简介：摘要目的构建人干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon genes, STING)沉默子的荧光素酶报告质粒，在人胚肾细胞(HEK293T)和人类宫颈癌细胞(HeLa)中检测荧光素酶活性，生物信息学预测其可能结合的转录因子并通过实验验证。方法通过PCR扩增人STING-5-1a(-124～+267，相对于转录起始位点，TSS: 0)和STING-5-2a(-124～+168)区域，亚克隆至pGL3-Basic质粒；将人STING沉默子区域STING-5-1b(+169～+267)正向反向亚克隆至pGL3-Control质粒(pGL3-C-5-1b-positive/negative)，并把STING-5-1b分为两段互补片段，亚克隆至pGL3-Control载体上，命名为pGL3-C-STING-5-1b-α(+169～+209)/pGL3-C-STING-5-1b-β(+210～+267)，双荧光素酶报告活性分析检测上述重组质粒在HEK293T和HeLa中的活性。应用生物信息学方法预测人STING沉默子的转录因子结合位点，将预测结合位点进行多点突变，检测荧光素酶活性。敲低转录因子，免疫印迹试验检测STING的表达水平。染色体免疫共沉淀反应进一步验证转录因子与人STING沉默子的结合。结果核酸测序证实，上述重组质粒构建成功。截短STING-5-1b(+169～+267)片段后相对荧光素酶活性上升。同时，与pGL3-Control质粒相比，pGL3-C-5-1b-positive重组质粒的相对荧光素酶活性下降(P<0.05)，其中，STING-5-1b-β(+210～+267)序列起主要抑制作用。应用生物信息学软件预测发现转录因子PR结构域锌指蛋白4(PRDM4)、Thanatos相关蛋白1(THAP1)、TEA域转录因子1(TEAD1)、核受体亚家族4 A组成员1(NR4A1)、类Krueppel因子4(KLF4)和叉头转录蛋白O3(FOXO3)可能与人STING沉默子区域(+210～+267)结合。对上述转录因子的结合位点进行多点突变构建突变体并转染至HEK293T和HeLa，发现THAP1-Mut和TEAD1-Mut的相对荧光素酶活性显著上升，提示STING沉默子可能含有THAP1和TEAD1的结合位点。将转录因子THAP1和TEAD1敲低后，STING的表达水平有显著上升。染色体免疫共沉淀试验表明，转录因子TEAD1和THAP1在细胞内与人STING沉默子区域结合。结论本实验成功构建了人STING沉默子荧光素酶报告质粒，通过活性比较，推测人STING的核心沉默子区位于+210～+267区域，通过生物信息学分析及点突变实验初步确定人STING沉默子可能含有的潜在转录因子结合位点。并使用免疫印迹试验和染色体免疫共沉淀进一步证实转录因子TEAD1和THAP1与人STING沉默子的结合，为后续研究提供实验资料。

