简介：目的：构建人snail基因真核表达载体并鉴定。方法：使用RT-PCR法获取人snail基因全长cDNA,经BamHI、EcoRI双酶切、连接,插入pcDNA3.1（＋）真核表达载体,转化TOP10感受态细胞,用含氨苄青霉素的LB培养基筛选阳性克隆,提取质粒双酶切电泳及测序鉴定,瞬时转染siha细胞Western-blot从蛋白水平鉴定重组质粒在真核细胞内的表达。结果：pcDNA3.1-snail重组质粒经酶切电泳符合预期片段,测序鉴定插入片段与NCBIGenBank文库中人snail序列一致,重组质粒瞬时转染后snail蛋白表达量明显增高。结论：成功构建pcDNA3.1-snail重组质粒载体,为进一步探讨snail基因生物学功能奠定了基础。

简介：目的：探讨老年代谢综合征（MS）患者颈动脉内膜中层厚度（IMT）与血管内皮功能及血管粘附因子-1（VCAM-1）的相关性。方法：选取2013年1月~2014年10月我院收治的50例MS患者分为老年组（n=25）和中青年组（n=25）,又根据IMT分为正常组和增厚组两个亚组。比较老年组和中青年组患者的临床资料,采用放射免疫分析法检测所有患者内皮素-1（ET-1）水平,采用分光光度计间接比色法检测一氧化氮（NO）水平,采用ELISA法检测VCAM-1水平,采用超声诊断仪检测IMT。结果：老年MS组和中青年MS组临床资料比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;MS患者IMT增厚组的NO水平均低于IMT正常组,而ET-1和VCAM-1水平均高于IMT正常组,比较差异有统计学意义（均P〈0.05）。IMT增厚组间比较,老年MS组的NO水平低于中青年MS组,VCAM-1水平高于中青年MS组,比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;老年MS组和中青年MS组的IMT与NO水平呈负相关（r=-0.415,-0.411;P=0.043,0.049）,与ET-1和VCAM-1水平呈正相关（r=0.585,0.576;P=0.030,0.036;r=0.547,0.552;P=0.033,0.031）。结论：血管内皮功能障碍和动脉粥样硬化等多重因素促进了MS患者IMT增厚中病理过程的发生和发展。

简介：目的：在pEGFP-C2真核表达载体中表达人NDRG2基因的截短部分并进行鉴定。方法：以含有人NDRG2基因的pGKBT7质粒为模板，通过PCR的方法扩增获得截短的人NDRG2基因，然后克隆入表达载体pEGFP-C2；以荧光显微镜观察和WesternBlotting方法对表达产物进行鉴定。结果：表达产物中在分子量67kD左右可见与目的蛋白分子量相符的条带，该条带可被Ndrg2单克隆抗体特异性识别。结论：构建了截短的人NDRG2基因真核表达载体，并在真核细胞中（HEK-293）获得成功表达。