简介：目的探讨肠球菌表面蛋白基因（Esp基因）的表达与肠球菌致病性的相互关系。方法采用PCR检测自我院住院或门诊患儿分离的152株致病性肠球菌Esp基因。结果152株肠球菌中98株检出Esp基因，占64．5％；30株粪便分离的非致病性肠球菌均未检出Esp基因（P〈0．01）；粪肠球菌、屎肠球菌Esp基因检测阳性率分别为90．9％和28．1％，粪肠球菌明显高于屎肠球菌（P〈0．01）；152株致病肠球菌来自不同的感染部位，尿液、阴道分泌物、痰液、血液和脐分泌物标本Esp基因的阳性率分别为83．7％、55．6％、50．0％、43．0％和33．0％，住院患儿标本中分离的致病性肠球菌的Esp基因阳性率为75．0％，明显高于门诊患儿阳性率37．5％（P〈0．001）。结论肠球菌的Esp基因在肠球菌对宿主细胞的黏附定植以及逃避宿主免疫清除方面起到重要的作用。

简介：目的利用激光共聚焦显微镜（CLSM）和改良微孔板法观察细菌生物膜形成，探索细菌生物膜检测的有效手段。方法烧伤患者植入性导管分离的金葡菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌，经体外分别培育24、48、72h和5d后，先后用CLSM和改良微孔板法，观察细菌生物膜形成和黏附的过程与特点。结果鲍曼不动杆菌、金葡菌、铜绿假单胞菌形成生物膜的时间、生物膜的形态与特点都有显著的差异。结论CLSM和改良微孔板法是观察和检测细菌生物膜形成过程的有效手段。

简介：目的观察经核苷（酸）类似物（NA）治疗获得病毒学应答，且HBsAg低水平的HBeAg阴性慢性乙型肝炎（CHB）患者序贯q干扰素（IFNα）治疗的疗效，并探讨HBsAg消失的相关因素。方法长期接受NA治疗并获得病毒学应答（HBV-DNA〈1000拷贝／mL，持续时间〉12个月），且HBsAg低水平（HBsAg≤〈2000U／mL）的HBeAg阴性CHB患者，转为IFNα治疗48周。检测患者治疗前和治疗12、24、48周时血清HBV-DNA定量，HBV血清学标志物，肝功能和血常规，停药后随访24周。以HBsAg消失或血清学转换、HBsAg〈10U／mL为疗效评价指标。Logistic回归用于分析相关因素，受试者工作特征曲线（ROC曲线）用于确定HBeAg阴转史及HBsAg变化情况对治疗后HBsAg消失的预测价值。结果83例患者被纳入研究。停药24周时，15例（18．1％）获得HBsAg消失，5例（6．0％）获得HBsAg血清学转换，9例（10．8％）达到HBsAg〈10U／mL。HBsAg消失组中HBeAg自发阴转的患者比例高于HBsAg未消失组，差异有统计学意义（X^2=9．527，P=0．002）。治疗12周时HBsAg水平较基线下降≥0．5logU／mL者治疗后更易实现HBsAg消失（X^2=16．576，P〈0．001），其预测HBsAg消失的曲线下面积（AUC）为0．810（95％CI：0．686-0．935，P〈0．001）。结论经NA治疗获得病毒学应答，且HBsAg低水平的HBeAg阴性CHB患者，序贯IFNα治疗可获得较高HBsAg消失率；HBeAg阴转史及治疗早期HBsAg变化情况可用于预测及指导治疗。