简介：摘要目的探讨SCN3A功能性位点c.905A>G/p.N302S和c.1441C>T/p.L481L基因多态性对丙戊酸钠(valproic acid sodium，VPA)治疗壮族癫痫患者疗效的影响。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP)技术和直接测序法检测224例广西百色地区VPA规范治疗的壮族癫痫患者(有效组85例，无效组139例)外周血SCN3A位点c.905A>G/p.N302S和c.1441C>T/p.L481L基因多态性，利用LC-MS色谱法测定VPA血药浓度，评估两组患者不同基因型和等位基因分布频率与VPA疗效的关联性，分析有效组不同基因型患者VPA血药浓度的差异，利用SHEsis软件对c.905A>G/p.N302S和c.1441C>T/p.L481L进行连锁不平衡分析。结果有效组c.905A>G/p.N302S等位基因分布(A为50.6%，G为49.4%，)及基因型分布(AA型27.1%，AG型47.1%，GG型25.8%)与无效组的等位基因(A为37.4%，G为62.6%)及基因型(AA型16.6%，AG型41.7%，GG型41.7%)比较，均差异有统计学意义(χ2＝7.501，P＝0.006；χ2＝7.907，P＝0.019)，而有效组c.1441C>T/p.L481L等位基因分布(C为47.1%，T为52.9%)及基因型分布(CC型23.5%，CT型47.1%，TT型29.4%)与无效组的等位基因(C为38.8%，T为61.2%)及基因型(CC型18.7%，CT型40.3%，TT型41.0%)比较，均差异无统计学意义(χ2＝2.920，P＝0.088；χ2＝3.099，P＝0.212)。与AA ＋AG基因型相比，c.905A>G/p.N302的SGG基因型显著降低VPA疗效(OR＝2.051，95%CI＝1.136～3.703)。有效组c.905A>G/p.N302SGG基因型与AA＋AG基因型VPA血药浓度(t＝3.256，P＝0.137)、c.1441C>T/p.L481LTT基因型与CC＋CT基因型VPA血药浓度比较(t＝4.628，P＝0.082)，均差异无统计学意义，c.905A>G/p.N302S和c.1441C>T/p.L481L没有连锁不平衡性。结论SCN3A位点c.905A>G/p.N302S基因单核苷酸多态性可能是壮族癫痫患者VPA抵抗性形成的风险因素。

简介：摘要目的探讨早产儿疾病状态时甲状腺功能变化的临床意义。方法本文为回顾性研究。选择2019年1月至2020年12月郑州市第一人民医院新生儿重症监护病房（NICU）收治的早产儿90例，其中合并疾病状态的早产儿48例为观察组，无合并症早产儿42例为对照组，观察组根据疾病严重程度分为危重组26例和非危重组22例。其中男48例、女42例，胎龄（31.17±1.44）周，出生体质量（1 449±255）g。于早产儿出生后第7天（第1次）和第14天（第2次）分别检测各组早产儿血清游离原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）和促甲状腺素（TSH）。比较各组早产儿的甲状腺功能。应用SPSS 21.0统计软件进行数据分析，符合正态分布的计量资料以均数±标准差（x¯±s）表示，组间比较采用独立样本t检验。结果观察组早产儿第1次检查FT3为（3.36±0.68）pmol/L，第2次检查为（3.49±0.75）pmol/L，均低于对照组的（3.80±0.75）pmol/L、（3.94±0.60）pmol/L，差异均有统计学意义（均P<0.05）；观察组早产儿的FT4、TSH第1次、第2次检查与对照组比较差异均无统计学意义（均P>0.05）。危重组第1次FT3为（3.15±0.64）pmol/L，第2次为（3.30±0.80）pmol/L，非危重组分别为（3.60±0.65）pmol/L、（3.73±0.63）pmol/L，两组比较差异均有统计学意义（均P<0.05）；危重组早产儿第1次FT4为（15.08±3.19）pmol/L，低于非危重组的（17.21±3.78）pmol/L，差异有统计学意义（P<0.05）；危重组与非危重组第2次FT4分别为（17.57±3.15）pmol/L和（19.10±2.27）pmol/L，TSH分别为（6.24±2.02）mU/L和（6.58±2.10）mU/L，虽然组间比较差异均无统计学意义（均P>0.05），但与同组第1次比较差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论疾病状态时早产儿FT3减低，严重病例可同时出现FT4下降。甲状腺激素降低与早产儿疾病严重程度存在相互影响的关系。

简介：语篇是一个具有整体性的语义单位．不能将其分割开来。在分析语篇时，要注重篇章的连贯性，面篇章的连贯性取决于各种衔接手段的使用。本文主要从语法衔接这一角度。分析照应、替代和省略、连接在语篇分析中的作用．

