简介:摘要目的比较胰胆管逆行注射牛黄胆酸钠与腹腔注射L-精氨酸两种重症急性胰腺炎(SAP)造模方式对胰外器官损害的差异。方法18只雄性远交群(SD)大鼠经随机数表法分为3组,每组6只:空白对照组(A组),L-精氨酸诱导SAP模型组(B组),牛磺胆酸钠诱导SAP模型组(C组)。造模后,分别于12、24 h割尾采血,检测谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、淀粉酶、内毒素、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,并于24 h取胰腺、肝、回结肠、肾、肺、心、脑组织,进行病理学评分。组间比较采用单因素方差分析。结果(1)12 h, B组和C组的AST(F=203.345,P<0.05)、ALT(F=303.403,P<0.05)、BUN(F=72.921,P<0.05)、Cr(F=205.601,P<0.05)、cTnI(F=35.991,P<0.05)、CK-MB(F=42.815,P<0.05)、淀粉酶(F=1 300.111,P<0.05)、内毒素(F=34.158,P<0.05)、IL-6(F=541.858,P<0.05)、TNF-α水平(F=191.687,P<0.05)显著高于A组,差异均有统计学意义;24 h,B组和C组的AST、ALT、BUN、Cr、cTnI、CK-MB、淀粉酶、内毒素、IL-6、TNF-α水平显著高于A组。与12 h比较,B组的AST(189.33±23.47比65.83±6.08,F=155.732,P<0.05)、ALT水平(156.33±10.67比55.33±4.72,F=449.603,P<0.05)高于C组,但BUN(8.80±0.56比11.02±1.33,F=14.131,P<0.05)、Cr(35.30±2.65比58.77±3.65,F=162.136,P<0.05)、cTnI(0.056±0.107比0.070±0.089,F=5.972,P<0.05)、CK-MB(5.23±0.65比6.22±0.70,F=6.426,P<0.05)、淀粉酶(1 445.89±70.37比2 063.25±72.58,F=223.767,P<0.05)、内毒素(34.00±4.70比47.09±5.90,F=18.030,P<0.05)、IL-6(102.18±7.01比147.45±7.70,F=113.465,P<0.05)、TNF-α水平(152.35±14.43比211.95±19.27,F=36.790,P<0.05)低于C组,差异均有统计学意义。与24 h比较,B组的AST、ALT高于C组,BUN、Cr、cTnI、CK-MB 、淀粉酶、内毒素、IL-6、TNF-α水平低于C组。(2)B组、C组中胰腺(F=52.612,P<0.05)、肝脏(F=9.767,P<0.05)、回肠(F=18.879,P<0.05)、结肠(F=31.398,P<0.05)、肾脏(F=54.266,P<0.05)、肺脏(F=18.971,P<0.05)、心脏(F=43.881,P<0.05)、脑的病理学评分(F=38.990,P<0.05)高于A组,差异均有统计学意义;(3)B组肝脏(2.50±0.54比2.17±0.75,F=0.769,P<0.05)、肺脏病理学评分(5.67±1.37比3.00±1.41,F=11.034,P<0.05)高于C组,损伤更重,差异有统计学意义;(4)C组胰腺(9.50±1.87比6.83±1.17,F=8.767,P<0.05)、脑(7.17±1.17比4.83±1.17,F=11.951,P<0.05)、心(5.50±1.05比3.17±0.75,F=19.600,P<0.05)、肾(7.33±1.21比5.83±1.17,F=4.765,P<0.05)、回肠(4.00±0.89比2.83±0.75,F=5.976,P<0.05)、结肠病理学评分(6.67±1.21比4.83±1.17,F=7.118,P<0.05)高于B组,损伤更重,差异均有统计学意义。结论通过增加剂量与注射频次,腹腔注射精氨酸建立的大鼠SAP模型对研究肺、肝组织损伤更具针对性;牛磺胆酸钠造模方式更适合研究胰腺、脑、心、肾、回结肠的损伤。
简介:摘要目的通过观察大黄附子汤对重症急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis, SAP)致肠道动力障碍大鼠血清胃动素、回肠Cajal间质细胞及胃动素受体的影响,探讨大黄附子汤改善肠道动力障碍的作用及机制。方法清洁级雄性Sprague-Dawley大鼠,18只,随机(随机数字法)分为对照组、SAP组及大黄附子汤治疗组(n=6)。采用逆行胰胆管注射4%牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型。对照组开腹后,找到胰腺轻微翻动数次后关腹;SAP组在造模后12、24 h分别给予2 mL生理盐水(37℃)灌肠;治疗组在造模后12、24 h分别给予2 mL大黄附子汤(37℃)灌肠。