POCI，与相应时间点NIHSS评分呈正相关，与3个月时BI呈负相关。结论：血清FKN浓度的变化可能提示急性脑梗死各OCSP亚型患者炎症损伤的差异，并影响神经功能缺损程度和患者3个月时的转归。