简介：摘要目的探讨巨噬细胞雄激素受体（androgen receptor，AR）是否通过调控白细胞介素（interleukin，IL）-1β基因表达影响高磷诱发的血管平滑肌细胞钙化。方法采用人单核细胞系THP-1细胞，利用染色质免疫沉淀实验检测AR是否与IL-1β启动子的雄激素受体元件（androgen receptor element，ARE）序列结合，通过荧光素酶分析实验检测AR是否调控IL-1β基因表达。基因沉默THP-1细胞的AR，用携带载体或shRNA的慢病毒转染THP-1细胞，流式细胞术分选出带荧光标记的阳性转染细胞THP-1ARsc（对照组）和THP-1ARsi（沉默单核细胞AR），Western印迹法检测THP-1ARsc、THP-1ARsi细胞的AR表达水平，通过佛波酯（50 ng/ml）诱导获得巨噬细胞MФARsc（对照组）或MФARsi（沉默巨噬细胞AR），酶联免疫吸附试验检测MФARsc或MФARsi条件培养基的IL-1β表达水平。用MФARsc或MФARsi的条件培养基加入磷酸盐（磷酸二氢钠，终浓度2.5 mmol/L）后对人主动脉平滑肌细胞（human aortic smooth muscle cells，HASMC）进行培养，茜素红S染色分析HASMC的钙化情况，Western印迹法检测成骨细胞标志物RUNX2和HASMC标志物SM22α的表达水平；中和实验分析IL-1β介导巨噬细胞AR对HASMC钙化的影响。结果AR与IL-1β启动子的ARE序列结合并调控IL-1β基因表达。与MФARsc细胞比较，MФARsi细胞条件培养基的IL-1β蛋白表达水平显著下降（P<0.001）。与MФARsc条件培养基比较，MФARsi条件培养基HASMC钙沉积显著减少，RUNX2蛋白表达下降而SM22α蛋白表达增多（均P<0.05）；MФARsi条件培养基+IgG抗体组较MФARsc条件培养基+IgG抗体组HASMC钙化显著抑制，MФARsc条件培养基+IL-1β抗体组较MФARsc条件培养基+IgG抗体组HASMC钙化显著抑制，而MФARsi条件培养基+IgG抗体组和MФARsi条件培养基+IL-1β抗体组均较MФARsc条件培养基+IL-1β抗体组HASMC钙化抑制程度更大（均P<0.05）。结论巨噬细胞AR通过与IL-1β启动子内的ARE序列结合调控IL-1β的表达，IL-1β介导巨噬细胞AR对高磷诱发HASMC钙化的影响。

简介：甘肃宝石花医院重症医学科 730060 【摘要】 目的 探讨早期中医护理模式在危重症患者胃肠道功能维护中的作用。 方法 选取我院 2017 年 2 月到 2019 年 2 月收治的危重症患者进行研究，按照入院次序均分至对照组和观察组，分别实施常规护理和早期中医护理，进行患者满意度和胃肠道功能的比较。 结果 观察组满意度高于对照组，肠鸣音恢复时间、肛门首次排气时间和首次排便时间短于对照组，组间对比差异 [95.7%VS78.4% ， (19.8±2.7)dVS(25.2±3.6)d ， (20.4±3.2)dVS(25.6±4.2)d ， (39.6±4.5)dVS(45.4±3.6)d] ， (P ＜ 0.05) 。 结论 予以危重症患者早期中医护理模式，可提高满意度，维持胃肠道功能，推广应用价值明显。

简介：摘要：目的 探讨延续性护理服务对前列腺增生术后盆底肌功能锻炼依从性的影响。 方法 制定前列腺增生术后患者延续性护理服务方案，将68例前列腺术后患者作为观察对象，接受延续性护理服务，由盆底肌功能锻炼护理小组成员对患者进行定期电话随访、建立微信群、健康教育讲座、病友座谈会等方式与患者进行互动从而提高患者的依从性和满意度。结果 前列腺术后患者盆底肌功能锻炼的依从性和满意度得到了提高。结论 延续性护理服务有助于提高前列腺增生术后盆底肌功能锻炼的依从性和满意度。