于造模48 h后,各组大鼠取腹主动脉血,测定血清内毒素及淀粉酶含量,使用酶联免疫吸附法测定血清胃动素水平;取胰腺、回肠组织行苏木精伊红染色观察病理变化;采用免疫组织化学法检测回肠平滑肌组织中Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal, ICC)表达蛋白c-kit及胃动素受体(Motilin receptor, MTL-R)蛋白的表达。结果与对照组相比,SAP组大鼠血清内毒素、淀粉酶水平均显著增高[(504.98±88.81) pg/mL vs. (17.76±5.01) pg/mL; (532.28±66.53) U/L vs. (69.45±3.61) U/L,均P<0.05],而血清胃动素水平显著降低[(195.4±6.7) ng/L vs. (301±8.10) ng/L, P<0.05],ICC表达蛋白c-kit及MTL-R免疫组织化学评分降低(P<0.05);与SAP组相比,大黄附子汤治疗组大鼠血清内毒素、淀粉酶水平均显著降低[(189.9±38.23) pg/mL vs. (504.98±88.81) pg/mL; (294.23±25.66) U/L vs. (532.28±66.53) U/L,均P<0.05],而血清胃动素水平显著升高[(264.2±8.3) ng/L vs. (195.4±6.7) ng/L, P<0.05],同时c-kit及MTL-R免疫组织化学评分升高(P<0.05)。结论大黄附子汤通过促进胃动素的分泌、提高ICC细胞的活性及MTL-R的表达而改善SAP大鼠肠道动力障碍。
简介:摘要目的观察大黄附子汤(DHFZT)对早期重症急性胰腺炎肠黏膜机械屏障的影响。方法24只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为4组:假手术(SH)组、假手术-DHFZT(SH-DHFZT)组、重症急性胰腺炎(SAP)组、DHFZT治疗(SAP-DHFZT)组,每组6只。SH组、SH-DHFZT组大鼠开腹后,翻动胰腺数次后关腹;SAP、SAP-DHFZT组经胰胆管缓慢逆行注入4%牛磺胆酸钠(1 ml/kg)诱导SAP模型。术后SH、SAP和SH-DHFZT组与SAP-DHFZT组分别用2 ml生理盐水或DHFZT于术后12、24、36 h保留灌肠。检测大鼠血淀粉酶、血钙、内毒素、白细胞介素(IL)-1β,肠黏膜二胺氧化酶(DAO)浓度变化。比较肠黏膜机械屏障紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin、ZO-1的表达及肠道病理组织学评分。采用SPSS 22.0软件中单因素方差分析(One-way ANOVA)对数据进行分析。结果SAP组血清内毒素、淀粉酶、DAO及IL-1β水平高于SH组[内毒素(132.40±8.00) ng/L比(31.70±8.40) ng/L,淀粉酶(1 163.00±71.88) U/L比(174.20±8.89) U/L,DAO(23.11±2.98) μg/L比(10.76±2.42) μg/L,IL-1β(82.20±7.14) μg/L比(25.37±2.38) μg/L,F=452.162、1 118.302、62.099、342.100,P值均<0.05],差异均有统计学意义,SAP组血钙含量低于SH组[(1.25±0.16) mmol/L比(1.99±0.10) mmol/L,F=92.292,P<0.05],差异有统计学意义。SAP-DHFZT组血清内毒素、淀粉酶、DAO及IL-1β水平低于SAP组[内毒素(68.80±5.30) ng/L比(132.40±8.00) ng/L,淀粉酶(500.70±54.67) U/L比(1 163.00±71.88) U/L,DAO(13.79±2.93) μg/L比(23.11±2.98) μg/L,IL-1β(63.03±7.27) μg/L比(82.20±7.14) μg/L,F=263.544、322.707、29.841、21.235,P值均<0.05],差异均有统计学意义,血钙含量高于SAP组[(1.72±0.08) mmol/L比(1.25±0.16) mmol/L,F=41.419,P<0.05],差异有统计学意义。SAP组大鼠48 h后胰腺及回肠组织结构均发生不同程度破坏,ZO-1、Occludin、Claudin-1表达减弱。经DHFZT治疗后,胰腺及回肠组织结构破坏有修复,肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1表达高于SAP组(ZO-1为0.80±0.12比0.09±0.02,Occludin为0.69±0.11比0.53±0.11,Claudin-1为0.42±0.02比0.30±0.01,F=204.365、6.374、172.800,P值均<0.05),差异均有统计学意义。结论DHFZT通过促进肠上皮紧密连接蛋白表达,减轻肠黏膜机械屏障的损伤,达到治疗SAP的目的。