简介：目的构建针对人抑凋亡基因Livin的小干扰RNA（siRNA）重组表达质粒载体。方法通过分子克隆技术,设计并合成具有基因特异性的3组寡核苷酸片段,克隆到pmU6质粒载体,并经菌落PCR鉴定及测序鉴定,Livin的siRNA序列成功克隆到重组表达质粒载体中。结果经菌落PCR鉴定及测序鉴定证实,人Livin的siRNA序列成功克隆到表达载体中,插入序列正确。结论成功构建了LivinsiRNA质粒表达载体,为后续研究降低或沉默Livin基因表达后能否有效抑制膀胱癌细胞增殖和促进细胞凋亡奠定了基础。

简介：膀胱癌的发病率在我国泌尿系统肿瘤中位居第一，多发、难治和术后复发率高是膀胱癌的特点，目前以手术切除为主、放化疗为辅的治疗方案效果均不理想。膀胱癌的复发和转移率仍然很高，特别是对于晚期肿瘤、表浅膀胱癌以及有耐药性的原位膀胱癌。鉴于这种现状，迫切需要新的治疗方法的出现。重组腺病毒介导的膀胱癌基因治疗是目前关注最多的治疗方法。

简介：目的：观察大剂量重组红细胞生成素（recombinanthumanerythropoietin，rHuEPO）冲击治疗维持性血透病人肾性贫血的临床疗效。方法：65例透析的肾性贫血患者随机分为3组，A组21例，每周2次，剂量为10000U皮下注射，每周2次连用2周后改为每周1次。B组每周1次，每次10000U。C组每周3000U皮下注射2～3次／周。治疗期间，监测血常规、血脂、肝肾功能、电解质、血压等指标及病人出现的各种不良反应。结果：A、B、C组总有效率分别为95．4％，95．0％，86．7％。副作用少，治疗前后白细胞、血小板、血脂、肝肾功能、电解质无明显变化（P〉0．05）。结论：大剂量rHuEPO冲击治疗，安全有效，可较快提高Hb，纠正贫血。

简介：目的：构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达。方法：应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码Uqcrfs1的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定及测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK293T细胞,使用RT-PCR、WesternBlot方法检测重组质粒在转录及蛋白水平的表达。结果：测序结果证实PCR扩增得到编码Uqcrfs1的cDNA序列正确;磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,在基因转录与蛋白表达水平,结果达到预期。结论：成功构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒,该重组质粒可在HEK293T中过表达。

简介：目的观察重组人促红细胞生成素（r—HuEPO）对慢性肾功能不全患者左心室结构和功能的影响。方法47例慢性肾功能不全患者肾小球滤过率（GFR）为20～40ml·min^-1·（1．73m^2）^-1。按基线血红蛋白（Hb）水平分为治疗组24例（Hb〈100g／L），给予r-HuEPO治疗；对照组23例（Hb≥100g／L）按常规治疗。治疗前后均行血常规，血生化和超声心动图检查，随访6个月。结果47例患者中左心室肥厚（LVH）的发生率为72．3％；其中治疗组87．5％，对照组56．5％；多元Logis—tic回归分析表明，LVH的发生仅与Hb水平相关。治疗6个月后，治疗组Hb明显上升（P〈0．01），左心室质量指数（LVMI）下降（P〈0．05）；对照组Hb和LVMI较治疗前相比无统计学差异（P〉0．05），两组收缩压、舒张压、肾小球滤过率治疗前后无统计学差异（P〉0．05）。结论慢性肾功能不全患者的LVH与Hb水平降低。r-HuEPO治疗6个月可以改善Hb水平，逆转LVH，对血压和肾功能无影响。

简介：目的观察基因重组人促红细胞生成素（r-HuEPO）对慢性肾衰竭（CRF）患者外周血T-淋巴细胞免疫功能和红细胞免疫功能的影响。方法应用流式细胞仪、双抗体夹心ELISA法和红细胞酵母菌花环实验及红细胞免疫调节因子一步法分别检测观察90例CRF患者经r—HuEPO治疗后，外周血T-淋巴细胞亚群（CD3、CD4和CD4／CD8）、可溶性白介素-2受体（sIL-2R）、红细胞Gb受体花环试验（RNC-C3bRR）、红细胞免疫复合物花环试验（RN2-ICR）、红细胞免疫粘附促进因子（RFAR）和红细胞免疫粘附抑制因子（RFIR）的变化。结果①90例CRF患者外周血清中sIL-2R水平、RBC-ICR和RFIR明显高于正常对照组（P〈0．01），CD3、CD4、CD4／CD8、RBC-C3bRR和RFAR明显低于正常对照组（P〈0．01）；②r-HuEPO治疗后，RBC—C3bRR、RBC—ICR、RFAR和RFIR均有好转（P〈0．05），同时sIL-2R、CD3、CD4和CD4／CD8亦有所改善，但无统计学差异（P〉0．05）。结论CRF患者存在明显的细胞免疫功能和红细胞免疫功能低下，rHuEPO治疗对红细胞免疫功能有较好的提升和调节作用，对细胞免疫功能改善不明显。

简介：目的以Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌细胞系T24细胞，观察其对T24细胞侵袭能力的影响。方法Ad-Surp-LRIG1转染T24细胞，用RT-PCR和Westernblot检测细胞中LRIG1的表达水平，并采用Transwel!小室测定转染后细胞侵袭能力的变化。结果Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌T24细胞后，与对照组和空白对照组相比，体外侵袭实验显示实验组细胞的侵袭能力明显下降。LRIG1的mRNA和蛋白表达水平明显升高，而EGFR的mRNA和蛋白表达水平则显著降低（P〈0．01）。结论Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1能够在T24细胞中有效表达，并显著抑制T24细胞的侵袭能力。