简介：摘要目的探究多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）小鼠卵母细胞中miR-320-3p低表达对胚胎发育潜能的影响，并初步探讨相关分子机制。方法脱氢表雄酮皮下注射法构建40只PCOS小鼠模型，40只对照组小鼠注射等量油剂。通过发情周期变化和卵巢组织苏木素-伊红染色，评估模型构建效果，超数排卵获取模型鼠的MII期卵母细胞，胞质内注射miR-320-3p模拟物（miR-320-3p mimics）或阴性对照物（negative control，NC），分为对照+NC组、PCOS+NC组、PCOS+miR-320-3p mimics组。①通过qRT-PCR方法检测三组小鼠MⅡ期卵母细胞中miR-320-3p的表达；②三组MⅡ期卵母细胞行卵胞质内单精子注射，收集双原核（two pronuclei，2PN）受精卵进行体外培养，于受精后48 h、84 h记录4-细胞期胚胎和囊胚的数量。③三组囊胚分别进行滋养外胚层分子标志物CDX2染色和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导缺口末端标记法细胞凋亡检测，统计各组总细胞数、滋养外胚层（trophectoderm，TE）细胞数、内细胞团（inner cell mass，ICM）细胞数和凋亡细胞数；④通过qRT-PCR方法检测三组4-细胞胚胎中miR-320-3p的靶基因（Ulk1、Pbx3、Kdm5b、Satb2）及发育相关基因（Pou5f1、Myc、Klf4、Ago2、Dppa3、Wdr5）的表达变化。结果①qRT-PCR显示，与对照+NC组相比，PCOS+NC组小鼠卵母细胞中miR-320-3p表达相对下调，差异具有统计学意义（P=0.009）；PCOS+miR-320-3p mimics组中miR-320-3p表达量显著多于PCOS+NC组（P=0.002）；对照+NC组与PCOS+miR-320-3p mimics组组间差异无统计学意义（P=0.146）。②对照+NC组、PCOS+NC组、PCOS+miR-320-3p mimics组的4-细胞率组间差异均无统计意义（均P>0.05）；三组囊胚形成率分别是75.89％（85/112）、59.22％（61/103）、72.64％（77/106），与对照+NC组相比，PCOS+NC组囊胚率显著降低（P=0.009）；与PCOS+NC组相比，PCOS+miR-320-3p mimics组囊胚率显著升高（P=0.041）。③对照+NC组、PCOS+NC组、PCOS+miR-320-3p mimics组囊胚的总细胞数分别是85.81±9.26、67.29±7.07、82.71±8.40，TE细胞数分别是69.19±7.01、52.38±6.34、65.38±8.30，ICM细胞数分别是17.62±3.60、14.90±2.39、17.29±3.90，凋亡细胞数分别是8.64±2.80、11.73±2.07、9.55±2.81，凋亡率分别是9.64%±2.78%、16.68%±2.81%、11.18%±2.61%。对照+NC组囊胚的总细胞数、TE及ICM细胞数均显著多于PCOS+NC组（P<0.001、P<0.001、P=0.011），凋亡细胞数、凋亡率均显著低于PCOS+NC组（均P<0.001）；PCOS+miR-320-3p mimics组总细胞数、TE及ICM细胞数也均显著多于PCOS+NC组（P<0.001、P<0.001、P=0.025），凋亡细胞数、凋亡率均显著低于PCOS+NC组（P=0.007、P<0.001）。对照+NC组与PCOS+miR-320-3p mimics组组间囊胚的总细胞数、TE及ICM细胞、凋亡细胞数、凋亡率差异均无统计学意义（均P>0.05），三组TE/ICM的比值组间差异无统计学意义（P>0.05）。④与对照+NC组相比，Ulk1、Pbx3、Myc、Dppa3在PCOS+NC组4-细胞胚胎中相对表达下调（P=0.012、P=0.002、P<0.001、P=0.001），Kdm5b、Satb2相对表达上调（P<0.001、P<0.001）；与PCOS+miR-320-3p mimics组相比，Ulk1、Pbx3、Myc、Dppa3在PCOS+NC组4-细胞胚胎中相对表达下调（P=0.005、P=0.001、P=0.001、P=0.004），Kdm5b、Satb2相对表达上调（P<0.001、P=0.001），对照+NC组与PCOS+miR-320-3p mimics组组间差异均无统计学意义（均P>0.05）；与对照+NC组相比，Wdr5在PCOS+NC组和PCOS+miR-320-3p mimics组中相对表达均上调（P=0.001、P=0.003），PCOS+NC组与PCOS+miR-320-3p mimics组中差异无统计学意义（P>0.05）。Pou5f1、Klf4、Ago2在三组间差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论PCOS小鼠卵母细胞中miR-320-3p低表达影响胚胎植入前的囊胚形成率和囊胚质量，PCOS卵母细胞中补偿miR-320-3p能够改善胚胎发育潜能，提高胚胎质量。

简介：摘要外泌体是一种细胞外囊泡，包含很多生物活性物质，如核酸、蛋白质、脂质等，在细胞间通讯、炎症反应、免疫监督、肿瘤发生等生理或病理过程中发挥作用。微小RNA（microRNA，miRNA）是内源性的非编码RNA，可以通过调节mRNA参与细胞增殖、分化、凋亡等过程。目前，外泌体在生殖领域的研究处于起步阶段，有研究表明外泌体miRNA可能与配子发育、胚胎形成及不孕相关疾病等有关，本文总结最新发表文献，主要对外泌体miRNA在配子发育及相关疾病的研究进展进行综述。