简介：基因克隆一般分为定位克隆和表型克隆。表型克隆进展较快,主要有消减杂交、代表性差异分析法、mRNA差异显示、DNA转染法及抑制消减杂交法。抑制消减杂交法是1996年报道的一种表型克隆的新方法,是目前寻找差异表达基因的较有效方法,较过去的方法有许多先进之外。本文对此方法的原理及应用作一详细介绍,并与其他方法作简单比较。

简介：比较了不同偶合方法及裂解条件对ω－芋螺毒素及其衍生物线性肽合成效率的影响。结果表明，Ｂｏｃ／Ｂｚｌ策略、Ｆｍｏｃ／Ｂｕｔ策略、手工及仪器对总偶合率影响较小，但裂解条件及保护策略对肽－树脂裂解影响很大，氟化氢体系裂解Ｂｏｃ／Ｂｚｌ法合成树脂副产物较多，且主链易发生断裂，以低高法裂解效率最高。三氟乙酸体系裂解Ｆｍｏｃ法合成树脂效率高，主要副产物是含Ｔｒｔ基的线性肽，增加１，２－二巯基乙醇可提高肽纯度。

简介：分离和鉴定不同生物基因的差异序列，有助于功能基因的分离，揭开物种间进化的规律，阐明某些疾病相关基因的作用机理。本文简述了几种近年来常用的筛选差异基因的方法，特别是最新发表的杂交监控差异分析法（HMDA）的原理、适用范围及其特点，重点探讨了HMDA法在真核基因组差异序列筛选中的技术性突破及其研究前景。

简介：采用SDS和CTAB两种方法分离提取金丝小枣基因组DNA,并比较其提取效果.结果表明,改进后的CTAB法可获得高质量、高得率的基因组DNA,可用于金丝小枣的各种分子生物学研究.

简介：建立了商业化种植的NeWLeaf-YTM转基因马铃薯的筛选检测和鉴定的PCR方法.该方法根据马铃薯自身patatin基因作为内源特异参照基因扩增216bp片段,检查模板DNA提取的质量,避免了假阴性结果;同时扩增FMV35S启动子基因225bp片段和PVY-cp基因161bp片段.PCR反应循环参数是94℃2min;94℃40s,55℃60s,72℃60s,35次循环;之后72℃延伸5min.本实验中的F-primer(PVY01-5′)/R-primer(PVY01-3′)引物是针对商业化种植的NewLeaf-YTM转基因马铃薯PVY-cp抗病毒基因而设计的,具有很强的特异性,可以达到对NeWLeaf-YTM转基因马铃薯鉴定的目的.

简介：血清钠离子和钾离子的测定在临床诊断上意义重大，其常规检测方法火焰光度法和离子选择性电极法都需要昂贵的仪器且操作复杂，因此近年来开发了一些均相直接测定方法。本文综述了近年研制出的血清中钠、钾离子的各种均相直接测定方法，评述了各种直接测定方法的优、缺点。血清中钠、钾离子进行均相直接测定有着准确度高、重复性好等优点，可在临床生化自动化分析仪上应用。

简介：从动物组织中提取总RNA是现代分子生物学研究中经常使用的重要实验技术,按常规方法获得的总RNA产品中常伴有大分子量染色体DNA污染.为此,我们摸索出了保证RNA制品纯度、质量和产量的DNA酶消化最佳反应条件.利用改良后的方法提取了小鼠脏器组织总RNA,进行了新基因mPC-1在小鼠脏器中表达的组织分布研究.

简介：建立了从肉骨粉中提取DNA的稳定、简便易操作的方法.根据牛、羊线粒体DNA基因片段设计特异性引物和TaqMan探针,建立了实时荧光PCR技术检测肉骨粉中牛、羊源性成分的快速、特异、敏感的方法.

简介：目前有关造血的基因重组的细胞因子不断出现,如EPO、TPO、G-CSF、SCF及多种白介素等等。如何评价这些细胞因子的生物活性,已成为重要研究课题,基中对造血祖细胞的增殖分化的影响是一个重要的技术途径。本文就常用的几种体外培养体系及方法作一探讨,以提供检测基因重组细胞因子活性的有效方法。①培养体系的选择,大致分为二大类:琼脂培养法主要用于粒-巨噬系祖细胞CFU-GM;培养甲基纤维素法,用于CFU-E、BFU-E、

简介：目前，西班牙Navarra大学的研究人员BorjaSaezOchoa开发出了一种新的诊断多发性骨髓瘤（MM）的遗传方法，该方法可在早期阶段就检测到疾病。

简介：选择60Coγ射线5Gy照射后第7天的人胚肺成纤维细胞(HELF),采用聚阳离子脂质体LipofectAMINE介导的基因转染法将人TGFβ1正、反义基因表达载体pMAMneo-TGFβ1和pMAMneo-AntiTGFβ1转入HELF,转染细胞经G418抗性筛选出来.提取培养细胞的染色体DNA,用DNA斑点印迹分析表明,它们能与neo基因特异杂交.用neo基因特异的PCR引物能从转染细胞扩增出276bp的阳性片段,而未转染细胞则扩增阴性.