简介：目的应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）检测产KPC-2、NDM-1、VIM-2、IMP-1与IMP-4型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌水解厄他培南的能力。方法收集2009年6月-2013年12月上海交通大学医学院附属新华医院各种临床标本中分离的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE）,用改良Hodge试验进行产碳青霉烯酶的表型筛选,用PCR扩增方法检测其碳青霉烯酶基因,并经测序确认。应用MALDI-TOFMS进行厄他培南水解预试验以确定最适厄他培南浓度及孵育时间,随后采用预试验中的最适条件,应用MALDI-TOFMS检测CRE水解厄他培南的能力。结果108株CRE中,有102株改良Hodge试验阳性,其中90株产KPC-2、4株产NDM-1、3株产VIM-2、2株产IMP-1、2株产IMP-4、1株同时产KPC-2和IMP-4型碳青霉烯酶,且在2h内均能水解厄他培南;另外6株CRE改良Hodge试验阴性,未检测出上述碳青霉烯酶基因,且不水解厄他培南。结论临床微生物实验室应用MALDI-TOFMS能够快速准确检测CRE水解厄他培南的能力,筛查产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌,为临床早期合理使用碳青霉烯类抗生素提供依据。

简介：目的了解大连2所医院临床分离革兰阴性菌中介导高水平氨基糖苷类抗生素耐药的16SrRNA甲基化酶基因armA、rmtB的流行情况，并研究其耐药机制。方法收集临床分离的耐阿米卡星的革兰阴性杆菌134株。PCR法筛选2种甲基化酶基因armA及rmtB；PCR产物进行测序。质粒提取、接合试验及转化试验确定armA及rmtB基因定位。琼脂稀释法测定阳性菌株、结合子和转化产物对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素3种氨基糖苷抗生素的MIC值。结果134株耐药菌株中，21株鲍曼不动杆菌检出armA基因，5株大肠埃希菌和5株肺炎克雷伯菌检出rmtB基因。质粒抽提试验及接合试验rmtB阳性菌获得成功。接合子及转化产物DH5a（pMDarmA）均获得高水平耐氨基糖苷类抗生素的特性。结论大连2所医院检测到16SrRNA甲基化酶基因armA和rmtB阳性菌株。armA基因存在于鲍曼不动杆菌中；rmtB基因位于大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的质粒上。armA和rmtB可以导致细菌对氨基糖苷类抗生素的高水平耐药。

简介：目的了解医院分离的多重耐药鲍曼不动杆菌16SrRNA甲基化酶基因分布情况,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法采用Phoenix100微生物全自动鉴定系统进行菌株鉴定及药敏试验;采用PCR方法检测armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD基因。结果46株鲍曼不动杆菌中armA基因阳性36株,阳性率78.3%,未检出rmtA、rmtB、rmtC、rmtD基因。药敏试验结果显示医院分离的多重耐药鲍曼不动杆菌对多黏菌素全部敏感,对四环素、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、甲氧苄啶-磺胺甲唑耐药率分别为13.0%、80.4%、91.3%、95.7%、95.7%,对其他测试药物耐药率100%。结论医院分离鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类抗菌药物耐药性已非常严重,携带armA基因是导致氨基糖苷类耐药的原因之一,延缓鲍曼不动杆菌多重耐药性已刻不容缓。

简介：目的了解6种编码16SrRNA甲基化酶的基因在氨基糖苷类抗生素耐药革兰阴性菌中的流行情况。方法收集本院2007年10～12月分离的211株阿米卡星和庆大霉素耐药革兰阴性菌，采用PCR检测其中6种甲基化酶基因（armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD和npmA）的分布。对16SrRNA甲基化酶基因阳性的菌株，用ERIC-PCR进行同源性分析。结果211株阿米卡星和庆大霉素耐药革兰阴性菌中，91．5％（193／211）被检出16SrRNA甲基化酶基因，其中133株含armA（133／211，63．0％），60株含rmtB（60／211，28．4%）。阿米卡星MIC≥512mg／L、庆大霉素MIC≥128mg／L的104株肠杆菌科细菌中，甲基化酶基因检出达100％，且armA和rmtB的检出相仿（分别为49与55株）。阿米卡星MIC≥512mg／L、庆大霉素MIC≥128mg／L的94株铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中，甲基化酶检出94．7％（89株），以armA（84株）为主。未检测到rmtA，rmtC，rmtD和npmA基因。ERIC-PCR结果显示该类基因并非单克隆传播。结论几乎所有临床分离的阿米卡星MIC〉512mg／L的革兰阴性菌中都能检出armA或rmtB基因。