摘要
摘要目的观察实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）模型大鼠CD4+T细胞中miR-142- 5p及叉头转录蛋白O亚族3（FOXO3）的表达，初步探讨两者靶向关系以及对EAU的影响。方法健康雄性Lewis大鼠10只随机分为模型组、对照组。模型组大鼠以过继免疫方式诱导EAU动物模型。免疫后20 d，取对照组、模型组大鼠眼球和引流淋巴结提取CD4+T细胞，并分为对照组、模型组、mimic-阴性对照（NC）组、miR-142-5p-mimic组、小干扰（si）-NC组、si-FOXO3组进行体外实验。miR-142-5p-mimic组、si-FOXO3组分别转染miR- 142-5p-mimic、si-FOXO3。健康雄性Lewis大鼠25只随机分为模型组、转染mimic-NC组、转染miR-142-5p-mimic组、转染si-NC组、转染si-FOXO3组，分别注射上述体外实验组细胞。免疫后4、8、12、16、20 d行裂隙灯显微镜检查并进行EAU评分；免疫后20 d，苏木精-伊红染色行组织病理学分级。实时荧光定量聚合酶链反应检测各组大鼠CD4+T细胞和眼组织中miR-142-5p、FOXO3 mRNA相对表达量及细胞培养上清液中辅助性T细胞17（Th17）标志物白细胞介素（IL）-17、IL-22、维甲酸相关孤儿受体γ（RORγ）mRNA相对表达量。生物信息学网站及双荧光素酶预测miR-142-5p与FOXO3的靶向关系。组间比较采用单因素方差分析或t检验。结果模型组大鼠均出现不同程度EAU症状，随时间延长，其症状加重。与对照组比较，模型组大鼠CD4+T细胞中miR-142-5p mRNA相对表达量升高，FOXO3 mRNA相对表达量下降，差异均有统计学意义（t=7.374、10.423，P=0.002、0.001）。与mimic-NC组比较，miR-142-5p-mimic组大鼠CD4+T细胞中miR-142-5p mRNA相对表达量上升，差异有统计学意义（t=6.540，P=0.003 ）。与模型组、mimic-NC组、si-NC组比较，miR-142- 5p-mimic组、si-FOXO3组大鼠CD4+T细胞培养上清液中IL-17、IL-22、RORγ mRNA相对表达量均显著增加，差异有统计学意义（F=26.110、6.292、5.269、55.660、10.490、11.430，P<0.05）。与转染mimic-NC组比较，转染miR-142-5p-mimic组大鼠眼组织中miR-142-5p mRNA相对表达量显著上升，差异有统计学意义（t=6.690，P<0.05 ）；与转染si-NC组比较，转染si-FOXO3组大鼠眼组织中FOXO3 mRNA相对表达量显著下降，差异有统计学意义（t=17.751，P<0.05）。转染mimic-NC组、转染miR-142-5p-mimic组、转染si-NC组、转染si-FOXO3组大鼠免疫后随时间延长，EAU评分均呈上升趋势。转染miR-142-5p-mimic组大鼠EAU评分与组织病理学分级均较转染mimic-NC组升高，差异有统计学意义（t=5.633、6.286，P<0.05）。转染si- FOXO3组大鼠EAU评分与组织病理学分级均较转染si-NC组升高，差异有统计学意义（t=6.852、6.635，P<0.05）。FOXO3与miR-142-5p具有靶向关系。结论EAU大鼠CD4+T细胞中，miR-142- 5p表达上调，FOXO3表达下调；miR-142-5p靶向调控FOXO3表达促进Th17细胞相关炎性因子发展。
出版日期
2021年08月14日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
