简介:目的构建耐5-FU的胃癌耐药细胞株,初步探讨细胞发生5-FU耐药的可能机制.方法通过药物耐药间歇冲击并浓度梯度递增法诱导建立胃癌耐药细胞株SGC-7901/5-FU.应用MTT法检测亲代细胞对4种化疗药物的IC50并计算耐药指数(RI).通过MTT法绘制细胞的生长曲线计算细胞倍增时间.流式细胞仪分析细胞周期分布.RT-PCR检测抑癌基因P53、癌基因Bcl-2、促凋亡基因半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)、死亡相关蛋白激酶(deathassociatedproteinkinase,DAPK)家族成员(DAPK-1、DAPK-2、DAPK-3)、多药耐药蛋白(multidrugresistanceproteins,MRP)亚家族中的MRP-6、多药耐药基因1(multidrugresistance1,MDR1)、切除交叉互补修复基因(excisionrepaircross-complementing1,ERCC-1)的表达.WesternBlot检测MDR1编码的P糖蛋白(P-gp)的表达水平.结果SGC-7901/5-FU对5-FU、顺铂、环磷酰胺的耐药指数分别为6.26、3.71、5.25.SGC-7901与SGC-7901/5-FU细胞倍增时间分别为(30.82±1.46)h和(46.01±4.15)h,SGC-7901/5-FU细胞增殖速率显著变缓(P<0.05).与亲代细胞比较,耐药子株S期细胞显著减少,G0/G1期细胞则显著增高(P<0.01),而G2/M期细胞无显著差异(P>0.05).耐药子株SGC-7901/5-FU细胞MDR-1、MRP-6、DAPK-3和P-gp表达显著上调(P<0.01),而ERCC-1、caspase-3、P53、DAPK-1、DAPK-2、Bcl-2的表达均无显著变化(P>0.05).结论成功构建胃癌耐5-FU细胞株SGC-7901/5-FU,其对顺铂、环磷酰胺具有交叉耐药,耐药机制与细胞周期S期细胞比例减少、G0/G1期细胞比例升高有关,可能与MDR-1、MRP-6、DAPK-3基因及P-gp蛋白表达上调有关.
简介:中国抗癌协会神经肿瘤专业委员会第十届学术会议暨第七届中韩神经肿瘤双边学术交流会议拟定于2013年8月9-11日在春城昆明召开。会议将邀请世界著名神经肿瘤专家、Neuro—oncology主编AlfredYung做专题报告,并安排大会发言和壁报交流。内容包括神经外科、神经内科、神经肿瘤病理、神经肿瘤放射治疗、神经肿瘤影像学、神经肿瘤化疗和神经肿瘤生物治疗等与神经肿瘤相关学科的基础和临床研究。欢迎神经肿瘤专业人士踊跃投稿和参会。参会论文应未在国内公开发表,要求摘要500字左右(参加中韩神经肿瘤双边学术交流会的论文为英文)。优秀论文将推荐给《中国神经肿瘤杂志》刊出。大会设立青年(40岁以下)优秀论文奖。参加青年优秀论文评选和希望推荐给《中国神经肿瘤杂志》发表者,需提交论文全文和中/英文摘要(按杂志格式要求),并在文稿首页注明。论文截稿日期:2013年6月30日。投稿邮箱:csno@sysucc.org.cn